رنگ آمیزی باکتری ها

صفحه 1:
‎wel ۳۳‏ های مورد | ‎Oe) ever‏ ميكروب شناسى ‏: گردآوری مهرداد احمدی ‎0 ‎ 

صفحه 2:
لس رنگ ها از نظر نوع ترکیب مواد رتگی به دو گروه رنگ های ساده و رنگ های مرکب تقسیم می ‎Alpe‏ wale Gls (ll ب)رنك هاى مركب: ل ل ا لل ‎aes‏ ۱ رابطه با این امر رنگ ها از نظر گرایش به اجزا یاخته یا رنگ دوستی هسته و سیتوپلاسم به سه دسته ا eer Sra) a ‏ا ال ل‎ eS) Teed) Se Dee ere ne ere Eee ase) Sets Te EST Bee Rc cums see Tes enters Sorc ee ed ‏ا ا ل‎ ess) ۲ 1 ل ا سا ‎ees‏ ا ل 00 

صفحه 3:
= رنگ ‎el‏ ساده Se Ree ee nei مراحل شامل : ۱- تهیه نمونه ۲ شک کردن ۳ فیکس کردن ۱ IN Peo CPL ca pe tle 0 Rog ese, oe aed ‏ل‎ 

صفحه 4:
رنك آميزى كرم 5 و ‎٩‏ ‏دو دسته گرم مثبت وگرم منفی تقسیم می شوند . ۱ Rn eee ‏ا‎ ents tees) هو ‎SS ett Sas a Sats OSE eens LT‏ ۱9| وباكترى هاى كرم منفى به رنك .. .. مشاهده مى شود م ا ا ل ا ۱ دو كروه عربوط به خواسى است عد در ساخديان ديوارء سلولى آنها جود دارد اماس ساختيان را ‎Fee‏ باكترىهاى كرم منفى ضخامت آن به حداقل مىرسد. 

صفحه 5:
روش انجام : ۱- رنگ کریستال ویوله رابه مدت ۴۵۱۲۰ ثانیه برروی گسترش ريخته ا ‎Peeper renee oe‏ 0[ يس از شستشوى كسترش با آب به مدت ‎٠‏ "تاه ثانيه با لوكل مى -7 يوشانند لوكل باكريستال ويوله تركيب شده وايجاد كميلكس هاى بزركى مى نمايد كه باعث تثبيت رنك كريستال ويوله درداخل ديواره سلولى باكترى مى ‎es‏ ا ‎eee SEL Sl Lew‏ 5 

صفحه 6:
Augie, ‎yy‏ تلا ای ار لام به مدت ‎١8‏ تا١؟‏ ثانيه در معرض موادرنگ زداماند الکل استون قرار می گیرد سپس یا آب مورد شستشو قرر می گیرد . درباکتریهای ‎ne Das ES ee ee en Rae Meo oe‏ ا ل كم ‏حذف اين لايه ها وغشا مى كردد وباكترى رنك مراحل قبل رازدست مى دهد . ولى درباكتريهاى كرم مثبت به ‎enc‏ ا ا ا ا ا ا 6 ‎[۱ an nOeny ae OF IP Tee aS ae OF IE Sey ee OF Ie ‏خواهند ماند‎ ‎1 ‏ا‎ oe ‎ ‎OT Sak sae ES ee belt DSTI aS ce ace Te ee coe ite ae cae ‎See ree See Re een ‏ا‎ 

صفحه 7:


صفحه 8:
در رنك آميزى كرم مثبت باكتريها را به ه كروه تقسيم بندى مى كنند: ۱ ا ا ل كوكوس (كرد) كرم مثبت -1 ‎ed‏ ا ا ا لل ل 0 | 2 rrr eer ca nish a are ners ae 

صفحه 9:
ASM MicrobeLibrary.org © Pfizer Inc. 

صفحه 10:


صفحه 11:


صفحه 12:


صفحه 13:
Oe aera ea aa و =", ASM Microbelibraty.org @ Pfizer Inc. 

صفحه 14:
ASM MicrobeL ibrary.org © Pfizer Inc. 

صفحه 15:
۳ 

صفحه 16:
om bj cel Sy برخى از باكترى ها (باسيل سل ,,جذام و برخى از جنس هاى نوكارديا )به واسطه دارا بودن میزان بالایی از چربی به آسانی به روش های معمولی رنگ آمیزی نمی شوند بلکه ‎OS ee mts TO SE ICS eo ea ce ae es‏ پیکرشان نیاز دارند.به واسطه این نوع رنگ آمیزی این باکتری ها حتی توسط اسیدهای ‎IPS] tiresome Ivan SP Reon gee Vr CN ty oI CI CS ee LS eer ERE)‏ ‎ee eh ye er ene |‏ ‎eee Se ara‏ ا لت 

صفحه 17:
1 tec epee eee) ‏نابيذ‎ yoo ‏ا ا ل ل‎ ۱ Rep ae Nerve cee eet Kars) ee ee EE ee era en Sgt TCD ern a eer er ne Fee eee eS) a ne eee eae sae etey ee ere ۱ ae nD oe ey Te Saad Beenie ee a ۱ cnyy yy ere ren Cerca ore ؟- زمان تأثير رنك روى كسترش 3 دقيقه است بعد از آن كاغذ را برداشته و لام را با آب بشوييد. ۵- توسط لسید الکل رنگ زدایی کنید یا از محلول مزبور آنقدر روی لام قطره قطره می ریزند تا آخرین قطره خارج شده از روى لام شفاف باشد. #- ازرتك آبى متيلن به مدت 86 +7 ثانيه روى كسترش بريزية ۷- لام را شسته در هوا خشک کنید و با عدسی روغنی به مطالعه پردازید 010 ‏ا‎ Sensis Tee 

صفحه 18:
FIGURE 26-6 Mycobacterium leprae from a skin biopsy from a patient with lepromatous leprosy (acid-fast smear stained with Ziehl-Neelsen stain). 

صفحه 19:
‎ey sere tet‏ رز -۱ گسترش را با حرارت ثابت نمایید. ‏-۲ محلول 1۵ سبز مالاشیت را روی گسترش ريخته و ۵ دقيقه به ملايمت حرارت دهي ا ‎Re ee‏ ‏-۳ لام را با آب بشویید. ‏0 ‏-۵ لام را با آب بشویید. ‏يس از خشك كردن لام با استفاده از روغن سدر و عدسى ‎٠١٠١‏ ميكروسكوب أن را مطالعه نمایید ‏اسپورها به را ‎ ‎۳ Si, ‎ ‎are Lae Sal ‎ ‏روی گسترش ريخته و ۲ دقیقه صبر کنید. ‎ ‏سبز وباسیلها به رنگ قرمز دیده می شوند. ‎ 

صفحه 20:
اللسبويباكترىبيسبز و سلول ميشىقرمز) 1۱ entre 

صفحه 21:
| ۱ گسترش را با حرارت ابت کنید. ‎CRU Seger ce‏ ا ‎Oey‏ 1 0 -۴ فوشین فنیکه غلیظ را روی لام بریزید و به ملایمت حرارت دهید تا به مدت ۱۰ دقیقه بحار متصاعد شود ولى رنك روى لام نجوشد و خشك نشود.( توصيه مى شود براى حرارت دادن لام را برروى يايه فلزى قرار دهيد.) -0 لام را با آب بشوثيد. ‎nee caer Ta‏ ل ا ا لك ۱[ -۷ لام را با آب بشوئید. -8 متيلين بلو را روى كسترش ريخته و ‎٠١‏ دقيقه صبر كنيد. | پس از خشک کردن لام با استفاده از روغن سدر و عدسی ۱۰۰ آنرا زیر میکروسکوپ مطالعه کنید اسپورها به رنگ قرمز و باسیلها به رنگ آبی دیده می شوند. 

صفحه 22:


صفحه 23:
رنك آميزى كبسول در رنگ آمیزی اختصاصی برای مشاهده کپسول باکتری ها به کار می رود. در عمل رنگ آمیزی شرط ‎al ne ean Pe erence‏ ۱ ‎Mea ear‏ ا ا ا ا ۱ بارهای مخللف موجود در سطح سلول و مولکول های رنگ پیوند یونی تشکیل می شود و باکتری رنگ می كيرد. اما جون كيسول به علت غير يونى بودن أن رنك نمى كيرد و براى ديدن أن در زير ميكروسكوب ا | را رنك آميزى منفى مى تامند. در لين رفك آميزى تعدلدى سلول از كلنى باكترى مورد نظر يرداشت شده و در رفك تكروزين ها مركب جين روى لام مخلوط مى خود و سيس ها لام ديكرى كد ها زاويه 68 درجه سانتى كراد روى لام اول قرار ‎SR IU seme reas pesca Berea eee‏ 1 0 ee ea ens ene nee ‏داخل کپسول از شکل طبیعی خود خارج می شود‎ 

صفحه 24:
0 ‏لام اعدد‎ ** Pee a ۳ cee 0 * محیط کشت باکتری کپسول دار مانند استرپتوکوکوس پنومونیا روش کار ۲ ee ee Lee te Sn seers) ‏باکتری به آن اضافه و مخلوط‎ .کنید تا سوسپانسیون به آرامی و به طور یکنواخت پخش شود .مانند روش رنگ آمیزی منفی گسترش تهیه شده را در هو! خشک کنید .ياد آورى: هيج كاه نبايد كاغذ خشك كن را روى لام كشيد 00 0 ‏اا‎ ern V aT Far Fa Peo a eee re ‏.شستشو دهید.‎ لام را خشک کرده و با میکروسکوپ نوری و عدسی . «.نمونه را مشاهده نمایید ۱۰۰ ۱ ‎ees‏ آتین) 

صفحه 25:
MIX BACTERIA & STAIN 5 ۳ ای مس + 1 یک زمینه تیره مشاهده می شود 

صفحه 26:
ا به روش آنتونی ا را ‎ee Le ate OPTS‏ | 1 Dy ed alee Dea Ya eae ae eee re RRL nN ook ced Ie) ‏بررسى مىكنيم. كبسول به شكل هاله بى رنك در اطراف باكترى مشاهده خواهد‎ ٠١١١ ‏با يزركنمائى‎ 00 

صفحه 27:
‎i‏ آمیزی تازک ‏سس ‏ا ا 0 ‎T EC‏ اا 0 های معمولی قابل مشاهده نیستند و به این منظور باید قطر انه فزایش یابد تا قبل رویت گردنداین ‎[ree a Pe‏ ۱ ‎Ce ren‏ ۱ ‎25255 ‎ ‎-١‏ براي رنك أعيزي تازك معمولا كشت 18 الى ؟؟ ساعته باكترى بر روي محيط أكاردار مناسب عى ‎ere el‏ ار 000 ‎Siete ar el pul Ueeoryemer Fl ge‏ و 0500 ‏سطحی این سوسپانسیون برداشت کنید 

صفحه 28:
| یتیس سرت ۳- برای رنگ آمیزی روی لام مورد نظر یک مستطیل با مژیک رسم کنید به طوری که ۳۱۲ لام را شامل شود ۴- ۱/۰ میلی لیتر از محلول باکتری را از سطح روبی سوسپانسیون میکروبی برداشته و در یک گوشه مستطیل روی لام قرار دهید. ۵- لام را با زاویه ۲۰ تا ۴۰ درجه کج کنید تا محلول از یک طرف لام به سمت دیگر برود لام را به حالت کج در دمای آزمایشگاه خشک کنید. این لام پس از خشک شدن نیازی به ثابت کردن ندارد ROR eee r Teen Erecar ier rw icrer Sheol ‏ا‎ ee ۷- لام را با آب بشویید برای شستشو بهتر است آب را با پیپت به آرامی روی گسترش بریزید Fo Ear OrsCgR 09 pepe Ton erg FC Pave me ean Py PRPS JN eer al et TR eon ‏ه معلق نيز نهيه كنيد تااز متحرك بودن كشت مطمئن شويد‎ یاد آوری : از نمونه موارد 

صفحه 29:
ات -۱ گسترش تهیه شده را با حرارت ثابت کنید. 1 ROTI R AROS Yoon oe -" با يوارلام را از مركز كسترش خشك كنيد. -۴ لام را مدت ۳ الی ۴ دقیقه تحت تأثیر محلول لوگل قرار دهید. در این روش پروتوپلاسم باکتری به رنگ سبز و دانه های کروماتیک به رنگ آبی مایل به سیاه مشاهده می گردند. 

صفحه 30: