اندازه گیری هموگلوبین A2

صفحه 1:


صفحه 2:
اليك زربي ge yh 

صفحه 3:
يكي از تست هاي تشخيصي مهم جهت تأئید وجود بتا تالاسمي مینور تعیین درصد هموگلوبین,9) مي باشد . روش پيشنهادي با استفاده از کروماتوگرافي تعویض 2 ‎Dir‏ ‎cokers‏ است. کروماتوگرافي تعویض يوني از انواع كروماتوگرافي هاي مایع - جامد بوده که بر اساس واکنش متقابل گروههاي کر مولکول هموگلوبین و رزین ۰ جداسازي صورت مي گیرد. بر روي رزین يونهايي وجود دارد که قابل تعویض با يونهاي همبار خود در همولیزات مي باشند. در این روش از رزین آنيونيك دي اتیل امینواتیل سلولز 0009)68) استفاده می شود 

صفحه 4:


صفحه 5:
رزین انیونیک 299 تمایل به گرفتن بار منفی دارد . ,۳1۷) بافر ورزین پاین تر از we ‏هموگلوبین‎ lP ‏بايممثبت‎ PW ol 3 PC ‏پیدا می کند . به صورت حلقه‎ ‏جدا میشود‎ @ 66 با" 

صفحه 6:
اساس روش: 0. تورم رزین با بافر و به تعادل رسیدن آن با بافر تا 1041 رزین به رلا) بافر برسد ‎OC‏ اضافه نمودن همولیزات به ستون 9. جداسازي انتخابي اجراي نمونه بوسیله تغییر ,۳ یا قدرت يونيك بافر ‎EA)‏ ** در اندازه گيري هموگلوبین 96) به روش کروماتوگرافي ستوني مي توان از بافر گلایسین یا بافر تریس استفاده 3 1 

صفحه 7:
* رعایت نکات زیر در هنگام اندازه گيري هموگلوبین 96) توصیه مي گردد : ۰ 0 در صورتي که ژل داخل ستونها تغییر رنگ داده باشند نباید مورد استفاده قرار گیرند 2 قبل از استفاده ازستونها و بافر باید حتما" به دماي اتاق برسند. 9 بهتر است از پي پت پاستور تمیز و یا سمپلربا نوك نو جهت مخلوط نمودن رزین داخل ستونها با بافر و حل شدن حبابهای هواي داخل رزین استفاده نمود. <- ستونها ‎low rote hj) ub‏ مناسب برخوردار باشند ‎doin O-COwVkour‏ 

صفحه 8:
6 قبل از تهيه هموليزات بايد نمونه خون تام كاملا" مخلوط شود ©-يس ازتهيه هموليزات بهتراست سريعتركروماتوكرافي انجام شود ( يس از ليز كامل كلبول هاي قرمز ) م قبل از نمونه ككذاري به هيج وجه نبايد رزين خشك شود. به محض اينكه محلول رويى رزين خارج شد بايد هموليزات به ستون اضافه شود. ©از سميلر كالبيره بايد جهت برداشت اشت نمونه خونء بافرو هموليزات استفاده نمود. 

صفحه 9:
باید از لوله های مدرج استاندارد جهت جمع اوری هموگلوبین 96) از ستون و تهیه لوله توتال استفاده نمود.در صورت عدم دسترسی به لوله های فوق لوله های معمولی را به روش دستی (قلم الماس ماژیک) مدرج نمانید. 0- افزودن همولیزات باید به آرامي و درست در سطح رزين صورت كيرد و سطح آن نباید در هنگام نمونه گذاري آسیب ببیند. 0»- بهتراست از يك نوك سمپلر جهت ریختن همولیزات بداخل ستون و لوله توتال استفاده شود . 

صفحه 10:
- به محض جذب شدن همولیزات برروی رزین بایدبلافاصله بافر اضافه شود 9- اگر قبل از جذب کامل همولیزات برروی رزین» محلول بافر ريخته شود باعث كاهش كاذب هموگلوبین 90) مي گردد. <6- باید دقت شود تمامي بافر اضافه شده از ستون خارج شود. ©0- قبل از خواندن جذب نوري » بايد لوله ©0) و توتال كاملا" مخلوط شوند. 

صفحه 11:
9 باید از يك اسپکتروفتومتر کالیبره جهت خواندن جذب نوري لوله ها استفاده شود. ۵ بهتر است از نمونه کنترل صحت تجاري در هر سرى كاري استفاده شود در صورت عدم دسترسي يك نمونه كه هموگلوبین ©0 آن مشخص شده است به عنوان نمونه كنترل گذاشته شود. 

صفحه 12:
- این متد برای اندازه گیری هموگلوبین ‎DE‏ اختصاصی نیست بطوری که بسیاری از هموگلوبین های همبار با هموگلوبین نیز از ستون خارج می شوندکه شامل هموگلوبین )6,6,6 طاسب و بعضی از واریانت های هموگلوبین (0()) 90و زنجیره دلتا میباشند. لذا هموگلوبین 96)از این هموگلوبین ها قابل تفکیک نیست - در مواردی که هموگلوبین 96) بیشتر از 9072 می باشد باید به وجود هموگلوبین های واسب (),(6,() شک نمودکه همراه با هموگلوبین 96)از ستون خارج می شوند.در اين مورد نیاز به بررسی تکمیلی نظیر الکتروفورز هموگلوبین در <۳,260.6)و ۳/۱۷/26-9) و بررسی فامیلی می باشد. - اگر همه همولیزات اضافه شده یکباره از ستون پایین آید .باید به وجود سایر هموگلوبینوپاتی ها شک نمود. بیمار هموگلوبین 9) یا 0و ظ و یا هموگلوبین 02,0 دارد. - اندازه گیری هموگلوبین 6)به روش کروماتوگرافی ستونی نباید در بیمارانی که اخیرا خون دریافت کرده اند صورت گیرد. 

صفحه 13:
- وجود هموكلوبين 4096 تهانی بسیار - موارد تادر موتاسيونهاى 8] لاسمی سفت 8 تالاسمى- هموكلوبين تابايدار - صفت فموكلوبين 9- آنمى داسي شكل- آنمى مكالوبلاستيى GSS aa ‏زتجیرهدلت( 6 )با صفت 8 تالاسمی‎ cle Cal ‏همراهی‎ - - ثاثير متقابل تالاسمی0 و 8 EER a ct - حضور هموگلوبین ۵) (در این مورد صحت اندژه گیری همرگلوبین )کل می شود) - ثاثير متقابل تالاسمي0 و هموكلونين 9 - خطاهاى آتاليتيكال (أزمايش بايد تكرار شود) دي - دلتا بتا( 8 >)تالاسمى(اكر هموكلوبين *0 بالا باشد). - موارد نادر صفت 6 تالاسمى(شامل همراه شدن 8 با دلثا تالاسمى و © 89] تالاسمى) سنت ##الاسين - دلتا بتا ( 8 ؟)تالاسمى(اكر هموكلوبين *0) بالا باشد) ‎ei ok‏ - بیماری هموگلوبین با" - حضور واريانت هاى زنجيره دامنه مرجع 96 37-34 

صفحه 14:
© BD kdl. Dik Dorel WLC: (Wetervaxpies wik D. BC BDkd. (ype) ALOE W Aedes O.or |(stect BD. ) O- BP kd +Oeta Thal. ‏رم‎ ‎eds]. LBC O, WHET © Drnbk Weirv. Por a & BM. MCO O., DOW Jor border lice, Wb BS ‏امه‎ 3 © ‎Erp‏ 000006 حر 

صفحه 15:


صفحه 16:
.PLEGLIDE GLE * @riaiple: Cleviropkoresis is the wovewedt of charged particles witic oc electicd Piekls.Pt PW ©. Whs ue vexively ‏وه لوط‎ urd * Gupportay Deda : Orhibsr (Prete vehiosr) Bel(ajarver ۱۳ ‏مس‎ starch) * @awpe! Wewoboue (bC0-O0ql) * @qupwedt! Chowber,Power Supply,Cetuvse OverteOeduc,pplicain- * ‏هم‎ ‎4- ‏و6۴‎ ۳۵ pl) 0.6 

صفحه 17:
‎ww spevPic— Powe &‏ موه ناملس موی ‎Gpevitic‏ ‎Youvetic acid‏ © ج ود و و اوج (1)- 9 ‎Ortho!‏ وص امسلرواج (1)- وجا 0)- 

صفحه 18:
(Brrors Cloudy or vod. @uPPer @PPers oP teoproper PW or tose sircocty pape ‏حول هرا‎ Bond tras Lb W (leu. Opebperoxtker) Cho Lb band @urdd io Wh @ 

صفحه 19:
de 02,0,6,0 Lepore,5,0,6 e © یناه 

صفحه 20:


صفحه 21:
urd Ontode al a” e 6 Co soir 06 60 Orns: 6 4 ‏ری‎ ‎cunt Oude | ۹ 0 60 ox Go, ‏یه‎ ‎۳ 1 ۳0 ‏طلسم‎ 7 

صفحه 22:
۰ Cotioa Cxckoage Chorowatryraphy toterchooge oP charge ‏دوه معا مه و‎ ‏نون‎ (cequively ‏ده کر ( ده موه‎ orcuy va Wh (positively charge)olerule. ۰ Odvectages? -Buouted ~Ocrry sul sawple ore oP Pi -Quocificaion oP O.&Our. Wb oe ‏ارام‎ 

صفحه 23:
© Oisedvootage: ‏مهو‎ ‏اه عون ویو ولاو-ون-‎ WLC Osxnly seporses WbO,0C,/P,6,C,0,&6 Prow euck ‏اه‎ ‎Wb 6 &bepore ov-ehite wit Wb ۰ 

صفحه 24:
NORMAL HAEMOGLOBINS AND THALASSAEMIA 5 Buffer A Buffer B 1 Sample injection 2 Pump A + Pump B ‏لوم | باه اس]‎ Detector |» o waste ---> Signal > Sample —> Fluid Integrater ¥ Computer 12.6 Diagramatic representation of HPLC showing the flow of sample and buffers. Fig. 

صفحه 25:
5 ۲ له م ‎Aen‏ مبمبس يس حي ۳۳ علسلا عل اط زاغ 4 4 ‎٠١‏ Fig. 12.7 A mixture of ‏وا ره وم‎ HPLC, 

صفحه 26:
GO1IMEGLIODEG FOR 0b «Bah OHO REE WL . wo - @eec- 65 0 - جص الاصطاص (). <00-06. 0 :صصح 3) حاصد2)) خام محر ‎Potd‏ ‎ta Raagyes-‏ و عصاه) اه لاس6 سیجه؟) ان 0.99006 - 98:0.960-00:496) -96 ۰,۶ 8۹۵-۵ :902:9) عبحص نام ۳ ] Ode vut side vP reportable range should aot report CBP less than 1.6 Yr levs tho 1% qreder thor 1d.P% 110.6% 

صفحه 27:
زرا WhPHO.S%, Wh way chute it LOdc/C Wb or - Bde widow ord ‏جد‎ Wb C wil report WbOds 216.8% should be tested Por possible oP - Wb Orica ioterPereure Wh BC>dO % should be tested Por possible- presewe oF Wb Our. Wh O &Wb G we ovehte wit Wh BS Wb © sawples wuy yeurrute vary vver in the- subsequent itjevtiod 

صفحه 28:
© deqreedaicg peuks wap ooehate wits the WbOO =i peul whe suvples poutuics Wh G whick kove ut beru stored uppropriaiey review WhOC peak shape Por ul Wb G sucvplesbePore report © deyradativg peaks wuy ioterPere with the - 8 weuurewed WbOs whe sawples poutcics ‏ظ) عون‎ 6۶ have ut boro stored uppropriviel . do wt report (de result Poo ves peok is ‏حور نامع‎ Pdr& PO Guevples wits Wb vadeds should be checked - Por Wb BC&OUc peak shope 

صفحه 29:
‘Dpicdl @-Deta trol Gace ‏مج ساسا ی‎ WLBECrID% (ALLE) 

صفحه 30:
HbF: 1.0%; HbA: 38.7%; HbA,: 4.4%; HbS: 565 POSITIVE; Peripheral smear with 2+ sickle cells 

صفحه 31:
CGohubiliy test * Gickiog Wb, ia deoxpyecated state (dihivcite OusS,O0g) if teovluble & Porxes uo previpitite ot high wotadpy Pkosphote buPPer ٠ Dest wt spevitic Por Wb G,Report ‘Pos or Ory . Pos test did ont distpuisk Wh OGC,GG, G/B+ .... * Garople: whole blood packed cell ٠ Couch Pos. Control Pbout QO-FG% Wh 6 

صفحه 32:
Gource oP error ام حول نی و شوم[ ‎result Puewin,ichaa<O woutks, resect‏ ری عطه۳) ۷ ‎eoproper Deww.oP Reagecits‏ ‎eoproper wixtay oP the spevies wit Reagect‏ ‎oproper inter pretaiva oF the ne der sve‏ ‎Pose Posuive resultpersves wily‏ بل - ‎Reo cco‏ ‎Wh (oPter spleeueviowy ,Weinz body‏ 

صفحه 33:


صفحه 34:
٠ ‏نمی اس لزق‎ — de sickle vell trait, ‏تحص را یو رادم‎ oP 9S ty FS% vF total Wewodiobia berause the Wb kos u slower rote ‏ابا ما ارو اه‎ ° AP WEG is less thot OO%, start thiahiag about G-clpho- ‏تسا‎ 2 AP WEG ts yredter thor SO%, worry bout G-Beta- thofassewwia or Gichte vel ‏موه کش موه‎ 

صفحه 35:
Expected ratios Wh OG Wh GG 6-0-4 وراه وی ‎Wh G- B thd‏ Wh G- B thd wir WhO SS- 60 eo 0 200 واه 0 9 90- 9S es 90- 9S ©00- 2) Whe a> 9-00 a> 9-00 9-00 

صفحه 36:
۴ بابرا" uholooe ‏همع‎ (bethhe) Wb C-FO% Ookawa chroowutoyrupy WP >PO% Ieowuwloyicd wethods ‏ذا با‎ >29 Wh WICO —OwW Wb desaturation ‏وتان مایت‎ (stop svluica ,| PW previpitates the decature Wh) Pitered> Wh @ weosured ot SEO wv 

صفحه 37:
٠ DiPereue ‏اه‎ duplicate: O0.S%— WbhP ۵ 1% ‏ب‎ Wh 5-0 C% > Wh ۸۵ Arc cowecteraica oP Ow W 8. ‏دس حصو ة)‎ sulPate svbutice ane oritical 

صفحه 38: