ژنتیک مولکولی

صفحه 1:


صفحه 2:


صفحه 3:
كه 0 ‏ا ال ل‎ cree oe eee at ae ‏م ا‎ ‏بیماریهای ژنتیکی بوجود آورده است.‎ ©- براى انجام تحقيق بر روى اساس مولكولى بيماريهاى وراثتى دو مانع اساسى وجود ا ل ا ا ‎EER‏ ‎OCHO Neen eSBs ES ETS‏ 0 Bees Te FELON bene te cP eee ier Eo) ce Oster STO (7 er Ol ak Ol) 

صفحه 4:


صفحه 5:
(CR Ae ‏كاربردهاى‎ جهت انجام بررسى هاى مختلف در زمينه امور ‎dia‏ تحتیقی مهندسی ژنتيك ضرورت استخراج 000000 از نمونه هاى مورد نظر وجود دارد. 

صفحه 6:
استخراج ژنوم اساس استخراج ژنوم شامل مراحل زیر است: ۹ ‎MES svece Tero)‏ ۱ © جدا كردن مواد غير از ©0000 <6- تغليظ 000009 

صفحه 7:
0 1- در این مرحله با توجه به نوع سلول ی ‎Pe ee‏ ا ‎Pee esp ie Te DNL Caen ea reece eel‏ ۱ 2-اغلب باكتريها بدون هيج مشكلى در يك محيط كشت مايع (©:131]111© 810112). رشد میکنند. 

صفحه 8:


صفحه 9:
شکستن دیواره سلولی و یا یز کردن سلولها ‎Te Tee Der ee ice ss)‏ ۳ Ry reno TEE OES Eve owe BEC e SS Te TSE (Crress ‏ا‎ IUD eT an sy 1 er erent ers re oe ‏ابعاد صنعتی استفاده.‎ en ES (SC Dis reer Tore) ‏می شود.‎ fa eer ee ET ST terres ite ste The Eo) ‏باكتريهاى كرم مثبت و كرم منفى متفاوت است از مواد مختلفى استفاده مى.‎ 0 ‏ا ل‎ mere) ee ‏ا ا ل‎ ions) ‏و یا هر دو استفاده می شود..‎ ۶ 

صفحه 10:
3- ليزوزايم آنريمى است كه تركيبات يليمريك را که سبب استحکام دیواره های سلولی. می شوند هضم می ‏ 1 1 حفظ استحکا پوشش سلولی است و سیب مانعت از هضم 101۷/۸ سلولی توسط. ۱ 4- با اضافه كردن مواد دترجنت ماتند 1000660371 ‎SDS Godium‏ ‎Lee)‏ ا 00 جربى ديواره سيتويلاسمى سبب انفصال و در نتيجه ياره شدن آن مى شود. 

صفحه 11:
Cell lysis, Disrupt cell wall Disrupt cell membrane 

صفحه 12:
Centrifugation to remove cell debris — DNA, RNA, protein سد ‎Centrifuge‏ Cell debris: 

صفحه 13:
Aqueous layer — (DNA + RNA) Interface (coagulated proteins) Mix with Separate layers phenol by centrifugation Cell extract 

صفحه 14:
۱ 1 برخى املاح مانند استات سديم و يتاسيم سبب رسوب يروتئينهاى موجود در مخلوط ليسن . ‎Leta sin Tet teat Ea‏ ۱ ‎wer ae ore rie eT ey‏ ۱ 'سفيد رثك در ته لوله مشاهده ميشوند. - نايع شاف روي جاو ‎SSN‏ وخللظ8 و مقدارى يروتئينهاى باقيمانده است كه ميتوان با روش قبلى (فنل - كلروضرم) اقدام به رسوب آنها نمود. 4- استفاده از ریبونوکلثاز جهت حذف 1901/4 مى توان از ريبونوكلثاز ( 1931886 ) استفاده كررد. 

صفحه 15:
۳ 1- در مواردیکه نیاز به تظی ظ ‎Cee OES‏ ا ‎eats (o)ee‏ 0 2- در دماى -20 اتانول مطلق سبب رسوب اسيدهاى نوكلئيك يليمريك ميك ردد. اضافه كردن مقدار هم حجم اتانول و ذكهدارى نمونه در دماى سرد سبب رسوب 1011/8 ۱ ‎en a rerer ere y ee‏ 00 

صفحه 16:
3- سپسبا و ۱ ‎cate‏ و و و ردد. ‏5- بملاوء این روش باعث حذف اسیدهای نو کلئیک با زنجیر» کوتاه و منومری یک ميكردد. بدين ترقيب ‎IY‏ 1 

صفحه 17:
۱۳ 5 علاط ۳ 1۳3۹090۰ Re Me coca ee Ee Cae ‏الل ا‎ Reee SSE aaa 0 ‏ل‎ aE clearer Ec! ‏مولکول دو رشته ای 06069) در میلی لیتر است.‎ ©- در مورد يك سميل خالص 000009 نسبت جذب در طول موج ‎Bele ON‏ ‎Ong‏ ا ا ا لت ل 0 3000 به يروتئين يا فنل است. 

صفحه 18:
0 POR ت ۳00 كول 00009 يا ناص را در عرض eae 

صفحه 19:


صفحه 20:
4 ایمرها و سنتز ‎Be OC)‏ 1 ۳9 0 ا ل ا 000 ‎Lemke Onesie)‏ ۱ ارا مرتفع كرده است. ا ل لاا 0000) در ازمايشكاههاى مکی کنو ge 

صفحه 21:


صفحه 22:
se Add Taq polymerase + dNTPs عسمه | | | (©) Second eye of synthesis \ Xi Original templates 

صفحه 23:
تعيين توالى 000008 ))۳0 sequeuctay) 

صفحه 24:
Cie ee Te eT ee 

صفحه 25:
)- كسترده ترين روش مورد استفاده براى آناليز توالى 00(09)» تعيين توالى ‎ard ae‏ )در ل برای ابداع 00 0 جايزه نوبل كرفتند.) ۵ در این متد که در آن از 00(00) تک رشته ای استفاده 00 واكنش علاوه بر داكسى نوكلئوتيدها (4004000) از ‎a‏ ‏اشده اى بنام دى داكسى نوكلئوتيدها (4100241005) نيز استفاده مى نوکلئوتیدها نیز می توانند مانند نوکلئوتیدهای معمولی 0 ستتز وارد ‎ES ae are oe oe‏ ‎as‏ 

صفحه 26:
Phosphate Deoxyribose 

صفحه 27:


صفحه 28:
Nucleoside base Nucleoside base dNTP ddNTP 

صفحه 29:
ATTGCGATTCG: ATTGCGATTC: ATTGCGATT ATTGCGAT: ATTGCGA’ 99 ۸0 ۸۳8 ATT | ar ۸ Direction of electrophoresis 

صفحه 30:
بس سن 0 >> > 0ن ب بن ن > سن کل > سم ن 0ن 

صفحه 31:
م 5 0 < ‎Ee‏ ‎cS‏ ‏0 ‏> 

صفحه 32:
] labelled, chaln-terminated polynucleotide (©) Detection of chain-terminated polynucleotides Detector Polynucleotides move the detector 

صفحه 33:
CAAAGGACAC AAC TAAAA 130 140 

صفحه 34:
0 Se Io err CIE SET OC mE oie Br ‏سنتز نيست در آن به يرايمر نيز نياز نميباشد.‎ © در اين روش ابتدا 00000 دو رشته اي مورد نظر از طريق اتصال يك 1 ۱ الا ا ا ‎St Sea en‏ ۱ ©- با حرارت دادن سميل دو رشته ازهم جدا شده و بوسيله زيل الكتروفورز ‎Sore‏ ل ا ا 0 ‎teen er‏ 0 

صفحه 35:
<4- يكي از باندها را از زيل ۱ 0 ا ا ا 0 2 ا ‎reer ns een‏ ‎ood‏ مستعد مي گردند. 0 ‏ا ال‎ Ts eno) ۱ ‏ا ل‎ ‏فقط يكي داراى 5000 بوده و قابل مشاهده در اتوراديوكرافي ميباشد.‎ ©- ازاينجا به بعد همانند روش سائكر است يعني 6 كروه را همزمان ‏ 1 | 

صفحه 36:
(a) Labetting and strand dissociation ممم | Separate light and heavy strands rand cleavage (4) The resulting autoradiograph 

صفحه 37:
ی موز ‎eae Can‏ ا ‎ence eS ۱‏ م ا و ا ا 0 a ۳ ‏تم‎ ee ee ae 

صفحه 38:
Polymerase “Ag ۹ ‏کر‎ ‏کت‎ اا 6 rm 2 Sulfurylase 0 ATP Apyrase 2 Luciferase 

صفحه 39:


صفحه 40:
FOB EDO er S200 ee eee eS) 0 COPE e RDO Oe LCN IpD NON FOR Seen ‏ا ا ا ل‎ y 0 ‏ا‎ eer Cena eee ray EV REE es ee meres hee Ip Yee eve DEBE neers ‏مثلاً قطع کردن ژین با دو آنزیم محدود کننده مختلف مثل 6 و‎ ‏ازآنجا که ممکنست بعضی قطعات حاصل بیش از حد بلند بوده‎ On eee aoe ean Te ‏وامكان خواندن‎ آنزيم محدود كننده مختلف براى اين منظور استفاده نمائيم. 

صفحه 41:


صفحه 42: