دانلود پاورپوینت آلكالن فسفاتاز

بنام خدا آلكالن فسفاتاز ماركرهاي تشخيصي آنزيمها غالبا درون سلولها و در اعمال درون سلولي مشاركت مي كنند. مقادير طبيعي آنزيمها در خون در محدوده معيني مي باشد. ‏در هر بافت بر اساس ويژگي هاي آناتومي و فيزيول‍وژيك، آنزيمهاي خاصي فعاليت دارند. ‏در شرايط پاتولوژيك ،صدمات سلولي ،استرس و نكروز سلولي تراواي غشاء افزايش يافته و آنزيمها به جريان خون راه مي يابند. ‏با شناسايي و سنجش آنزيمهاي هر بافت مي توان به بيماريهاي آن پي برد .كه اصطالحا گفته مي شود آنزيمها سنجش فعاليت آنزيمي ‏End Point:  پس از پايان واكنش محصول با معرف ايجاد كمپلكس رنگي مي كند كه جذب نوري آن در طول موج خاصي قابل اندازه گيري مي باشد. :Synthic سرعت تغييرات غلظت محصول يا سوبسترا در زمانهاي مختلف قابل سنجش مي باشد.با محاسبه اختالف جذب ها و زمان صرف شده.غلظت ماده مورد نظر قابل اندازه گيري خواهد بود. فعاليت آنزيمي: مقدار آنزيمي است كه يك ميكرومول سوبسترا را در مدت يك دقيقه و دماي 37درجه به محصول تبديل مي كند و واحد آن ( IU(International Unitبر ليترمي باشد. آلكالن فسفاتاز ويژگي هاي آنزيم: • در غشاء سلول وجود دارد. • در PH=10/5قليايي فعاليت دارد. • در غشاء سلولي انواع بافتهاي كبدي ،استخواني،روده، جفت و كليه يافت مي شود. • در سرم طبيعي انواع كبدي و استخواني وجود دارند. • يونهاي منيزيم ،منگنز و كلسيم فعال كننده اي آنزيم هستند • يونهاي فسفات ،بورات ،اگزاالت وسيانيد مهاركننده هاي آنزيم بشمار مي روند. تغييرات فيزيولوژيك افزايش نوع جفتي ‏حاملگي بدليل رشد زياد نوزاد و تكثير باالي سلولي ‏كودكان در حال رشد استخواني بدليل فعاليت شديد استئوبالستها و رشد استخواني افزايش نوع افزليش نوع روده اي ‏مصرف غذاي چرب بدليل جذب باالي مواد ليپيدي از ميان غشاء سلول روده اي و تغييرا ت فيزيولوژيك ساختار آن تغييرات پاتولوژيك ‏بيماريهاي كبدي: انسداد مجاري صفراوي سنگ ناشي از سنگ توده توموري داليل افزايش: -1القاءافزايش توليد آنزيم توسط هپاتوسيت هاي كبدي. -2مواد صفراوي خاصيت دترژنت دارند و باعث تغييرات غشاء وآزاد شدن آلكالن فسفاتاز مي گردند. مقادير سرمي به 3-10برابر مي رسد كه پس از بهبود به حالت نرمال برميگردد. تغييرات پاتولوژيك بيماريهاي استخواني: راشيتيسم ،استئوماالسي ،پاژه و شكستگي هاي استخوان افزايش 2-3برابري مقادير سرمي دليل :فعاليت زياد استئوبالست ها براي بازسازي استخوان سرطان: بويژه سرطان سينه()Regan افزايش 2-3برابري مقادير سرمي دليل :رشد ناكامل و سريع سلولهاي مستعد بافت پستان و تخريب زياد غشاء سلولي كمبود روي وبيماري ريكتز(مقاومت به ويتامين : )D كاهش ALP دليل :كمبود كوفاكتورآنزيم و عوامل ارثي. تعيين منشاء آنزيم ‏حرارت: نوع استخواني به حرارت(دماي 56درجه)حساس ودر مقابل نوع جفتي مقاوم مي باشد. ‏الكتروفورز: بر اساس ساختار و وزن مولكولي براحتي قابل تفكيك هستند. ‏شيميايي: با توجه به نوع سوبسترا ميزان فعاليت آنزيمي هر بافت متفاوت خواهد بود. روش شيميايي ‏سوبستراها: پارانيتروفنيل فسفات( ،)PNPPتيمول فتالئين فسفات،آلفا نفتل فسفات و فنيل فسفات. ‏بافرها: بافر فعال كننده( آمينو متيل پروپان ،دي اتيل آمين) بافر مهار كننده(فسفات ،بورات) بافر خنثي(بي كربنات) • آنزيم با فعاليت فسفاتازي گروه فسفات را جدا مي كند و محصول بوجود آمده يك تركيب رنگي مي باشد كه براحتي با دستگاه اسپكتروفتومتر قابل اندازه گيري خواهد بود. فسفات +نيترو )زرد رنگ( ‏ALP )(PNPPپارانيتروفنيل فسفات فنل مقادير نرمال ‏مردان: 306-80واحد در ليتر ‏زنان: 306-64واحد در ليتر ‏كودكان تا 15سال: 1200-180واحد در ليتر