صفحه 1:
In the name of ALLAH
صفحه 2:
صفحه 3:
Under supervision of
Dr.FATHI
exercise ma ۵
university of mazandaran
صفحه 4:
صورت جفتي
هستند و روي یک کروموزم صدها و
يا شايد هزاران زن وجود دارد.زن
تا
شده اند
صفحه 5:
ژن ها و کروموزوم
rs creas ellen تلا ان ۳۳ a
US) PROS Ee Re ا EES PELE Ly
متابولیزم 0006 :سلامت 000 بیشترین اهمیت را برای |
سلول دارد كه آن را مىتوان از بيجيدكى و كثرت سيستم هاى
آنزیمی شرکت کننده در همانند سازی , ترمیم و نو ترکیبی
30 eae) ا ak ONO Mew] ا ا ل O1C)
ee ane eC Se es eS ا
رسد.
صفحه 6:
۳ Crp. a hamD
/ pC Hatete AeP RU NTUL eT DIES Loree ete) 61 0M (CC Bevarverrel fy
\ شامل اتصال ©0000 يليمراز به يى جايكاه 00008 به نام
يروموتور ٠ شروع سنتز رونويسى , طويل سازى و خاتمه »
لال 70
eM reno Lee Ste
A FPP PPR OC HERCS PENS
ترجمه اطلاعات کد شده در RO®
سنتز میگردند.
صفحه 7:
۳
۳
تاریخچه ژنتیک
٠ كريكور مندل در سال 1865 قوانين حاكم بر
انتقال صفات را كشف كرد.
در سال 1900 ميلادى كشف مجدد قوانين ارائه
شا سک ار 0
«شرماك» و «كورنز» باعث شد كه نظريات او
مورد توجه و قبول قرار كرفته و مندل به عنوان
يدر علم زنتتك شناخته شود.
در سال 1953با کشف ساختمان جایگاه ژنها
ازسوی جیمز واتسن ۱0| eat رشتهاى
9 رو وود آمد که
زيست شناسى ملكولى نام كرفت.
صفحه 8:
per Ey een) م0000 92و
ee ع كك 1
A PRET
* ژنتیک مندلی یا کروموزومی
بخشی از ژنتیک امروزی
اسك إر توارت رهاق
eae) ل 0
بحث مىكند, اما برعكس در
زنتيك غير مندلى كه به زنتيىك
1 7 20
است, توارث مواد زنتيكى
peor re ME ere ae)
Pee eee meCe reir]
تحلیل قرار میگیرد.
صفحه 9:
۹۱۹8
صفحه 10:
مقدمه
FEET PR DCU NO CMEC PCH IST IPT
نمودن الگوی بیان ژنهای مورد نظر در شرایط
متفاوت و همجنين براى تعيين ساختار 080009 استفاده
می شود.
بايد توجه داشت كه 0820-05008) يى تكنيىك پیچیده ای
ا ل 0 لك
revel ل 0
ST) ا ا ا ا |
این عوامل Siw دارد.
صفحه 11:
صفحه 12:
ما سا رم هط
Heat که ما
W_ONA Strands will seperate
A/C TS
ه ۱۳:1
تداع کالم 1-1۳1 مره
W Primers bind to template DNA strands
ASS 1 A Sle) A
AGE T
Alo = S
TGAC (۲
eee,
FEO
Taq polymerase synthesizes
new DNA strands
ce eee ey
2 5 = = ———E أ 5 = 0
اس اس ا ص مسر سا د د ةا
صفحه 13:
بيان زن
بیان ژن فرایندی است كه در آن اطلاعات درون زن
از ار ۱
دست أيد.
صفحه 14:
مثال ساده از تنظیم بیان ژن
PHO ا CS GPEC Erol
1 ee mor ers aete ne] RCo oe
تواند ازلاكتوز (كلوكز+كالاكتوز)نيز براى تأمين انرزى
استفاده کند. پس درفقدان گلوکز اين باکتری نیاز به آنزیم
های جذب و تجزیه لاکتوز دارد. بنابراین در صورت وجود
0 ا
خاموش است ولی وقتی که گلوکز در محیط نیست و
لاكتوز وجود دارد زن مربوط به جذب و تجزيه لاكتوز بيان
[7
صفحه 15:
poe) 7 زن در سلول 9 7
ار ار /
بر رو ها را
۰ تکثیر در آزمایشگاه می تواند چندین بار تکرار /
شود مثلا e Raptr eC] 2 تواند 5۳۳ بار
تكرار شود.
ee mee 8 0 7
؟ لا آزمایشگاه می ترل
0 :
نگ
صفحه 16:
(ON cd ی
دستگاه ریل 0
ار(الكتروفورز)
صفحه 17:
زروش اندازه گيري نیمه
سه كس ۸
110217 2 ANAS 5
۳ ال
صفحه 18:
۷ Introduction to PCR
PCR was invented in 1984 by ( Kary
mullis ) & he received the Nobel
Prize in chemistry in 1993, for his
/ ارزو
و 3
صفحه 19:
۱ Tin hee] rs ٠
(واکنشهای زنجیره ای پلیمراز) در آزمایشگاههای
زیست شناسی مولکولی استفاده میشود. در اين
روش با استفاده از تغییرات حرارت میتوان
wh pls! clean |, OO® 5455 auls
* امروزه این تکنیک به عنوان یک روش قدرتمند در
تشخیص بالینی برای بررسی وجود موتاسیون در
Sly L sill e915 19 1
00 ژنها و همچنین تعیین غلظت مواد استفاده
صفحه 20:
کاربردهای ۵6
صفحه 21:
6
ا م۱۵9۳
دك
لك
600086-00
(Cmca ah mat ata NC يي ا OxO))
WO theless depeudeat por
صفحه 22:
RT-PCR
(Qeverse A eNom cs OD)
OCIS ered re CBSE PREYS S| تک زنجیره ای است. از
ا Pleo ا 10
ا [eee gegen monn] eect] F-1
eee TOE Sew) eeleoee 00
OOOO (corrpecrestary DOP) yl LoXo RO SoS jl RT
سنتز می شود و بوسیله تکنیک ۳06) تکثیر می یابد. بمنظور تعیین
گونه و حساسیت دارویی در ویروس شناسی و مایکوباکتریولوژی, از
ا ل |
صفحه 23:
=Short “target” product
Long product
or
lUnamplifed ONA & 2
ین
x
=
هر -
ee
مه مهن
|۷۳ Maco maeeck
Denature and
anneal primers
extend primers
صفحه 24:
Oe ac Oxy
* در اين روش بمنظور افزايش حساسیت 0۵ از
دو جفت يرايمر استفاده مى شود. ابتدا با يك
اول لب 15-0 چرخه, قطعات
صفحه 25:
NESTED PCR: P1/P7 - RI6F2n/R2
صفحه 26:
4 Ox
در اين روش از جند جفت برايمر اختصاصى براى
mr me Dty ا ا 0[
شناسى بالينى, با استفاده از اين روش امكان
شناسايى جندين عامل بيمارى در يى نمونه بطور
ل ا ات لكت
22 erin pis Yue es
صفحه 27:
Multiplex PCR primer set design
a حح ارو 1
soe |]
No intraset overiap Intraset overlap
Multiplex set A:
<= سهد :8 Multiplex set
ووو :فلم مم ممم ۵
C Simplex pair A13 rev. nested: Cam سم
‘Simplex pair A13 for. nested: ت۲۲ سم
Mute seta: ae
Matipex set 8 == B=
Simplex را
صفحه 28:
PROC-PCR
(renee ni beara a ac)
we 5000-6 سى آر yous sly (PROC-POR)
های نقطه ای بکار می رود و از دو جفت پرایمر
2900 واكنش در دو لوله جداكانه
ا ا ا 1
صفحه 29:
صفحه 30:
ed المع موم
9 ۳0 006 2 3
براى جداسازى 2 0000 استفاده مى شود
Isothermal amplification (~ 1h)
B Helicase
§ Polymerase
af رم
Electrode Electrode
High current Low current
response response
صفحه 31:
تخليص ©8000:
مقدار 50 تا 100 ميلي كرم از بافت مورد نظر (كبد A
موش ...ارا با روش هموزنيزه كردن (با نيتروزن
مايع) يودر كرده و با كيت مخصوص 00006 تخليص
مي کرد سیس نا زمان استفاده از آن در (RO
7
صفحه 32:
رد
1#" در استخراج 00009 بايد از دستكش استفاده
كرد.زيرا سلول هاى مرده يوست 0000652 توليد
RM Monomer clr sates
بردن 07000052 حتى از طريق اتوكلاو كردن هم
صورت نمی گیرد.پس آب و تمام وسایل باید از
ROOse . شوند.
۱ ا err peer) ۳ برای a
Pee ب
شود.
00 ل ا pC TRC SUE |
55ت
صفحه 33:
تبدیل06 به 2008
٠ ©0000 نمى تواند به عنوان الكو در ج5060)
Quy 29 orlaiwl ا ا 2 00002
sg) JI ا ا pw ub
این الگو با 068 به صورت نمایی تکثیر یافته و
PY Pee weT1bC] NORCO) 67)
Contaminations
removed by R
صفحه 34:
دللايلتبديل 00009 به 20000095
ا ا 0 ال 0 COO®
تبديل شود)
*از میان انواع 4۲00 فقط 0۲0 به 70600 تبدیل می شود
1
PSST pI aed mee err COME) Ise TEP ree (Ce)
در محیط بیرون یخچال بماند خراب نمي شود.
4-آنزيم ۱ نمي تواند 690 را به صورت الگو قرار دهد لذا
۱0 ا OT onT Eat eel
DO (ura Dptev-bhastosts Oin) 9
, مولکول 80069 به (70000 تبدیل مي شود و سپس ۳۰۲)
معمولي انجام مي شود
صفحه 35:
ا
00 011
مح تا
۳ يننا
تن
2 رن
۴
۱۱ تطلان
صفحه 36:
tefl stewphie OOO: OOB
1 $2» SOO@oLY
اسنکه تکثیر م نا
0000-2 onward sbpoly
به كونه اى طراحى شده اند كه هر يى مكمل
cn O® sb ناحیه ۳ دز یکی از رشته
(le; Pag رم
BY Se eRe ar ا PR ا
1 ea 7
eo ~
Cae AW ON Ucn نا
صفحه 37:
2 )00 ۳۵2 Por DO, ONPs For RO)
۷ aye ares hy Ua
ی mute are ae
رت
تلا
1 و S)i,9L glare ‘Duff
100
اد لیط محیطیمناسبیرا از نظر 7۷۷ و یونهای
7
5 م آنتا مینشود.
اننا
*وبال (ميكروتيوب):لوله هاى كوجى آزمايشكاهى
ل 000
را را از ويال
صفحه 38:
as
مراحلدستگام00<)
بح سل *: مرحله شروع
94 تا 9 دقيقه دماى محلول به 9 تا ع9 درجه (يا ١ به مدت
000 ا jlo 51 a2 >
ميشود. اين مرحله فقط براى 00009 يليمرازهايى ضرورى
Spe Os boas rere ne CU mts rE tmorn)|
200
0300 eet eee ا racic ral Oe
دما:94 درجه سانتي گراد
زمان:30 ثانيه تا يك دقيقه
220 م ا 00 ا
0 00 ل ا ا
رشته هاى 00009 حاصل SG 9 جدا میشوند
میگردد:
صفحه 39:
2( ار ل
ل 0
زمان:30 ثانيه تا يك دقيقه
SP aoY IP) م ا ا ا 30507
en ey es رز
باثين تر از نقطه ذو eer bn ا 20000
Pais =P Cg Fe ال 0000
rand ev eeTeas pel FOP ea enter CCRC CRN PCOS
هيبريد يرايمر-الكّو. همانند سازى 00000 را اغاز ميكند.
.3( ل 0000
پا گراد
0000
sb HOPE jl oolauwl L jel OOP a5 ale. yl 52
موجود در محلول, یک رشته )ی جدید را در جهت ۵ به ۳
مقابل رشته های الگو می سازد. در دمای بهینه, 00
ev CURE VES pet Ce Dis] bt OCR TTC DIC EN IS|D
صفحه 40:
Ly cSt ap) ا ا ا اك
و تامين شرابط بهينة, مقدار 6086© در محلول :6600 دو
ا ا م اناك
srtblai wg ل 0
اين مرحله: يس از آخرين سيكل 6008 به مدت 0 الى
0 دقيقه در دماى ٠١ الى لا درجه انجام ميشود., تا
را Bee
سازی شده اند.
*لادا امه : نكهدارى نهايى
isp) ا ا ۱
dl ا 0
ee See ia
نهاينا ميتوان محصولات 00# را بر روى ل آكارز و
ار 1
ل ل 22 0 200
ere] 5 ا ل 002007
صفحه 41:
0 ۰ i
۰ ۰ 0
۰ ۰ 8 ۰
0
oui و ۰۰
eee,
‘
60
.,? “Cus
۲ و
صفحه 42:
صفحه 43:
REACTANTS for cl sequencing Cycle sequencing
ae ‘Mader automated DNA sequencing machines use a process called
۲ ۰ ‘ye sequencing. Thi is smi tothe PCR in tat template DNA
(0 (whichis to be sequenced), riers, dNTPs end the enzyme DNA
am Fen NTF pohmerase are used Sore dANTPs ddeaqrcketietibosphats,
ul wth 0 G,C.A oT bat) are ao inched in he racon mi. Each
ee Our ANTPisabeled with aflurescent de, and the DNA stand camot
3 8 3 2 be extended beyond one of these fluorescent bases. The fragments
سوه “نيم produced re un on ayy el wich dense enough to
noble fogments that derby a single bose to be distinguished
Tamssble Fines ل Consquerty, edi the gel (hich canbe done bya scanning
loser) rea the sequence of base nthe template DNA strand.
ELECTROPHORESIS GEL
The base pu sequence i rad
inthe oppose drectonto the
j nein which the gels un, ی
[DNA fagmens the ands of which
arelbeled with orescent bass,
are produced inthe reaction
These are separated by ste
on an lactrophoresi a
صفحه 44:
1
0 ا ا
6 ا rere SOS eres br)
BUS] en (gtr)
[0 TIES Ren eee ir Cae TT CST) Ve VEL ES PS perce
000 0 ا ا On rey
۱ ا ere rears pe [a
پر
| ا cee ae
1 cae Tel Ep] eC S/Prcroe cnt AaeC Ny
ee eres ل
ا ce OSB ver)
نام برد .
صفحه 45:
اال اب كد رزوي رف 1
دور 7
uilGl a) Peer eee 1 4 ۱ 1
Se 00 ذرات در یک مایع تحت میدان الکتریکی
Ras
لغت فورز به معناي حرکت و تحرك است و
۳
و
~
صفحه 46:
ل 20 0
ا 7 7 0 7
دا ای Aesth Mal es Uh
خواص فيزيكى مانند شكل فضايى, وزن مولكولى
ice
7
7
۸
صفحه 47:
نماي ساده از دستگاه
SECU Pree
hed 77 خلاء: 35
الكترود منفي و يك الكترود مثبت در دو طرف
ذره باردار مي باشد. اسيدهاي نوكلئيك داراي بار
الكتريكي هستند. ات
اسيدهاي نوكلئيك داراي بار م
0689 رشته
:داراي بار الكتريكي منفي ه
(©008 داراى شارز منفى ١
22 ا 2
G sw L unaic ules ۱۳
صفحه 48:
ار را را 5
کار ار ۱( ۲۱۱
باشد ذره موردنظر به تنهايي و با سرعت شتابدار تا
رسيدن به الكترود مثبت حركت كرده و برقراري جريان 1
وفقي کل ار است با به ری جرباناالکتريکي فطع مي x
الكتريكي در تانك الكتروفورز همواره از الكترود منفي به
سمت الكترود مثبت است. البته اين مطلب در مورد رشته
01008 كه داراي بارالكتريكي م
صفحه 49:
تحرك الكتريكي معيار اصلي سنجش در جداسازي مولكول
وا را ۱
تحرك است. درحالي كه وجود بار باعث زودتر رسيدن
ذره به قطب است. هرجه ذره بزركتر باشد و شكل آن
از حالت كروي دور باشد ضريب اصطكاك ١١ بيشتري
داشته و تحرك الكتريكي كمتري داراست.
درواقع تحرك الكتريكي هر ذره وابسته به شكل و اندازه
ا ا 2 2
كه ارتباط مستقيم با اندازه و شكل ذرات دارد هرجه
ذره به شكل كروي نزديكتر باشد ضريب اصطكاك
كمتري دارند.
صفحه 50:
۱
ا ا ل ل 30
نشانداركردن قطعات با يرب هاى راديواكتيو كار مى كند و
ا ا L WL cywlur oF cul
8
1 EE Bela] cel ec peer ere tsee tS) bC) lem
اندازه گیری چگالی:تراکم باند 00 بر روی ژل آگارز رنگ
2 ا ا ا nC eer
كزارش كنند. كر جه اين روش از حساسيت دو روش فوق
برخوردار نيست ولى در بسيارى از موارد كاربرد فراكيرى دارد .
صفحه 51:
يك
صفحه 52:
وسایل 9 در 7
الکتروفورز:
pacer pian
Cee a Rac te
صفحه 53:
صفحه 54:
5. ماكروويو
صفحه 55:
(جهت برقراري جریان
الكتريکي در تانك الکتروا
صفحه 56:
all, يودر آاكارز:
2 07 : اتیدیوم برماید
pyre eres) erent 9)
قوي است)
TOE Ux .3
صفحه 57:
ee RCE ea 0 د. این
aw cll, 0 peace Rel Lee weep)
اندازه قطعه مور 1 ا
Dyes Eee ord 00
الرحسب اندازه قطعه زل 1؟
w 90
SRT cera ل
pO en )71 استفاده
كمتزين درصد ل آكارز در حدود (
مي باشد.
صفحه 58:
CRG 0 pen :(أتیدیوم
etre] Reve Ree wous) Were Rowe] Rept e a ee
بخارات آن بايد يرهيز نمود و يسمانهاي مرتبط با
Lgl jaw ا ل ppl
لك Reed a cre eee Re Teo
شيميايي اين ماده م2۳ممنایمه مي باشد. وزن
EULER ane =a > UC Beir Cerne SLT)
صفحه 59:
ae ما رم
ترکیبات این ماده عبارت است از برموفنل و سوکروز و
yer ee renee eC) ل دق
و وزن مولكولي 3/342-.«() حركت اين رنك نشان
ratty) 1
Se ا PURO eed ee ApS ee Roe ee
. محلول در داخل زل است
سوكروز 9640 و برموفنل 9925 را با يكديكر مخلوط
Eee ا ا ل لي لل عام
صفحه 60:
(۳۹_۹7
تركيبات اين ماده به قرار زير است. تريس, COVES
, بوريك اسید
صفحه 61:
/ 9 oe
1. يودر اكارز را وزن كرده و درون بشر يا
ارلن بريزید. /
2 بط ۳00۵ را که در دسترس است توسط
Sew wih
1250
صفحه 62:
(Cust) cuwS $9) y |b (Cowb) كمب . 8
موردنظر قرار دهید و فاصله بين 9
oe زب ابن
0 7 ۱۵ $9 Pe keer Pele)
صفحه 63:
Qululy lL) POC kk .4 00 7
استوانه مدرج داخل ارلن يا بشر ريخته و به
GrTTy| 0
5. محلول داخل ارلن را در داخل ماكر 1
داده يا بجوشانيد بطوري كه ذراء ١
كاملاً حل شده و ذره اي داخل ١١ 1
rie 500
و سيس محلول موردنظر را سرد
6. به محلول درون بشر در حدود
(©-0) از اتيديوم برومايد توسط
| Epvevery
7. محلول را تكان دهيد تا اتيديوم
بروماید کاملا در آن حل«شده و
محلول یکنواخت 520
صفحه 64:
[0 TROT SP EOL Eo 8
9 2 ريخته ودر حدود (520090 صبر
31
صفحه 65:
9. زل را به همراه 2 داخل تانك ۱ ۱
قرار دهيد و جاي أن را ثابت كنيد و سيس
Bas It Freecall PO A 10100
Reet
و000
صفحه 66:
طريقه ران كردن
Provedure) ۹
el به تيوبهاي حاوي نمونه به ازاء هر ا9 از نمونه
م ا ا به آن
aslol کرده و خوب ف
درون هر ءط؛ را داخل
راست از ژل مسنم كنيد و
در اخرين جاهك نيز مار
را ران کنید.
صفحه 67:
صفحه 68:
4 پس از 00-6 5 دقیقه ژد را از تانك ‘
ee es |
دهيد.
0
در داخل دستگاه
ژل را بگیرید
Subjoct Subjoct Subject
3
صفحه 69:
صفحه 70:
42 ۱ FIN Serra
ژل را از کست خارج کرده و داخل دستگاه اظ) -1
Oe ا ال ا ا he Ere y Pe pCR (a
/ 0 Bors LCrtn)
صفحه 71:
2- مانیتور را دوشن کرده و ازطریق مانیتور محل قرارگرفتن "م
99
ie] ا ا ل ا 10 1
نمایان شوند.
aul L -4 )+( 9 0
صفحه 72:
لي جه ار
cece) ل ا م
بگیرید:
i) شرس | ee a a
۳ 5
او
صفحه 73:
StF a ee] ar ern EPs | 1
OC ae a eee) O
تغییرات و موتانتها را تشخیص داد و یا حتي
وجود یا عدم وجود 20(0) رایتر را مشخص
1
صفحه 74:
Figure S-2: Gel Electrophoresis
DNA Sample
4. Resticton enzymes deave
DNA into smaller segments
of varous sizes,
2 DNAsegments are
loaded into wells in a
porous gel. The gel floats in
a buffer solution within a charnber
between two electrodes,
3. When an electric curent is
passed through the chamber,
DNA fragments move toward
۵ 0 the positively-charged cathode.
4 Smaller ONA segments
move faster and farther
than larger DNA segments.
صفحه 75:
صفحه 76:
روش اندازه گیری کمی
REBL TIDE PCR
۷
4 : ۳ ۱
| \ 2
نك" . الع
صفحه 77:
Qed Tie PCR
0 dio
POWs ا ا ben Fat Ste See We Trt)
رسكن يقنوانايق روش اتقلابى تنبيت كرده ابينات ..تكنيق هاى
Retire Sire SVK ا ry
ere eR er eC ROCK CE CPEN ا
Rory ROS Ye (UP ENC BCD err el MULL Bte wT SET)
رشد وتكامل أن دائم در حال رشد ومورد توجه است .
NC eae Bea ا ا ل ا ا ا كت
۱ ولس rr uly apron ric.
200 بود. قدم بزركى Rh MN ae eee oe Tse
اس ترين وتخصصى ترين روش كه
صفحه 78:
0 ل ا ا ل A Ose Ly)
نمودار در حين زياد شدن تعداد كيى هاى توالى مد نظرتان
۳ ا ا ss)
0
صفحه 79:
0 0 (Nery
همزمانت حنپ وششدامنه اعاز سیکلها از
| هاعف لورسانت
از يكيا جندينواكنشزنجيره اىيليمراز بصورت /
سيكنال هاى فلورسانت از هر واكنش ,
PIO AL) ا 0 00
اندازم کسوس سس
5
صفحه 80:
7 ۱۱۹ loi SK oul L POR Go Sy ojlail
/ (evened barcee cee eee] UME OCHO ERS
رونویسی کننده معکوس شروع شد . دو نوع آنزیم 4۲۱ در
Berrie nr ee Sect sa (OMB trent Sele T0816] 0
وهمكارانش در سال 2004 وآنزيم 000:0 توسط زرارد
/ 0
صفحه 81:
ا 2 || ]||| || و as 7 ۳ ای er
كاربردهاى لا ل م0
٠ . تعيين تعداد كيى از هر ژن: 2007 ,دا۷۷:
Man® Gene Copy Number
Protocol for 7900HT ;
Giulietti, 2001:y 5 ole olive Yuri 2°
Leung, 2005 »
S Ieee] Oe Senge Soo 0ك
9 Rajeevan, 2001
ation of Array Results Page b
صفحه 82:
;Leruez-Ville, 2004 ‘leg jlo مانيتورينك
;Burger, 2003 ;Brennan, 2003
ا ری دای ای در 1
Kogure, 2004
CEA ed Bnei rasa ra OO) 2566 ادك انجام
۱ Barletta ;Adler, 2003 :(1PCR)
Saas Lind & Kubista, 2005 ;, 2004
(ae رسوب كروماتين با استفاده از اتصال .7 *»
;Braveman, 2004 :.s9b Gil-yj Gill
lype ;Wang, 2004 ;Sandoval, 2004
Puppo, 2005 ;Potratz, 2005 ;, 2005
° 8. لت تنه 3م
Espy, 2006 ;Mengelle, 2003
صفحه 83:
dolgs lulu .9 * ا
;Kearns, 2001a :CMO wll *
;Kearns, 2002 ;Kearns, 2001b
Mengelle, 2003
POT CT Cree Ta STs) Beng Fete e
2 Bryant, 2004
۶ ۰ بررسی حساسیت استریتوکوکوس پنومونیا به *
Kearns, 2002 : gulw wy
COSMOTE Boren Teel Telemed ec) e
Torres, 2003 ;Kraus, 2001 های مقاوم:
Hazbon, 2004 ;Cleary, 2003 ;
0 ا MUSE T A
Guy, ;Foulds, 2002
صفحه 84:
:)0006 اندازه كيرى 30007 آسیب به .10 ٠
Dietmaier, 2001
asl Lb gwloi yl yo Yuri phil RO
Blakely ;Blakely, 2001 رادیواکتیو:
Grace, 2003 ;Grace, 2002 ;, 2002
CIPI ES seep RCL ا
Bremer, 2002 ;Tung, 2000 :o355
۲۱ میتوکندریائی: OO مطالعه .13 ۴
Alonso, 2004 ;Liu, 2003 ;, 2002
صفحه 85:
4. شناسائی متنیلاسیون: 2001 ,1۳۱06 ااع۲ا۵)
;Lehmann & Kreipe, 2004 ;, 2004
Thomassin, 2004
5. تشخيص غيرفعال شدن زنها در كروموزوم «:
van Dijk, 2002 ;Hartshorn, 2002
Zhou :WL® sleweSq) 52 تعيين همسانى .6
2004
Gibbs ;Sabek, 2002 :giac rigu wi spy 17
2003
8. پیگیری نتایج, پس از پیوند سلولهای بنیادی
;Alizadeh, 2002 ;Elmaagacli, 2002 : jluig>
Harries, 2004 ;Thiede, 2004
0 OL eWras Rec Se NCIS SC RC ST ere)
:۴۱۳۱۵۵0 1, 2002 پیوند سلولهای بنیادی خونساز:
;Gabert, 2003 ;Sarris, 2002 ;Cilloni, 2002
Van der Velden, 2003
صفحه 86:
در سايت 21111611065161١ كيتهاى متعددى براى تشخيص
Clee ل ا 2 ا لت 20 /
شده است:
Acinetobacter baumannii
Adenovirus Type B
Adenovirus Type C
Adenovirus Type F and G
Aggregatibacter actinomycetemcomitans
Aspergillus all pathogenic subtypes
Avian adenovirus: Egg Drop Syndrome
Avian influenza: H5N1
Bacteria Hemorrhagic Septicemia
Bifidobacterium
۱ efemaneeesd
صفحه 87:
Enterococcus faecium
Enterovirus
Escherichia coli
Eubacteria
Sin Nombre
صفحه 88:
به طور کلی دو روش برای انجام 0608 کمی با
Ce eto een ee 19[
ie 3
1- سنجش غیراختصاصی 2-سنجشر
۳
Gye erent tee eas PP
0ك Te Cn CS
BBY TEN MP ONO SRO aay
. در ادامه توضیح خواهیم داد
صفحه 89:
ee سس
اين روش با استفاده عوامل متصل شونده به 00000 مثل.
ا i اين رنك از طريق
CCC a
صفحه 90:
1 را 62 1
صفحه 91:
SYBR® Green | Detection Chemistry
High Flexibility and Low Cost
Polymerization | سس
Denaturation VSS" |
A Oe انسست
%% @
9 17 —
‘of yy“ ٠
| Primer annealing
0
حابر : -amm.org.ir :
OE ل
صفحه 92:
1
مشابه 0 است.
0
ال Cur ply 910 a, DOO
0 ار را
CERO 7 ا
ا Oren
ترييك ١ افرايت0007هاى دووشتةاى مفدان سابيركرين
CRE UCnD Pry 0 ا 00
CSS TCee a | eC perry ا RHE
0 Se]
صفحه 93:
CMC KCC
صفحه 94:
OTT CIs TANCE Ory) رد ار
3285 مل متصل شونده به 000) نشان داده شده
صفحه 95:
از جمله مزایای ۵06 م6۲۹۲ ترسیم منحنی ذوب (40 71
EON Croc ا 00 افك 1
ترسيم و براى تاييد نتايج استفاده مىشود. دماى ذوب
a aS cul J9gSg0 wil sly og pio S OOO /
era eae fe ees ۳[
غلظت پروب, م
دارد.
صفحه 96:
| 7 ا ا ا cer] Be
ذوب هر نمونه را رسم کند. اين کار بوسيلة اندازهگیری تغییرات
فلورسانس در دماهاى مختلف صورت مىكيرد. مراحل انجام كار
0 0 ا ا ا ا ا ا
0 2 PCC)
a7) 94 a ا ا ا ا ا 2d2UW0
سانتیگراد میرساند, در این حالت تمام 000)ها به صورت
تكرشتهاى هستند و ميزان سايبركرين متصل شده حداقل است.
در نتیجه میزان فلورسانس ساطع شده کم میباشد. به تدریج
1
were irs. sb و در اين,مدت نوز تتباظم. شنده راز
fo pare rane’ ee PC toe MO ا ا ال es
Perea Rare Ree eRe ام ا
میگردد.
صفحه 97:
صفحه 98:
.amm.orq.ir Lles Wald 51 S52 irio yl 52
caw! POR Jgars S Por
این با تحلیل منحنی ذوب میتوا
ار اد Ne
را تشخیص داد.
نرمافزار. سرعت تغییرات را به صور
اه( سس مضاء3)
0 در محور ب و دمای دستگاه
0 0
[0 EY IS POCI RC OTST Cr eas
مىآيد كه در اين منحنى هر قله نمايانكر يى محصول 50)8)
است. قلههایی که در دماهای پایینتر هستند, نشان دهندة
قطعات كوجكتر هستند.
صفحه 99:
Ge IES PN MPTP RE EEOC) oe
| ا ا
)000)8 شده (يايينترين قله) نمونه كنترل مىباشد كه فاقد
0 ا ا ihr moer) Eee |
who poly,
در انتهاى كار دستكاه با استفاده از ۳ Bree
منحنى ذوب رسم مى شود كه جند نكته در هنكام تحليل و
بررسی نمودار حتما باید در نظر گرفته شود
صفحه 100:
2 0 ا ا ا ا ا CSerd vi Pty
9 ل ل ا ا veC Sas)
000 ا ا mt ere ts
براساس اين منحنى ما مىتوانيم مقدار و اندازة قطعات
30 2 ا ا DUTi ne Tc S)
فلورسنت قابل ردیابی کمتر باشد, قلة تشكيل شده
7 ا ا ا
7
مورد اندازه ى قطعات, هرجه قله در دماى يايينترى
صفحه 101:
2- سنجش اختصاصی:
ee aA re
OOP RAGS iNet tae 3 تقسیم
میشود. در اين روش از مکانیسم سیستم انتقال انرژی
صفحه 102:
يروب و در فاصلة نزديى به هم قرار دارند. نورى
PoC) Cs] ota PIES Ra ete تابش
(مسنعنی)) میشود که این تابش در ناحية تحریک ۰ ۶
ا ا 0 0
BRCM hes erin s wee
US s0 glbw usb soi olKiw lowe whl
BOECN 6 PC an meme)
HERON cr Sam VOEVR CN cca ae] ع
ROBT ear vn] ا 0
وان وليك eu 3
127171121 020
i a: JLail edl> 59 Quewher 9 Reporter aS sibs
صفحه 103:
1
26 0 ا ااا ا ا wil gull
2 0 ا EONS ference
Pte ee iac eh itCte tore es)
PPM از
Spee ا
ا ع cen Se Try) ce ين
نوكلئوتيد است.
در اين نوع واكنش 0008 برا
000
اد 1007
owe pe ا ل Ree SCs NSTI TSE
ere OPEN fern mere ا
9 294n0 Tyl> Quewher juli jl Reporter wu a jai
Pose re ا ا prac)
SPR ( ca apeectemo Pec \ pl AST Pet erin pe cme)
فلورسانس بيشترى تابش شده و توسط دستكا
ه ثبت میشود.
صفحه 104:
Pere 0 ا re] ect Mete ms PL YY
EP eee OOP ep (ete, fle alee) eee
err ا eS
|
©
arate sean مسج[
1!
www.amm.org.ir
صفحه 105:
صفحه 106:
صفحه 107:
صفحه 108:
صفحه 109:
RC enced (ae mee eB
ا ا EM PRO RCD Uh kU
Siar ل 0 0 00
keen) ا ا 7 3020
از اتصال به 000009 به صورت حلقه است كه به آن
ا RC 0000
ا ا ل 0 20
as Era ل 0 50
پروب به محل مورد نظر خود. ساختار سح باز شده و
۷۷۷۷۷
+
Fluorophore Quercher
Molecular
Beacon
صفحه 110:
صفحه 111:
۱
توالى يروب طورى طراحى شده كه مكمل تعدادى ۸
از نوكلئوتيدها بعد از يرايمر ل-دردع*) است. دو ۳
ا ا ا ل ا
Sey 2 ا ا 000000 انتهاى 5
ساقه به صورت کووالان 2 و انتهای 3
Ur eve OTERO Nh are 5 پروب به
صورت اد است, نور ساطع نمیشود. یک
بلاکر نیز از تکثیر پروب : 9
چرخة بعدی ۵۵<) ی جهتگیری
ا يك — —
انتهای 3 امه" وسوس ۳
en
صفحه 112:
۶ در طول چرخههای 06 همزمان با اتصال پرایمرها, لوب
يروب باز شده و به قسمت تكثير شده از جرخة قبل
EPID Y er Tae me eT 7) ا ا ا ا 0 51
حادس © نور ساطع مىشود. در مرحلة بعد يروب از
Var Berm De UN اا ا 1
ترتيب در هر بدا با افزايش محصول 02008 مقدار
فلورسانس نيز افزايش مىيابد.
۱
OU MMU) e SCC MSCS ME 0
لا ا ا PPE Tere
صفحه 113:
صفحه 114:
GCORPIODG
9
صفحه 115:
Comparison of Probe
Chemistries
صفحه 116:
Published Referewes Por rvaltiwe POR Guvresvest Ohewisirtes:
0 ee
۰
can
دوه we
0 و
۳
ا 3
8
ase 0g BBP جوا a اه
صفحه 117:
ا ل ا ل
Fig. 4.2. Representation of Optical Detection System layout.
صفحه 118:
5101
Limit of
--
n
صفحه 119:
201+ 15 صدووط أكداز
0 ‘i na at each cycle has not yet risen
ove یی
"Plateau phase
| ۳ اعم
the و۱ سس میب اس( the موی
oP POR product correkier ty the tata
spout OP target teehee
نس بودد يسفحات دا لح د ب
تسا
Cyole
*PCR is just began
e amount of fluorescence has reached a threshold
where it is significantly higher than background
(usually 10 times the standard deviation of the
صفحه 120:
صفحه 121:
7
/
2 ب MAM cr OCMC On me a
/
GTROOORD COROE DEMLOO
صفحه 122:
2000
7000
6000
5000
4000
3000
2000
1000
-1000
-2000
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 4
cycle
PCR Base Line Subtracted RFU
صفحه 123:
I, 1 | /
۳۱ 5
cycle
SERIES OF 10-FOLD DILUTIONS
HA
100000
10000
1000
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 3840 4
POR Base Line Subtracted RFU
صفحه 124:
| 1
2 بو threshold یر a
Wily
i 1000 A
2 /
5 1004 /
&
a
10 1 i 1
UNL ۱
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 3840 4
Cycle
SERIES OF 10-FOLD DILUTIONS
1
صفحه 125:
“3.360 Intercept: 33.319 Y=-3. KOK + 3.319 Inienowns
% © Standards
copy number’ reference gefié"experimental
9
“cppy number’ reference geng control,
+—target gene
l¢—intemal control gene
actin, GAPDH, RPLPO etc
ficent: 1.000. Siope:
Correlation ©
NORTHERN
صفحه 126:
AACt
EFFICIENCY METHOD
®PPROXIM®TMOVO OETLOO
صفحه 127:
PCR Base Line Subtracted RFU
A
-500
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 3234 % 38 40.42 44
Cycle
صفحه 128:
16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 38 4
صفحه 129:
A Ct = target - ref
A Ct = 9.70
PCR Base Line Subtracted RFU
Ct = target - ref
ACt=-1.7
PCR Bese Line Suibtracted RFU
صفحه 130:
استاندارد ae مورد ۹
OLCy رب
١ 9
ا اك
Ore an NOC)
ARO Os Por vertaia rbosperd proteias
ات fare, PO; 0 0
OM COCR eMC hone) ۱
سس 00 تسس
Lael ie a atl
vi COC wr OG ROO
Se سا ات
Sh
صفحه 131:
Red- ainoj 52 pian astllos sly wiipiul wlio
ييه
ا 0ك ery
9009
CON ee aC
OO OSE DI ac ROL aaa
O01 Over Buletcer BOI-PRIGD PPOO Ppphoaion Over
POOOWT POOOD Cowpenducr
۱ ONCOL az amg os AN AOL
CaO MRR KUN para Ora
(Oley Cen naa ا Ocal
i
13
صفحه 132:
: مقالات منبع
۱۱۱ ل eae Ps IS) ra
رقابتي
قدرتا... رحیمی)
2- تاثیر 6 هفته تمرین استقامتي بر تظاهر ژن ۷ كبدي موش ویستاز
۰
كاما de Cte at pene dc ered
با استفاده از روش60)8-</8).
CRUE RO Laer) ا ا ل ل لك
ات
eee ei are Tay a Pee rey en ti نا
نیمه کميچند گانه (660606)
۱ Re ral ee ST SRL Se aE CSE Lerma Len)
[1 Sevier rey ery
Ce ae ا OL Eee iar eat xe)
0ك ken te
QOortk Corvtaa Gate Daversiy, Radek, OC, OGB
i Ore eee) ay 00:06 ملس
۱۹
صفحه 133: