تولید گیاهان هاپلوئید از طریق کشت بساک

صفحه 1:
تولید كياهان هاپلوئید از طریق کشت بساک 

صفحه 2:
منظور از كشت بساك و كرده. توليد كياهان هايلوئيد از طريق القاى 1 ندوژنز در سلولهای هاپلونید دنه ی كرده نارس است. كياهان هابلوثيد به جند دليل داراى اهميت هستند. لين كياهان تنها يك دسته كروموزوم دارند و حتى موتاسيون هاى مغلوب در آنها تظاهر فنوتيبى دارند. متخصصان اصلاح نباتات علاقه وه ای‌به توليد كياهان هابلوئيد دارند. زيرا كه با دو برابر شدن كروموزوم ها ( به 802) جه به صورت خودبخودى يا بالمستفاده از مواد شيميايى نظير كلشى سين به كياهان كاملاً هموزيكوس دست می يابند. بعد از ظهور گیاهچه ها از بساک می توان آنها رابه مدت ۲۴ تا ۴۸ ساعت در کلشی سین ۰/۵ درصد (وزنی به حجمی) فرو برده سپس با آب مقطر استریل شستشو داد.بعد از آن بایستی سطح هاپلوئیدی را كنترل كرد. اكر ديبلوئيد حاصل نشده بود زمانفرو بردن در کلشی سین را می توان تا ‎٩۶‏ ساعت افزلیش داد و یا عمل قبلی را تكرار كرد. لين كياهان را می توان از نظر خصوصیات مطلوب گزینش کردند بدون اينكه نيازى.به 0-1 نسل براى هموزيكوس كردن آنها لازم باشد. آنها راجه عنولن والدين هیبرید استفاده نمود. عوامل متعددی در موفقیت کشت بساک موثرند. وضعیت فیزیکی گیاه و ژنوتیپ از فاکتورهای مهم هستند. معمولاً بساکهای گلهلیی که زودتر از بقیه تشکیل می شوند به کشت بساک پاسخ بیشتری می دهند. البته بین ارقام نیز اختلاف وجود دارد. مرحله گرده بسیار مهم است و معمولاً مرحله تک ین پاسخ را نشان می دهد. اعمال پیش تیمار روی غنچه با كياه كامل نيز عامل بعدى هسته ای 

صفحه 3:
لين بيش ثيمارها شامل تیمارهای دملیی عموماً تیمار سرمایی 5*؟ از چند ساعت تا ۳۸ ساعت است. در تولید مثل جنسیء تعداد کروموزومها در اثر تقسیم میوز. نصف می شود و مجددا در اثر لقاح گامتهای خر و ماده, دو برابر می شود. اگر میوز در یک گیاه دیپلوئید که دارای دو دسته کروموزوم 2۳12 می باشد. انجام می شود. سلولهای ایجاد شده دارای 262211 کروموزوم خواهند بود. اگر چنین سلولی بدون انجام لقاح به گیاه تبدیل شود به ن گیاه. مونوهاپلوئید اطلاق می گردد. این گیاه. فقط دارای یک دسته کروموزوم (06 خوهد بود. به طور مشابه. گیاهان تتراپلوئید که چهار دسته کروموزوم دارند. به صورت ۱412 نشان داده می شود. اگر تعداد کروموزومهای یک گیاه مونوهاپلوئید (06211) به طور خودبخودی یا بر اثر القا با کلشی سین, دو ‎ply‏ شود یک گیاه دیپلوئید هموزیگوس با دو دسته کروموزوم یکسان (0)2<12 تشکیل می شود. از آن جا که مونوماپلوئیدها عقیم هستند. این دو برابر شدن, برای ایجاد باروری. بسیار مهم است. در اثر لقاح دو سلول ۱0 که کروموزومهای آنها غیر مشابه است. یک گیاه دیپلوئید هتروزیگوس. به وجود می آید.افراد هموزیگوس در لثر تقسیم میوزه گامتهای یکسانی تولید می کنند. اگر دو موجود هموزیگوت که از نظر ژنتیکی خیلی با هم اختلاف دارند. با همدیگر آميزش داده شوند. نتاج آنها کاملا یکسان. ولی هتروزیگوس خواهد بود. اصلاح کنندگان, در جستجوی گیاهان هاپلوئیدی هستند که به صورت خودبخودی یا مصنوعی تولید می شوند. تعداد گونه هلیی که در شرایط لین ویوو, تاکنون هاپلوئید در آنها به طور اتوماتیک انجام شده ۰ گونه می باشد. است. بیش | 

صفحه 4:
تولید و فروانی بذور هاپلوئیدها درلین ویوو را می توان با استفاده از تکنیکهای مختلف بهبود بخشيد. ژینوژنیزز: عبارت است از ایجاد یک سلول تخم لقاح نشده در لثرتأخیر در گرده افشانیء یا گرده افشانی با گرده هلیی که در معرض تشعشعات یونیزه قرار گرفته. و یا استفاده از گرده ی بیگلنه. و حتی گاهی اوقات. استفاده از گرده های همان گونه. ژینوژئیز: به ویئه در تلاقيهاى بين كونه اى. مثلاً از تلاقى ‎Solanum phureja, Solanum tuberosum‏ سیب زمینی های دی هاپلوئید ‎(XZ=NZ)‏ تولید شده است. اندروژنیزز: در لین حللت. هسته سلول تخم. قبل از لقاح. حذف. و یا غیر فعال می شود. و از توسعه ی سلول تخم که فقط دارای هسته ی نر است. گیاه هاپلوئید ایجاد می شود. حذف زنوم در لثر تلاقيهاى معين ( بين جنسها و بين كونه ها): در لين نوع تلاقيهاء لقاح صورت می گیرد. اما به زودی یکی از ژنومها حذف. و باعث می شود که جنین فقط دارای یک ژنوم باشد. و در نتیجه. هاپلوئید خواهد بود. مثال بارز در لین مورد. لنجام تلاقی بین گونه ای در ۷۷۱93۲ ۳۱۵۲۵6۱۲ با 0۱۵۱005۱۴0 ۳۱۵۲۵60۳0 است که حاصل ن. گیاه هاپلوئید ۷۱۱93۲6 ۲۱۵۲۵6۷۲۲ می باشد. سمی گامی: در این حللت. هسته های سلول تخم و زایشی دلنه ی گرده. به طور مستقل. تقسیم می شوند» و در نتیجه ی یک گیاه شیمر هاپلوئید؛ به وجود می آید. 

صفحه 5:
تیمار شیمیلیی: با استفاده از ترکیبات شیمیلیی تولوئن آبی» مالیک هیدرازید. 1 می تولن حذف کروموزومها را تحریک, و گیاه هاپلوئید. تولید نمود. شوک با درجه حرارتهای بالا و پایین: پرتوتابی با اشعه ایکس. یا نور ماورای بنفش, در خانواده های ۱/۵6636 6.1301 6131011763. 16116136 ]) جنسهاى مختلفء قادر به تولید هاپلوئیدی هستند. طی چند سال گذشته. نتایج مشابهی در مورد کشت بساک در برنج. به دست آمده است. روز و مزیت های تولید هاپلوئیدی به شرح زیر گزارش شده است: ۱- در نتیجه ی القای هاپلوئیدی و به دنبال ن, دو برابر شدن کروموزومها؛ امکان رسیدن سریع به هموزیگوسیتی, وجود دارد. و در نتیجه, تحقیقات ژنتیکی و اصلاحی را آسانتر می کند. در شرایط هموزیگوسیتی, تفکیک ژنتیکی. ساده است و ژنهای مفلوب توسط غلب. پوشيده نخواهند شد. برای اصلاح کننده ای که با گياهان دو پایه و خودناسازگار سروکار دارد.تولید گیاهان هموزیگوس, بسیار حائز اهمیت است. در حللت دگرگشنی هتروزیگوسیتی به دست می آید. و با وجود لین که در گیامان دگرگشن. امکان خودگشنی وجود دارد. ولی به دست آوردن هموزیگوت. به دلیل وقوع اینیردینگ نت فشکل اننست: ۲- هموزيكوسيتى: هنوز در كياهانى نظير درختان ميوه, كياهان غده اى و در ان جنكلى كه داراى 

صفحه 6:
دوره ی جولنی طولانی هستند (دوره از بذر تا گل دهی) بسیار با اهمیت است. در لین گیاهان. حتی اگر امکان خودگشتی مکرر وجود داشته باشده رسیدن به هموزیگوسیتی: فرآیند بسیار طولائی است: ۳-با تولید لاين های هموزیگوس. امکان تولید هیبریدهای 1 خللص وجود دارد. در لین صورت. جمعیت 1 در حد ممکن. یکنواخت خواهد بود. ۴- در هنگام کار با گیاهلنی که به طور طبیعی پلی پلویید هستند. القای هاپلوییدی برای به دست آوردن سطح تریلوییدی, بسیار مفید خواهد بود. زیرا مطالعه ی توارث صفات و خصوصیات مطلوب. در سطح دیپلوییدی, خیلی راحت تر از تتراپلوییدی است؛ و لین بدان مفهوم می باشد که به لین تکنیک. بویژه برای گیاهان اتوتتراپلونید. کارآمد است. ۵- در اصلاح به روش موتاسیون, مونوهاپلوئیدی. از اين نظر مزیت دارد که موتاسیون های مغلوب ۸۵ ‏فوراً قابلت_شخیص‌ند لیب دیده در مورد گیاهان‌دیپلونید که موتاسیوراز ۸۵ به‎ ( (A a ‏لتفایمی|فند صادق‌نسیستاز خود گشنیگیاهان ۸۵ تسنها ۷۵ آنها موتانتهموزیگوسمفلوبخولهند بسود.‎ ۶-با القای هاپلوتیدی. و به دنبال ّن. دو برابر نمودن کروموزومها در سطح وسیع امکان تولید گياهان نرء وجود دارد. مثال مهم در این مورد. مارجوبه (01616173115 8503130105) است كه عملكرد كياهان خرء بیشتر و زودرس تر از گياهان ماده. است. گیاهان ماده مارچوبه با 26 و 50 26۷ درصد از گیاهان نر و ۵۰ درصد گیاهان ماده. به دست می آید. هاپلوییدهای تولید شده از پرچمهای گیاهان نر 2 يالا خواهند بود.دو برایر کردن کروموزومهای ۷ سبب تولید گیاهان سوپرنر ۷۷ می شود. که می توان آنها 

صفحه 7:
را از طیق تکثیر رویشی. ازدیاد نمود. اگر گیاه با ژئوتیپ 266 با گیاه با ژئوتیپ ۷۷ تلاقی یابد. تنها گیاهان نر2۷ به دست خواهد آمد. ۷- استفاده از کلشی سین برای تولید مصنوعی هموزیگوت در شرلیط لین ویوو با مشکلاتی هموله است. كه اين مشكلات. در روش اين ويتروء وجود ندارد. 8- براى لمنجام هيبريداسيون سوماتيكى. كار كردن با يروتويلاسمهاى هايلوييد. بسيار راحت تر از كاركردن با يروتويلاسمهاى د: براى اصلاح كنندكان كياد صرف توليد كياه مونوهايلوئيد: جه ذليل عقيمى آن: مهم نیست. ابتدا بایستی تعداد كروموزومهاى لن را دو برابر نمود تا بارور شوند. براى دو برابر نمودن تعداد كروموزومهاى هاپلوئید در اين ویترو دو روش وجود دارد: ۱- به صورت خودبخودی یا اندومیتوز ۲-لستفاده از کلشی سین 

صفحه 8:
به دست آوردن گیاهان هاپلوئید در اين ویترو در منلبع علمی مواد اولیه مورد نیاز برای به دست أوردن هايلوييد در اين ويترو به شرح زیر گزارش شده است: ۱- بساک: تاکنون ‎AST‏ محققین برای تولید هاپلوییدی از کشت بساک در محیط کشت جامد یا مایع ۲- دانه ی گرده: از اين روش به دلیل مسائل تکنیکی؛ کمتر استفاده شده است. ۳- گل آفین: که معمولاً در محیط کشت ملیع. کشت داده می شود. از اين روش که ابتدا در جو استفاده شده است. به ویژه در سایر گونه ها و علفهای چمنی؛ که گلهای آنها کوچک می باشد. مفید است. ۴- کشت جنین: به طور مثال در تلاقی بین ۷۱۱9۵۲6 ۳۱۵۲۳۵06۱۳۴ با طناکه‌مالا8 ۲۱۰ لقاح صورت می گیرد. ‎(oly‏ بلافاصله پس از آن. کروموزومهای ۲۱۰۵۱0100511۲0 حذف می شود. و یک جنین هاپلوئید از ۲۱۰۷۱93۲ که اندوسپرم آن رشد نکرده» به دست می آید. که بدون کشت جنین. جنین سقط می شود. ۵- لقاح کاذب:هسی و واگنر (۱۹۷۴) در شرلیط این ویترو 5لاعلا| ‎Mimulus‏ را پا گرده ی گیاه غیر خویشاوند | ]1010117161 10161713 كرده افشلنی کردند و از سلول هاپلوئید 5لا|لا۷/1۲۳] یک گیاه هاپلوئید را به وجود آوردند. 

صفحه 9:
۶- تولید تخمکهای لقاح نيافته بدون گرده افشانی کاذب: به نظر می رسد که مزیت اصلی کشت تخمک. این است که اکثر گیاهان باززایی شده. سبز بوده و از نظر ژنتیکی با ثبات تر هستند. روش دیگر القای هاپلوبیدی, تلفیقی از دو روش پرتوتابی گامتوفیتی و کشت تخمدان است. در 2 گرده افشلنی گیاهان حاصل لز کشت تخمدان در این ویترو, با دلنه های گرده پرتوتابی شده تا کنون موثرترین روش بوده است. دائه های گرده اشعه دیدهه نه تنها باعث تحریک ژینوژنیزز می شوند. بلکه در لقاح نیز نقش دارند. به طور خلاصه می توان گفت که اکثر گیاهان هاپلویید حاصل از روش این ویترو, از کشت بساک و یا گاهی اوقات. از کشت دانه گرده..به دست آمده اند. تا کنون, اندروژنیززه مهمترین منبع تولید گیاهان هايلوئيد در لين ویتروء می باشد. لین امر بسیار مهم است. زیرا دانه های گرده. به تعداد قابل ملاحظه ای در دسترس می باشند و می توانند هر کدام بطور جداگلنه. به گیاه هاپلوئید. تبدیل شوند. کث دانه ی گرده. علی رغم مشکلات تکنیکی آن, در مقایسه با کشت بساک. دارای مزایای زیر می باشد: ۱- شانس باززایی گیاهان دیپلوئید ۲- بساک به عنوان مانعی برای انتقال مواد غذایی از محیط کشت نیست. ۳- با حذف پساک. مواد ممانعت کننده ی رشد ( آبسزیک ایسد و مواد سمی) ۴- از تشکیل کالوس حاصل از بساکهاء می توان اجتناب کرد. و در نتیجه شیمرهای کمی تولید خواهد شد. اگر کالوس از یک دانه گرده به وجود آید. ژنوتیپ آن مشابه می باشد؛ در ضورتى كه اگر کالوس 

صفحه 10:
از تعداد زیادی دانه گرده (منظور کشت بساک) حاصل شود. امکان بروز شیمر وجود دارد. ۵- اغلب در نتيجه ی کشت دانه گرده. تبدیل مستقیم دانه گرده به جنین؛ اتفاق می افتد. ۶- برای القای موتاسیون و انجام دست ورزیهای ژنتیکی دانه های گرده. نسبت به بساک. مواد اولیه مناسبتری هستند. ۷- تشکیل جنین در کشت دنه ی گرده» بهتر از کشت بساک حادث می شود علی رغم مزابای کشت دانه گرده و تحقیقات زیادی که در این مورد انجام شده است. مشکلات مربوطه به تولید گیاهان هاپلوئید: در ارتباط با تولید گیاهان هاپلوئید, مشکلات بسیاری قرار گرفته است. در بسیاری از گياهان. درصد بساکهایی (دانه های گرده) که جنیهای هاپلوئید زنده را تولید مى کنند. بسیار پایین است. بسیاری از عوامل دیگر نیز ممکن است این موضوع را پیچیده تر سازند. مهمترین عبارت ۱- اغلب رشد و نموء در این ویترو انجام نمی شود. یا رشد اولیه در اثر سقط جنينء از بين مى رود. ۲- اغلب همزمان با تولید گیاهان هاپلوئید. گياهان دیپلوئید و تترايلوئيد نيز توليد مى شون ۳-لساسا مشکل به وجود آمدن گیاهان دیپلونید را می توان از طریق رشد دلنه های گرده ايزوله. مرتفع نمود, معذلک کاربرد این تکنیک, محدود به معدودی از گونه ها می باشد. ۴- لازم است که در میکروسپورهای هاپلونید. گزینش تقسیم سلولی صورت گیرد این گزینش اغلب غیر ممکن است. از از: 

صفحه 11:
۵- اجتنا از به وجود آمدن گیاهان آلبینو, به ویژه در غلات مشکل است. ۶- القای هاپلوییدی در لین ویتروء به علت ميزان موفقيت اندك لن. از نظر اقتصادی مقرون به صرفه نیست. مثال کلاسیک در این مورد. سیب زمینی (۱06۲05۱1۳) 5013۳۷1۳۳) است که در محيط اين ويوو در لثر تلاقى با گونه دیگر سیب زمینی ‎cel» Solanum phurejay‏ توليد هاپلوئید می کند. ۷- تشکیل کالوس اعم از اين که به صورت خودبخودی یا به وسیله ی القای مواد تنظیم کننده ی رشد به دست می آید. معمولاً محدود کننده است. ۸- شانس کمی برای جدا کردن هاپلوییدها در حالتی که مخلوطی از دیپلوئیدها و سطوح بالاتر پلوییدی وجود دارد. می باشد. زیرا که تحت لین شرایط پلی پلوییدها دارای قدرت رشد بیشتری هستند و هاپلوئیدها کنار زده می شوند. ‎-٩‏ انتخاب هاپلوند و تولید هموزیگوت از آنها,وقت زیادی لازم دارد زرا اغلب به تحقیقات سیتوژنتیکی یاز می باشد. گاهی اوقات می توان از مارکرهای ژنتیکیبرای گزینش استفاده کرد ‏۰- دو برابر کردن هاپلوییدها هميشه منجر به تولید هموزیگوت نمی شود. گاهی اوقات. دیپلوییدهای هموزیگوت در نتناج خود تفکیک نشان می دهند. 

صفحه 12:
Kevrousets lcrospore (n) Haploid (0) ‏مسح‎ ‎Diploid (2n) ‏مم‎ 35 ‘Tiploid (32) ‘Meiosis: ۷ 0 Mature flower ‘on sporophyte plant(2n) Ovary’ تس 1 همرس Food supply | Seed ‘see Aston Wate Lg be 

صفحه 13:


صفحه 14:


صفحه 15:
کات باب سبنوبلاسم ‎rig‏ ‎(jou ay)‏ ‎ini‏ ‎eu 55‏ ‎ee‏ ‏ایا تخسان. ذال كردم 42 Three antipodal cells Pollen tube Generative nucleus Tube ۱ nucleus )\_ Polar nuclei \ 9 Synergids Sperm nuclei 

صفحه 16:
نجات جنین 665۷6 ۴۲۸۵۲۷۵ 

صفحه 17:
مطالعه جنین های زیگوتی نارس, محققان را در پیشبرد چگونگی تکامل جنین و بلوغ بذر یاری می هینگ ۱۹۴۰ برای اولین بار تولید گیاه کامل از کشت جنین های ایزوله را زارش کرد. کشت چنینهای نارس ارکیده در ۱۹۲۲ در دستیابی به هیبریدهای نادر نقش مهمی داشته است. تکنیک نجات جنین ابزار با ارزشی برای اصلاح کنندگان بات در به دست آوردن هیبرید در گیاهانی است که به صورت معمول دارای تلاقی های عقیم لست. در اين نوع گیاهان جنین حاصل از تلاقی ها را جدا نموده و در محیط کشت لین ویترو کشت می کنند تا به یک گیاه زنده تکامل یابد. کشت جنین های زیگوتی خیلی جوان در محیط لین ویترو مشکل است. به همین علت عموما از مرحله کروی به بعد برای کشت استفاده میشود. اسید آبسیزیک ۸۸5۸ به طور طبیعی در بذر است و در خواب جنین مؤثر است. کشت جنین عبارت است از جدل نمودن و رشد یک جنین نارس یا رسیده ی استریل در لین ویترو که هدف از آن تولید یک گیاه زنده است. در سال ۰۱۹۰۴ هانیگ اولین محققی بود که توانست یک گیاه زنده از کشت جنین گیاهی از ۲۱۸1۴6۲26/) به دست آورد. توکی موفق شد از هزاران جنین سقط شده ی ارقام زود رس در ختان هسته دار كياهان کامل تولید کند. ون اوربیک و همکاران در یافتند که شیر نارگیل رشد جنین تاتوره را تحریک می کند. در سال ۱۹۴۵ کوکس و همکارانش برای افزایش سرعت جولنه زنی بذر جنین ارقام مختلف کلم پیج را پرورش دادند. از سال ۱۹۴۵ به بعد. استفاده از کشت جنین. مخصوصا در پروژه های اصلاحی بین گونه ای بسیار متداول شد. 

صفحه 18:
به طور کلی دو نوع کشت جنین وجود دارد: ۱- کشت جنین نابالغ که از بذر نارس حاصل شده است. ۲- کشت جنین بالغ که از بذر رسیده حاصل شده است. اگر نمو جنین نابللغ در این ویترو و اين ویوو پس از مرحله گلبولی شکل مقایسه شود. جنین در اين ویترو, دارای خصوصیات زیر خواهد بود: ۱- چنین رشد حجمی بیشتر داشته و گلابی شکل است. ۲- ظهور مرفوژنتیکی آهسته تر: مرحله گلبولی شکل طولانی تر, ۲- در ابتدا تنها یک لپه وجود دارد. در حالی که در اين ویووبه طور همزمان دو لپه وجود دلرد. ۴- احتمال مشاهده چند لپه وجود دارد. در صورتی که در این ویو این حللت به ندرت ‎GUI‏ می افتد. جنینهای جدا شده در لين ویترو معمولا زودتر از موعد مقرر جولنه می زنند چون هنگامی که پوسته بذر برداشته شود مواد بازدارنده حذف خواهند شد دلیل احتمللی دیگر لین است که پتانسیل اسمزی در این ویوو بیش از اين ویترو است. 

صفحه 19:
تکنیک ها در کشت جنین معمولاً مشکلی در ارتباط با ضدعفونی وجود ندارد. یک بذر رسیده کاملاً استریل می باشد و جنین پس ازبرش دادن پوسته ی بذر برداشته می شود. اگر بذرها نارس باشند. میوه های بسته؛ هنوز استریل هستند و هنگامی که لین میوه ها باز شوند تخمکهای استریل قلبل استفاده می باشند. جدا كردن جنين. مشکلات بیشتری ایجاد می کند. جنینهای بزرگ را می توان بدون استفاده از میکروسکوپ و یک منبع نور ضعیف استفاده کرد. روشهای جدا سازی: ۱- جدا سازی جنین گیلاس: ابتدا هسته هالز میوه خارج شده و جهت اطمینان از سالم بودن داخل آب انداخته می شوند. هسته های سالم گیلاس پس از استریل شدن شکسته شده و جنین قابل مشاهده خواهد بود. سپس جنین با استفاده از یک لنبر نوک تیز برداشته شده و به یک محیط کشت جامد منتقل می شود. ۲- درمورد گیاه جو دائه از سنیله جدا شده و پس از ضدعفونی شدن با لب استریل شسته می شود و سپس داخل یک بطری قرار مى كيرد به طورى كه محور بذر رو به يايين و لما به طرف بالا باشد. يس از برداشتن لماء ديواره ميوه.و وسته بذر جنين آزاد. خواهد شد. ۳- در مورد گل سوسن:۴۰ تا ۶۰ روز پس از گرده افشانی» میوه بسته استریل شده (با الکل ۹۶ درضد و شعله) و بذرها پس از جدا شدن برای جلوگیری از آب کشیدگی داخل آب استریل قرار می گيرند. 

صفحه 20:
براک اعلام نمود که کشت تخمدان و تخمک مناسبتر است زیر ۱- جدا سازی جنین» غالبا مشکل است ۲- محیط مورد نظر برای کشت جنین نسبت به محیط کشت تخمدان یا تخمک بسیار پیچیده تر می باشد. عوامل محیطی که در موفقیت کشت جنین دخالت دارند: لیجاد یک گیاه کامل از جنین بستگی به عوامل متعددی دارد که به طور خلاصه عبارتند از: ۱- ژنوتیپ ۲- مرحله نمو جنین در هنگام جداسازی: جنینهای بسیار کوچک و تملیز نيافته. معمولاً در اين ويتروء رشد نمی کنند. جنینهلیی که در این ویو تکامل بیشتری یافته اند راحت تر در اين ويتروه كشت مى شوند. ۳- شرایط رشد گیاهان مادری: معمولاً گياهان مادری در گلخلنه کشت مى شوند اكر جه گاهی لوقات گیاهان استفاده شده مثل جو در مزرعه کشت شده و دلنه پس از جدا شدن به یک محلول غذایی تهویه شده به داخل فیتوترون منتقل می شود. ۴- رکیپ محیط"کشت: چبین تبللغ نسیت به تجدین یللغ, نیازییه محیط کشت پیچیده تری دازدیا این وجود هر دو گروه نیاز به عناصر کم مصرف و پر مصرف وقند دا 

صفحه 21:
معمولاً از یک محیط کشت جامدبا 5 ۳۱ تا ۶ استفاده می شود. برای کشت جنین محیط های کشت معدنی زیادی مورد استفاده قرار می گيرند. ساکارز معمولاً به عنوان منبع قند مورد استفاده قرار می #يوجد جنينهاى بللغ. معمولاً در غلظت ۲ تا ۳ درصد ساکارز: رشد مى كتند در خللى كه جنيتهاى تابالغ در غلظتهای بالاتر ساکارز ( ۸ تا ۱۲ درصد) بهتر رشد می کنند. میزان نیاز به قند. با بزرگتر شدن جنین کاهش می یابد. غلظت آگار بین ۰/۶ تا ۰/۸ درصد در نظر گرفته می شود. از هورمون 1 و سیتوکینین. معمولاً در کش استفاده نمی شود در موارد. جیبرلین باعث تسریع رشد جنین می شود. مخصوصا هنگامی که دوره ی خواب وجود دارد و در مواردی در کشت جنین نیاز به ویتامین ها می باشد. اگر چه امروزه از محیط های کشت مصنوعی, استفاده می شود. اما در متلبع قدیمتر به استفاده از موادی مثل شیر نارگیل» هیدرولیزات کازیین و عصاره مالت آشاره شده اسهد ۵-اکسیژن ۶- نور: در بعضی موارد لازم است جنینهای جدا شده مدت ۷ تا ۱۴ روز را در تاریکی بگذرانند و يس از آن به منظور تشکیل کلروفیل در روشنی قرار گیرند. ۷- درچه حرارت: معمولاً حرارت های نسبتاً بالا ۲۲ تا ۲۸ درجه سانتیگراد برای رشد استفاده می شوند. در مورد گل سوسن مشاهده شده است گیاهانی که به مدت ۴ تا ۶ هفته در دمای ۵ تا ‎٩‏ درجه سانتیگراد نگهداری شده اند رشد بهتری دارند. 

صفحه 22:
موارد کاربرد کشت جنین ۱- رفع موانع جوانه زنی بذر ۲- جوانه زنی بذور انگلهای اجباری بدون وجود میزبان در شرایط اين ویوو, امکان پذیرنیست. ۳- کوتاه کردن دوره اصلاح نبات در تعداد زیادی از گونه های گیاهی. خواب بذر وجود دارد. که اغلب به علت پوسته بذر ویا آندوسپرم است. با حذف پوسته بذر و آندوسپرم جولنهزنی بلافاصله صورت می گیرد. جذب لب و اکسیژن از طریق پوسته بذر اهی به کندی صورت می گیرد و یا اصلاً صورت. نمی گیرد. لذاجولنهزنی انجام نشده و یا به کندی انجام می شودباید در نظر داشت که کشت جنین نارس می تواند باعث کوتاه تر کردن دوره اصلاح نبات شود. ۴- تولید هاپلوییدها: در تلاقی گونه های جو (۵۱۱۵05۱1۲۳ ۷۱۵۱93۳۱۲۱۰ 6۱۷۳۲ ۳۱۵۳۵) عمل لقاح انجام می شود اما پس از آن کروموزومهای گینه ی 0۸019051100 حذف می شوند. در نتیجه جنین هاپلویید جوه به صورت معمولی باقی می ماند. که تتها با کشت چنین می تواند به حیات خود ادامه دهد. ۵- جلوگیری از سقط جنین در درختان هسته دار ودرس: دربعضی موارد در تلاقیهای گياهان هسته دار زودرس ( هلو كيلاس, زردللو للو) انتقال لب و مواد غذليى یه جنینهای نارس به سرعت قطع شده و در نتیجه باعث سقط جنین می شود ۶- جلوگیری از سقط جنين در لثر ناسازكارى: در تلاقيهاى بين گینه ای بین جنسهای مختلف و تلاقهلیی که به عنوان مثال بین دیپلوئیدها و تتراپلوئیدها انجام می شود. آندوسپرم غالبا رشد نکرده و یا به کندی رشد می کند که باعث سقط جنین در اين ویو می شود. ۷- تکثیر رویشی (غیر جنسی): مثلاً در خانواده های گرامینه و مخروطیان (010/۴6۲36)) از چنین به عنوان یک ماده اولیه برای تکثیر رویشی استفاده می شود. جنیتها بسیار حساس به نظر می رسند چون جوان هستند. در علفهای چمنی, اندام زليى از بافت كالوس جوان نسبتاً اسان تر صورت می كيرد در حللی که در مخروطیان تشکیل کلونی از کالوسهای نارس تولید شده از جنینهای جوان و تشکیل ساقه ی اصلی نیز آسان است. 

صفحه 23:
Epicotyi ‏لبه ها‎ wo cotyledons Embryo ous دانه لوبیا Bean Seed 

صفحه 24:


صفحه 25:


صفحه 26:


صفحه 27:


صفحه 28:


صفحه 29:


صفحه 30: