صفحه 1:
صفحه 2:
تکنیک های تولید مثلی در دام sale
Reproduction
Techniquesin Animals
ed by: A. Riasi
Ph. D. in animal nutrition and Physiology
http://riasi.iut.ac.ir
صفحه 3:
<< EB
تکنیک تولید حیوانات ترانس [نیک
Transgenic Animals
صفحه 4:
a SE
Raw
اهداف این جلسه
۱- ترانس ژنسیس چیست؟
۲- تولید حیوانات ترانس ژنیکک چه اهمیتی دارد؟
۳- چه روش هایی برای تولید حیوانات ترانس ژن وجود دارد؟
صفحه 5:
جيم ا ااا <<
|
ترانس ژنسیس
” تعریف ترانس ژنسیس
۲ حیوانات تولید شده با استفاده از تکنیک ترانس ژنسیس را ترلفس ژنیکت يا
صفحه 6:
صفحه 7:
صفحه 8:
Ce LD,
اهمیت تولید حیوانات تراریخته
تولید حیوانات تراريخته از جنبه های مختلف اهمیت دارد:
۱- افزايش سرعت رشد حیواناتی و بازده بيشتر تولید محصول
۲- مقاومت بیشتر در برابر بیماری ها
۴- تولید ت رکیبات دارویی در شیر
۵- تولید حیواناتی که قادر به تامين هم وگلوبین انسانی باشند
۶- تولید حیواناتی که قادر به تامین اندام ها (قلب) برای انسان باشند
۷- تولید شیر شبیه شیر انسان
۸- تغییر تر کیبات شیر (لا کتوز» لیزوزیم» )
صفحه 9:
هم Ce
ف
روش هاى توليد حيوانات تراريخته
مهمترين روش ها عبارتند از:
” ريز تزريقى دز وكسى ريبون وكلئيكك
” استفاده از ناقل هاى رتروويروسى
” انتقال زن با كمك سلول هاى بابةاى :ووياتى
” انتقال رن با روش انتقال هسته
۲ انتقال ژن با استفاده از اسيرم
۲ انتقال ژن با استفاده از تفنكك يرتاب .1011/4
صفحه 10:
1 EP
cae
&
روش ريزتزريقى دو زكسى رببون و كلئيكك
۲ این روش برای تولید حیوانات اهلی ترانس ژنیکک استفاده شده است:
7 درموش موفقیت آمیزتر بوده است.
۲ در گاو که اووسیت کدر و دارای چربی زیاد دارد با مشکل همراه است.
# در صورت استفاده از این روش OF Gly لازم است برای مشاهده
يرون وكلئوس ها از تکنیکك های رنگ پذیری» سانتریفوژ کردن و میکروسکوپ
هاى داراى فاز كانتراست استفاده شود.
صفحه 11:
1 LD,
cae
&
ریز تزریقی دوز کسی ریبون و كلئيكك
” اولين قدم برای انجام این روش» تهیه ی رویان مناسب است.
۲ رویان های مورد نیاز باید ۱۲ تا ۲۴ ساعت عمر داشته باشند و جمع آوری
آنها از داخل اوید کت با استفاده از ۵۰ میلی لیتر محلول بافر نمکی دالبکو انجام
می شود.
صفحه 12:
1 LD,
cae
&
ريزتزريقى دو زكسى رببون وكلئيك
” قدم دوم توليد جند صد كبى از ين هاى مورد نظر با كمكك بلاسميد
باكتريايى است.
” براى اينكار ين مورد نظر را به پلاسمید باكترى انتقال داده و به باكترى اجازه
تكثير مى دهند.
”با برش دادن ناقل هاى نوتركيب و رسوب دان آنها جندين كبى از زن مورد
نظر تهيه مى شود.
صفحه 13:
Ribosomes
Cell wall
Cell membrane
Flagella
صفحه 14:
ریز تزریقی دو زکسی ریبون و کلئیکت
Bacterial DNA Plasmids CSO)
Cell replication
Integrated plasmid
Plasmid
۳
Cell
replication
صفحه 15:
1 LD,
cae
&
ریز تزریقی دو زکسی ریبون و کلئیکت
۲ قدم سوم انتقال ژن به سلول تخم تازه بارور شده است. برای اینکار ۱ تا ۲
پیکولیتر محلول بافر حاوی 107۸ بداخل پرونو کلئوس تزریق می شود و ژن
در یک محل تصادفی قرار می گیرد.
7 در عمل ممکن است چندین کپی از ژن جدید در یک موقعیت در کروموزم
قرار گیرد یا اینکه در کروموزم های مختلف پخش شوند.
صفحه 16:
1 LD,
cae
&
ريزتزريقى دو زكسى رببون وكلئيك
” زمان انجام ريز تزريقى مهم است و بهتر است در اوايل مرحله تشكيل بيش
هسته ها باشد.
© واه شده است كه انجام ريز تزريقى در اواسط و اواخر مرحله تشكيل
يرون وكلئوس ها رشد و تکامل رویان ها را بتاخیر می اندازد.
۲ مرحله ی بعد انتقال دادن رویان تراریخته به اوید کت حیوان گیرنده است.
صفحه 17:
1 LD,
cae
&
ريزتزريقى دو زكسى رببون وكلئيك
۲ کمتر از ۱۰ درصد رویان های تراريخته ی گوسفند و گاو زنده می مانند و
تنها ۱۰ درصد یا کمتر از رویان های زنده مانده تراریخته هستند و ۳۰ ۱ ۶۰
درصد نوزادان متولد شده ویژگی های مورد نظر را نشان می دهند.
صفحه 18:
1
ریز تزریقی دوز کسی ریبون و کلئیکت
5
” كاهى ين انتقال داده شده پس از ریز تزریقی به پیش هسته» به ژنوم تمام
سلول های رویان وارد نمی شود و تنها به برخی سلول ها وارد می شود.
۲ در این حالت حیوان دارای وضعیت موزائیک است که غیر طبیعی می باشد.
بطور کلی تولید حبوانات غیر موزائیکی حاصل از ریز تزریقی کم هستند.
صفحه 19:
1
ریزتزریقی دوز کسی رببون و کلئیکت
۵
Embryo created by
in vitro fertilization
DNA gene for drug
plus mammary
directing signal
injected into
fertilized embryo
Embryo implanted
into surrogate mother
Transgenic offspring
produces drug in milk
صفحه 20:
1 SER
ae
&
استفاده از ناقل های رترووبروسی
۲ استفاده از روش ریزتزریقی برای پرند گان کاربرد ندارد. زیرا رویان آنها در
داخل تخم رشد می کند. بنابراین روش اقل های رتروویروسی برای آنها بکار
گرفته شده است.
۳ از این روش برای تولید موش های ترانس ژنیک نیز بخوبی استفاده شده
است.
صفحه 21:
1 هم
ae
&
استفاده از ناقل های ر تروویروسی
۳ ژنوم رتروویروس ها از یک مولکول RNA ساخته شده است و شبيه
یو کاریوت ها است. زیرا دارای یک کلاهک متبله شده در پایانه "۵
و يكك زنجيره بلى آدنين در انتهاى ۳ است.
صفحه 22:
1 EP,
ae
&
استفاده از ناقل های رتروویروسی
۲ روش کار به این صورت است که ژن مورد نظر را به یک رتروویروس انتقال
داده و سپس رویان را به ویروس نوتر کیب آلوده می کنند.
۲ به موجودات تراربخته ای که به این روش تولید می شوند Chimeric
2
صفحه 23:
1 LD,
cae
&
انتقال ژن با استفاده از سلول های پایه رویانی
۲ سلول های پایه سلول های تمایز نیافته ای هستند که قابلیت تبدیل شدن به هر
نوع سلول (سلول سوماتیک يا سلول زاینده) را دارند.
۲ رویان ها در مرحله بلاستوسیست دارای چنین سلول هایی هستند و می توان
آنها را جدا کرده و تکثیر نمود.
۲ در این روش سلول های پایه ی رویانی را در شرایط برون تنی تکثیر کرده و
ژن مورد نظر را به ساختار ۸[ آنها انتقال می دهند.
صفحه 24:
1 LD,
cae
&
انتقال ژن با استفاده از سلول های پایه رویانی
۲ سپس سلول های پایه ی رویانی را به درون حفره ی بلاستوسیست یکک
رویان تزریق می AS
7 بعد از مدتی سلول های پایه ی رویانی بخشی از توده سلولی درونی رویان
فى شوئله
” با انتقال جنين رويان هايى به رحم حيوانات كيرنده مى توان منتظر متولد
شدن حيوانات تراريخته بود. اين حيوانات نيز از نوع كايمريكك هستند.
صفحه 25:
1 LD,
cae
5
انتقال زن با استفاده از انتقال هسته
” از روش انتقال هسته نيز براى انتقال ين هاى جديد و توليد حيوانات ترانس
ژنیک استفاده می شود.
۲ برای این منظور سلول های سوماتیک از بدن یک حيوان گیرنده گرفته شده
و در محیط کشت قرار داده می شود.
۲ آنگاه ین مورد نظر به سلول سوماتیکک متتقل شده و در ساخنار 1028 آن
جای می گيرد.
صفحه 26:
1 Sr,
ae
انتقال ژن با استفاده از انتقال هسته
سپس این سلول سوماتیک که دارای 1((۸ نوتر کیب است را به یکث
اووسیت تهی شده انتقال داده و پس از شوک الکتریکی و كشت موقت در
شرایط برون تنی به رحم حیوان گیرنده منتقل می کنند.
صفحه 27:
1 LD,
cae
&
انتقال ژن با استفاده از اسپرم
۲ انتقال ژن با استفاه از اسپرم در سال ۱۹۸۹ برای موش موفقیت آمیز بود.
۲ در این روش از سلول های اسپرماتوزئید موش به عنوان ناقل 122 استفاده
شد.
۲ از آنجا که 10۸ دارای بار الکتریکی منفی است می تواند با پرتتین های
بخش پشتی آکروزوم و کناره های سر اسپرم که دارای بار الکتریکی مثبت
هستند پیوند یابد.
۲ مشخص شد که از این روش می توان برای تولید اسپرم های تراریخته
حیوانات مختلف استفاده کرد.
صفحه 28:
1 LD,
cae
5
استفاده از تفنكك پر تاب 8۸( متصل به ذره
” در روش تفنكك پرتاب ۸( از دستگاهی استفاده می شود که ذرات
۲ از اسپرم های حاوی ذرات طلا-*3(] برای باروری برون تنی اووسیت
های گاو استفاده شده است.
صفحه 29:
The Future of Genetic
?Engineering