صفحه 1:
آزمايش هاي كيفي اسيدهاي
آمينه وپروتئین ها
صفحه 2:
اسید هاي Aina
تعریف .
واحدساختماني پروتنین ها
0 بیش از 00000 نوع درطبیعت یافت شده
9. فقط 600 نوع درپروتئین هاي انساني یافت شده
تعداد و نوع وتوالي وارتباط فضاني آنها ساختمان
سه بعدي وخواص بيولوژيك پروتئین را مشخص
مي كند
صفحه 3:
ألف)براساس خواص فیزیکو شيميائي و قطبیت
اسيدهاي آمینه خنثي (بدون بار)
اسيدهاي آمینه باردار
(R شه أسيدا شه be (td
اسيدهاي آمینه خطي ( گلیسین......)
اسيدهاي آمینه حلقوي (تیروزین»تریپتوفان»
صفحه 4:
روش هاي تشخیص افتراقي اسيدهاي آمینه
وپروتنین ها :
17 روش هاي شيميايي
روش هاي فيزيكي :
الف) كروماتوكريافي
ب ) الکتروفورز
صفحه 5:
أزمايش هاي شيميايي اسيدهاي آمینه :
Dicky De Os آز مایخ -0
شناسايي كليه اسيدهاي آمینه
Amino Acid Structure
Hydrogen
Amino Carboxyl
~— | 9
+H —_N— C__ 07
9 ee | o-
R
R-group
(variant)
صفحه 6:
هدفه شناسايي قسمت مشترك همه اسيدهاي آمینه
اساس:
نين هیدرین باعث دزآمینه ودکربوکسیله شدن اسیدآمینه شده
ودرانتها کمپلکس رومان (ممس()) به رنگ بنفش
صفحه 7:
واكنش نين هيدرين
3
II oH
Sy
J] +R ممه د
0
یمیمص
Whom | عم
مد
مک CIO,
1 1
مد سمه
ae
| ا é [| auex = 570 (Purpie)
2 i
ll
[
صفحه 8:
نکات مورد توجه :
ایجاد گاز. COC دلیل بروجوداسیدآمینه است .
©. اسيدهاي آمینه پرولین وهيدروكسي پرولین به علت
ساختمان خاص درپایان این واکنش رنگ ديگري ایجاد
NH 2 سور
CH2 HO |
a is 0
11220200
HO
proline
صفحه 9:
روش کار :
به © ميلي لیتراز محلول مجهول 4 ميلي لیتراز. معریف
نين هيدريين اضافه نموده و 6 دقیقه در بن ماري جوش
بكذاريد.
جواب مثبت : رنك بنفش
جواب مثبت براي برولين
وهيدروكسي برولين : رنك زرد
صفحه 10:
- آزمایش زانتو پروتئيك له(
هد ف + شناسايي اسيدهاي آمینه حلقوي ازخطي از طریق تشخیص
حلقه بنزني
أساس: اسيدنيتريك غليظ باحلقه بنزني ايجاد مشتقات نيتره حلقه بنزن
(زردرنك5) رامي دهد.ادامه واكنش باسود()*4 درصد وايجاد رنئك
نارنجي است.
ON
HN 0 HN 0
۱ ۱ ۱ |
سلس وم )سوه + HNO, —> HO CHy-CH-C-OH
(Yellow Colored)
صفحه 11:
روش کار :
به 0 ميلي لیتر از اسیدآمینه مجهول 0ميلي لیتر اسيدنيتريك
غلیظ (توسط پي پتور) اضافه نموده وبه مدت ©دقيقه در
بن ماري جوش قراردهيد. 1
جواب مثبت : رنگ زرد
ادامه واکنش : coal
پس ازسردنمودن لوله حدود 0-0 ميلي لیترسود6(0
درصداضافه نمائید.
جواب مثبت : رنگ نارنجي
صفحه 12:
9 آز مايش ميلو نب
هدفه : شناسايي اختصاصي اسيدآمينه تيروزين(تشخيص حلقه
فنلي)
عه( )هه
NH
اساس: معرف میلون (شامل نیترات ونیتریت جیوه) با حلقه
فنلي ترکیب خاصي بوجود مي آورد.
OH ۴ oe
QO HNOJHENO, = gy AN _N_o
QO - 0
I
ور 2 ی
1 1
Ala Al
صفحه 13:
روش کار :
به 0 ميلي لیتر اسید آمینه تیروزین 0 ميلي لیتر معرف
میلون اضافه نموده ولوله را به مدت ©-© دقيقه در بن
ماري جوش قراردهيد.
جواب مثبت : رنگ قرمز
صفحه 14:
©- آزمايش هايكينزكول جاو نامسا
هلف اختصاصي شناسايي اسيدآمينه تریپتوفان ( تشخیص
حلقه اندولي)
اساس: نمك منيزيم اسيد كلي اكزباليك دررمحيط اسيدي قوي
با حلقه اندولي کمپلکس رنگي ايجادمي کند.
2
6# و
1
Aus ۳۰ o_o
2 .© 6
یر ده اي هديا
صفحه 15:
روش کار :
به 6 ميلي لیتر ازاسید آمینه تریپتوفان 6 ميلي لیتر
معرف. هاپکین کول اضافه نموده بعد ازمخلوط نمودن حدود
4
ميلي لیتر اسیدسولفوريك غلیظ به آرامي واز جدار لوله
وارد کنید. ۳۹
جواب مثبت : ایجاد حلقه بنفش رنگ درحد -
فاصل دوفاز
صفحه 16:
آزمایش هاي پروتئین ها
آزمایش هاي اختصاصي اسيدهاي آمینه تاحدودي به محلول
پروتئین ها نیز جواب مثبت مي دهند ولي با شدت رنگ
کمتر,
آزمایش هاي پروتنین ها اختصاصي براي آنهاست.
صفحه 17:
آزمایش بیرر وی
هدفء : شناسايي محلول پروتنيني از محلول هاي دیگر
اساس: براساس ييوند بيتيدي است . پيوندهاي پپتيدي در محیط
هاي قليايي املاح مس دار کمپلکس رنگي ایجاد مي کنند.
O-n
1
(Violet)
صفحه 18:
روش کار :
به © ميلي ليتر محلول يروتئين © ميلي ليتر سود ۰ 0096
اضافه نموده يس از مخلوط نمودن ) ميلي ليتر سولفات مس 0960 به
آرامي ازجدارلوله بروي آن بريزيد به طوري كه مخلوط نشود.
جواب مثبت : تشكيل حلقه بنفش رنك درميان دوفاز
ب
7 7 \
صفحه 19:
sar
-O آزمایش رسويي پروتئین
هدف. : شناسايي محلول پروتئيني( روش تكميلي )
اساس: پروتئین ها بالیجاد پيونديوني بااسیدها دناتوره شده
وایجاد رسوب میکنند.
صفحه 20:
روش کار:
6 ميلي لیتر محلول اسيدي( اسيدتري کلرواستيك یااسید
سولفوسالیسیليك) رادرلوله ريخته و ) ميلي ليتر ازمحلول
يروتئيني رابه آرامي وازجدارلوله به آن بيفزاييد.
جواب مثبت : ايجاد حلقه سفیدرنگ درحد فاصل دوفاز