فعالیت ضد میکروبی این ویترو در آنتی بیوتیک ها

فعالیت ضد میکروبی این ویترو در آنتی بیوتیک ها

اسلاید 1: به نام خدا

اسلاید 2: Invitro antibacterial activity to antibiotics pr. Rastegar Lari July 2008

اسلاید 3: انتخاب آنتی بیوتیک برای درمان: - فارموکوکنتیک - شرایط بیمار برای تست آزمایشگاهی : - نوع باکتری - شرایط عفونت چگونگی اثر آنتی بیوتیک ها: الف) باکتریواستاتیک (Bacteriostatic) ب) باکتریوسیدال (Bacteriocidal)رسیدن آنتی بیوتیک به هدف مولکولی

اسلاید 4: نمودار 1: منحنی رشد باکتری در حضور غلظت های مختلفی از آنتی بیوتیک 10910810710610510410361218باکتریواستاتیکباکتریوسیدال0<a<b<c<dinoculum0acdb

اسلاید 5: تابلو 1: رشد باکتری در حضور غلظت های مختلفی از یک آنتی بیوتیک

اسلاید 6: نمودار 2: هیستوگرام درصد باکتری مهار شده در غلظت های مختلف آنتی بیوتیک و منحنی تجمع مهاری باکتری ها11,31,622,53,1250100MICMIC 50mg/l

اسلاید 7: نمودار 3: منحنی مهار باکتری در غلظت های مختلف آنتی بیوتیک بصورت تجمعی 1,622,53,125099CI 50mg/l

اسلاید 8: تعریف brique point (نقاط بحرانی)MIC (Minimum Inhibitor Concentration)ضعیف ترین غلظت آنتی بیوتیک که مانع رشد باکتری پس از 18 تا 24 ساعت در 37 درجه با چشم غیرمسلح می باشد و غلظت های آنتی بیوتیک در این حالت ضریبی از 2 خواهد بود.

اسلاید 9: (MIC 50): برابر است با غلظتی از آنتی بیوتیک که مانع رشد 50 درصد از باکتری ها گردد ( نمودار 4-12) دقیق ترین و با ارزش ترین غلظت است. حساسیت جمعیت متوسط تحت تاثیر inoclume قرار نمی گیرد و افزایش inoclume باعث افزایش هتروژنسیته باکتری می گردد.MIC 90 برابر است با غلظتی از آنتی بیوتیک که مانع رشد 90 درصد باکتری می شود که با CMA برابر استMIC 99 برابر است با غلظتی از آنتی بیوتیک که مانع رشد 99 درصد باکتری می شود

اسلاید 10: نمودار 4: تعداد باکتری های زنده در غلظت های مختلف آنتی بیوتیک پس از 18 ساعت در 37 درجه سانتی گراد I= 100%1248103104105100,10,011mg/lMIC50MIC99 MIC90MICMBC

اسلاید 11: باکتریساید Bactericideزنده ماندن باکتری ها در پدیده باکتریوساید تصادفی است.تفاوت ژنتیکی بین آنها وجود ندارد.شکل 5-12سینتیک باکتریوسایدی آنتی بیوتیک ها (Temps- dipendant) : باکتریوساید می تواند در امتداد زمان ثابت مانده حتی اگر غلظت آنتی بیوتیک تغییر کند. مثال: بتالاکتام هاNC1C2C3

اسلاید 12: (dose-dependant): منحنی باکتریوسایدی می تواند در امتداد زمان با توجه به غلظت های مختلف آنتی بیوتیک تغییر کندمثال: آمینوگلوکزیدهاNC1C2C3

اسلاید 13: MBC Point Limiteدقت آن بستگی به: شرایط کشت باکتری فاز رشد باکتری مقدار باکتری متد مورد استفاده ( ماکرودلیسیون یا میکرودلیسیون) مقدار کمی برداشت جهت شمارش باکتری

اسلاید 14: فـاکتـورهای موثـر در فعـالیت های ضدباکتـریـایی آنتـی بیوتیکارزش MBC و MIC یک آنتی بیوتیک می تواند توسط پارامترهای مختلفی تحت تاثیر قرار گیرد:Inoculumزمان، درجه حرارت، شرایط کشتطبیعت محیط کشت (مواد سازنده محیط، یون، PH و...)تکرار نتایج یکسان مستلزم استاندارد کردن روش می باشد.

اسلاید 15: Inoculumافزایش تعداد باکتریMIC متفاوتهتروژنسیتهباکتریهای تولید کننده آنزیم

اسلاید 16: محیط کشتPH اسیدی : بتالاکتام ها و تتراسیکلین ها قلیایی: آمینوگلوکزیدها و ماکرولیدهاکاهش Ca++ و Mg++ باعث کاهش فیکسه شدن آمینوگلوکزیدها بر روی غشاء سیتوپلاسمی و کاهش غلظت آنتی بیوتیک داخل سیتوپلاسم می گردد.برعکس افزایش Ca++ و Mg++ باعث کاهش MIC باکتری در برابر آمینوگلوکزیدها می شود و به غلط باکتری حساس گزارش می شود.

اسلاید 17: باید Ca++: mg/L 100-50 و Mg++: mg/L 25 باشدوجود NaCl در محیط هنگام مصرف توام دو آنتی بیوتیک یعنی بتـالاکتام و آمینـوگلوکزید باعـث مهار آمینوگلوکزید می گرددافزایش Co2 باعث کاهش PH محیط می شود.

اسلاید 18: متد آنتی بیوگرام- انتشار آنتی بیوتیک بصورت گرادیان- رقابت بین رشد باکتری و انتشار آنتی بیوتیک از منبع- 3 تا 4 ساعت زمان لازم برای انتشار آنتی بیوتیک در آگارفرمول کپر (cooper):X²= 4*D*T0*Ln(m0/m´)T0= L+G*log2 (N/N0)L= زمان انتظار G: زمان تقسیم

اسلاید 19: پارامترهایی که بر ایجاد zone مهاری تاثیر دارد.پارامترهایی که می تواند زمان انتظار (L) و زمان تقسیم (G) تغییر را دهد شامل: غلظت باکتری N0 ترکیبات محیطدرجه حرارتبدست آمدن نتایج مشابه مجدد مستلزم شرایط یکسان خواهد بود.برای همان آنتی بیوتیک با سوش های مختلف با زمان انتظار متفاوت و زمان تقسیم مختلف اما دارای حساسیت یکسان می تواند منطقه مهاری کاملا متفاوت را ایجاد کند.

اسلاید 20: انتخاب شارژ دیسک:دو برابر شدن غلظت آنتی بیوتیک تنها 1 تا 3 میلی متر قطر را افزایش می دهد. حداقل غلظت مهاری باید mm10 باشد.منحنی 8-12 ارتباط بین zone مهاری و مدت زمان انتشار آنتی بیوتیک

اسلاید 21: شرایط تکنیکیمحیط کشت Muler-Hintonآنتی بیوگرام:قطر mm4PH 7.4غلظت تیمیدین mg/ml50Inoclum 2-3*106 mlمتد غرق شدن

اسلاید 22: آنتی بیوگرام اتوماتیزه:سیستم دو غلظتی (ABAC, API, ATB)سیستم سریع

اسلاید 23: MIC: متد رقیق کردن در محیط آگار 104 باکتری MIC= 0 تا 3 کلنی رقیق کردن در محیط مایع

اسلاید 24: کنترل کیفی:با استفاده از سوش های ATCCتفسیر نتایج:طبقه بندی کلینیکیتعیین کمی و کیفی آنتی بیوتیک تقریبا مشابه استارزش S-I-R مستلزم شرایط خاص است 1- غلظت آنتی بیوتیک سرم و بافتی2- انتشار MIC3- نتایج کلینیکی مستند

اسلاید 25: شناخت و انتخاب حساسیت کلینیکی:شامل دو شرط می باشدفارماکولوژیتعیین S-I-R با توجه به غلظت آنتی بیوتیک Invivo

اسلاید 26: طبقه بندی کلینیکی:S-I-Rباکتری حساس (S)باکتری مقاوم (R)باکتری های واسط (I)Tolerance:فقدان یا مهار سیستم اتولپتیک

اسلاید 27: حدود آنتی بیوگرام:تفسیر نتایج باید با شناخت مکانیزم مقاومت باکتری ها به آنتی بیوتیک همراه باشد.آنتی بیوتیک ها و انتخاب تست آنتی بیوگرام و سوشهای مختلف مصرف توام دو آنتی بیوتیک

اسلاید 28: پایان