مایکوپلاسماها

صفحه 1:


صفحه 2:
ضوع ما ‎(Opoopkisweus‏ ‏رب 

صفحه 3:
مایکوپلاسماها کوچکترین باکتری (۰/۱تا ۰/۳ میکرومتر قطر دارند) با قدرت رشد بسیار آرام و سخت بر روی محیط‌های کشت مصنوعی می‌باشند. گونه‌های مختلفی از مایکوپلاسماها در ناحیه دستگاه تنفسی و ادراری- تناسلی زنان و مردان وجود دارند که به صورت ار گانیسم‌های فرصت طلب عمل می‌کنند و سبب بیماری‌های مختلف در ناحيه دستگاه تنفسی. ادراری- تناسلی. اختلال در تولیدمثل و مرگ‌ومیر نوزادان می‌شوند. که مهم‌ترین مایکوپلاسما عبارتند از: مایکوپلاسماپنومونیه. مایکوپلاسما هومینیس. اوره آپلاسما اوره آلیتیکوم و مایکوپلاسما ژنیتالیوم. مایکوپلاسما پنومونیه عامل پنومونی آتیپیک 

صفحه 4:
تشخیص عفونت های مایکویلاسماها شناسائی و تشخیص آزمایشگاهی عفونت‌های مایکوپلاسماها براساس تست‌های باکتریولوژیک شامل مورفولوژی. خصوصیات کشت. خواص فیزیولوژی و سرولوژی می‌باشد. با وجود اين که این تست‌ها هنوز بخش مهمی از تشخیص مایکوپلاسماها را تشکیل می‌دهند. ولی تست‌های جدید براساس آنالیز مولکولی 12۸ ژنومی. 18۸۸های ریبوزومی. پروتئین‌های سلولی و لیپیدها تست‌های کلاسیک را در تنگنا قرار داده و به دلیل رشد آرام و سخت‌گیر بودن كوندهاء استفاده از تست‌های مولکولی که به زمان کمتری جهت تشخیص نیاز 

صفحه 5:
انواع نمونه‌ها با توجه به روش‌های تشخیصی, بایستی سلول‌های جمع‌آوری شده که حاوی مایکوپلاسماهای چسبیده می‌باشند تهیه گردند. بیشتر نمونه‌هلئی که برای کشت مناسب هستند. برای *6/1 هم مناسبند. انواع روش‌های متفاوت نمونه گیری برای دستگاه تنفسی ارائه شده است. خلط چون دارای آلودگی می‌باشد زیاد مناسب نیست. سوآب كلو و آسبيره نازوفارنژیال برای کودکان بسیار مناسب است. می‌توان برای شناساتی مایکوپلاسما پنومونیه از نمونه‌های شستشوی گلو, خلط. آسپیره نای و تکه‌های بافت ریه نیز استفاده کرد. 

صفحه 6:
در آزمایشگاه نمونه‌های بافتی می‌بایستی در محیط‌های انتقال استریل جهت تهیه سوسپانسیون ۸۱۰ (۷۷/۷) و رقت‌های یک‌دهم و یک‌صدم قطعه‌قطعه شوند. لین کار ضروری است. چرا که سبب از بین رفتن اثر بازدارندگی هموگلوبین. فسفولیپیدهای سمی: آنتی‌بادی یا کمپلمان که در نمونه‌های بافتی وجود دارند. می‌شود. اين رقت‌ها سپس باید به محیط رشد تلقیح شوند. نمونه‌های خون برای مایکوپلاسما با تلقیح محیط رشد در میزان یک بخش خون به ‎٩‏ بخش محیط مایع (رقت یک‌دهم) کشت داده می‌شوند. اپتیمال حداقل 10110 خون از فرد بللغ بایستی کشت داده شود. پطور ایده‌آل محیط رشد نبایستی حاوی سدیم پلی آنتون سولفونات : كه بازدارنده رشد گونه‌های مایکوپلاسما است. باشد. 

صفحه 7:
محیط های انتقال مایکوپلاسماها باکتری‌های بسیار حساس به شرایط محیط جانبی هستند. بطوری که نمونه‌ها می‌بایستی بعد از جمع‌آوری سریعاً به محیط انتقال یا کشت مناسب انتقال داده شوند. انواع مختلفی از محیط‌های انتقال برای کشت مایکوپلاسماهای ژنیتال بکار می‌روند. آنتی‌بیوتیک‌ها و عوامل ضدقارچی و پنی‌سیلین (۰۰۰/۱۰۰ - ۰ واحد در میلی‌لیتر): پلی‌میکسین 13 (۵۰۰۰ میکرولیتر در میلی‌لیتر) و آمفوتریسین 18 (۲ میلی گرم در میلی‌لیتر) (در غلظت نهائی محیط کشت) عموماً جهت کاهش آلودگی توسط سایر "باکتری‌ها و قارچ‌ها به محیط کشت و انتقال اضافه می‌شوند. ‎Ne‏ ۱ 

صفحه 8:
نمونه‌ها سریعاً بایستی به آزمایشگاه ارسال شوند. ولی می‌توان نمونه‌ها را در یخچال در ۴ درجه سلسیوس به مدت ۲۴-۴۸ ساعت نگهداری کرد. اگر کشت بیشتر از اين زمان به تأخیر انجامد. بایستی نمونه‌ها را در منفی ۷ درجه سلسیوس فریز کرد. بایستی قبل از کشت. این نمونه‌های فریز شده در بن‌ماری ۳۷ درجه سلسیوس حرارت ببیند. نمونه‌های ادرار برای کشت بایستی سانتریفوژ و رسوب آن ۱:۱ قبل از فریز با محیط انتقال رقیق شوند. بدلیل اينکه در محیط انتقال پروتئین‌ها پایدار باقی می‌مانند. لذا تعداد ار گانیسم‌های زنده در فریز کاهش نمی‌یابد. 

صفحه 9:
روش‌های تشخیصی تشخیص آزمایشگاهی مایکوپلاسماها با بکار گیری جداسازی مستقیم بوسیله کشت. روش‌های مولکولی. تست حساسیت آنتی‌بیوتیکی و سرولوژی انجام می‌شود. تقریباً همه این روش‌ها برای مایکوپلاسما پنومونیه و مایکوپلاسماهای ژنیتال در دسترس می‌باشند. عت کشت مایکوپلاسماها برای گونه‌های خاص مانند مايكويلاسما هومینیس و اورپلاسماها و مایکوپلاسما پنومونیه می‌باشد. ولی برای مایکوپلاسماهای سخت‌گیر مانند مایکوپلاسما ژنیتالیوم و 

صفحه 10:
انواع محیط کشت بدلیل محدودیت مقدار اطلاعات ژنتیکی که بوسیله لين ار گانیسم‌ها حمل می‌شود. قدرت بیوسنتز محدودی دارند. کشت آنها در خارج از بدن احتیاج به محیط‌های پیچیده برای تهیه مواد مورد نیاز آنها دارد. به همین جهت محیط‌های کشتی که برای کشت مایکوپلاسماها مورد استفاده قرار می‌گیرند. پیچیده بوده و با اضافه کردن آنتی‌بیوتیک‌های 5 لاکتام (پنی‌سیلین یا آمپلی‌سیلین). پلی میکسین ۸و آمفوتریسین 8 انتخابی می‌شوند. سرم اسب ترکیب ضروری محیط‌های مایکوپلاسما است که ‎slated‏ جرب و تيل را تأمین می کند. منبع تهیه سرم. ‎۳ ‏گاو می‌باشند.‎ i ‎ ‎A ‎ ‎ 

صفحه 11:
بدلیل اينکه بعضی گونه‌ها سخت گیر می‌باشند. بهتر است نمونه‌ها هم در محیط مایع و هم در محیط جامد کشت داده شوند (کشت اولیه و بعد روی آگار ساب کالچر شوند). محیط‌های ملیع می‌بایستی در رقت یک‌دهم تا یک هزارم رقیق شده تا بازدارنده‌ها از بین بروند. همچنین در ارزیلبی کمی باید این رقت‌ها تهیه گردند. در خصوص مایکوپلاسماهای سخت‌گیر. داشتن کنترل کیفی از محیط کشت ضروری می‌باشد. بطور کلی در محیط کشت مایع شرایط اتمسفر معمولی برای رشد آنها مطلوب است. ولی در محیط‌های کشت جامد. در بسیاری از موارد حضور ۸۵ گاز کربنیک ضروری 522 2 ج22 11/19 

صفحه 12:
محدوده درجه حرارت برای رشد مایکوپلاسماها محدوده درجه حرارت برای رشد مایکوپلاسماها از گونه‌ای به گونه دیگر متفاوت و از ۲۰-۴۰ درجه سلسیوس است. درجه حرارت اپتیمم برای بیشتر مایکوپلاسماهای انسانی و حیوانات خونگرم حدود ۳۶-۷ درجه سلسیوس می‌باشد. جداسازی و شناسائى مايكوبلاسماها در محیط مایع حاوی گلوکز رشد گونه‌های تخمیری به‌خصوص مایکوپلاسما پنومونیه به‌راحتی از روی مشاهده تغییر رنگ اندیکاتور 117 (اسیدی شدن محیط) مشخص می‌شود 

صفحه 13:
این مایکوپلاسمای مهم انسانی براساس خواص بیوشیمیاتی خاص (تخمیر گلوکز و فقدان هیدرولیز آرژینین)؛ همادسوپوریشن یا هماگلوتیناسیون اریتروسیت‌های مرغ با خوکچه هندی (در نبود مایکوپلاسماهای کومنسال منفی) و همولیز سرد شناسائی می‌شود. در گذشته با اینکه سرم ایمن تجارتی وجود نداشت. شناساتی آنتی‌ژن مایکوپلاسما پنومونیه (قبلاً به‌عنوان روش رفرانس شناخته می‌شد) انجام می‌شد. با لین روش خیلی مشکل است که لین مایکوپلاسما را از مایکوپلاسما ژنیتالیوم که از نظر آنتی‌ژنی به‌هم نزدیک می‌باشند و خواص بیوشیمیایی مشابه دارند جدا کرد. امروزه از روش‌های مولکولی مانند *۳/1 جهت افتراق اين دو استفاده می‌گردد. 

صفحه 14:
مایکوپلاسماهایی که از نمونه‌های دستگاه ژنیتال جداسازی می‌شوند عبارت از مایکوپلاسما هومینیس. مایکوپلاسما ژنیتالیوم. مایکوپلاسما فرمنتانس و اوره آپلاسما اوره آلیتیکوم و غیره می‌باشند. درحالی که مایکوپلاسما هومینیس و اوره‌آپلاسما اوره آلیتیکوم به آسانی کشت داده می‌شوند. مایکوپلاسما ژنیتالیوم و فرمنتانس رشد آرامی دارند و به سختی از طریق کشت جداسازی می‌شوند. بنابراین روش‌های کشتی که امروز استفاده می‌شهند برای جداسازی آن‌ها از دستگاه ژنیتال مفید نمی‌باشند. برای کشت مایکوپلاسما هومینیس و اوره‌آپلاسما اوره‌آلیتیکوم 7 نمونه‌های مناسب که از طریق محیط انتقال دریافت می‌شود به و جامد تلقیح می‌شود. 

صفحه 15:
بازدید روزلنه محیط مليع ضروری می‌باشد. چرا که اگر تغییر رنگی مشاهده شود و پاساژ روی محیط جامد انجام نگردد چون 11 بالا برای باکتری مضر می‌باشد سبب کاهش تعداد باکتری‌های زنده می‌شود. لذا ممکن است در محیط جامد کلنی تشکیل نشود. در سطح محیط‌های جامد. مایکوپلاسماها به‌تدریج یک کلنی گنبدی شکل را در سطح آگار بوجود می‌آورند. بخش مرکزی کلنی به درون آگار به سمت پایین یشد کرده و یک هسته مر کزی متراکمتر را بوجود می‌آورد. اگر کلنی را از بالا مشاهده کنیم شبیه به ظاهر تخم‌مرغ نیمرو (600 1160) بنظر می‌رسد. این فرم از کلنی مشخصه مایکوپلاسماهای کلاسیک است که به نام مایکوپلاسماهای ‎Large colony forming‏ معرفی می‌ گردند. 

صفحه 16:
بطور کلی اگر کلنی با ظاهری تخم‌مرغ نیمرو (600 ۳3160) روی محیط جامد مشاهده شد مایکوپلاسما هومینیس تأئید می‌گردد. ولی اگر کلنی‌های کوچک. متراکم مشاهده گردید. اوره‌آپلاسما اوره‌آلیتیکوم تأئید می‌شود. پیشنهاد می‌گردد جهت تنکیک کلنی‌های تیپیک مایکوپلاسماها از کلنی‌های ‎Form‏ -.] باکتری‌هاء هر ایزوله جدیدی که در آزمایشگاه جدا می‌شود و بنظر می‌رسد مایکوپلاسما است را حداقل ۵ مرتبه بر روی محیطی که فاقد پنی‌سیلین یا آنتی‌بیوتیک موّفر بر دیواره سلولی هستند کشت مجدد دهند؛ زیرا واریانت‌های 101710 -.[ پس از حذف آنتی‌بیوتیک, مجدداً به شكل روالدین خود برگشته و شکل تخم‌مرغ نیمرویی را از دست می‌دهند. 

صفحه 17:
اگر بخواهند باکتری‌ها را از محیط جامد. به محیطهای تازه‌ای منتقل کنند. باید یک ورقه نازک چهارگوش از آگار را که در آن یک يا چند پرگنه وجود داشته باشد بردارند و بر روی محیط جامد بمالند یا در محیط مایع بیندازند. هرگاه بخواهند آنها را رنگ آمیزی نمایند ورقه مزبور را برروی یک لام گذاشته و پس از قرار دادن یک لامل بر روی آن مقداری محلول گیمسا در میان لام و لامل بریزند و صبر کنند تا خشک شود. اگر رشدی در طی ۵-۷ روز در محیط مایع ساب کالچر شده یا جامد مشاهده نگردید کشت از نظر مایکوپلاسماهای ژنیتال منفی گزارش می‌شود. بهتر است یک حجم ز محیط مایع اولیه مثبت شده در فریز منفى ‎7١‏ تا تعيين نتيجه 

صفحه 18:
گزارش‌دهی نتایج کشت جداسازی مایکوپلاسما پنومونیه از افراد بیمار با عفونت تنفسی مهم می‌باشد چرا که لین باکتری نمی‌تولند جزء فلور دستگاه تنفسی باشد. گزارش جداسازی گونه اوره آپلاسماها و مایکوپلاسما هومینیس مشکل است. جداسازی این باکتری از سایر نمونه‌های استریل معنی‌دار بوده ولی اگر از سایر نمونه‌ها جداسازی شوند بلید با شک به آن نگاه کرد و با روش‌های کمی تعداد باکتری‌ها ارزیابی شوند. درمان شامل مصرف آنتی بیوتیک خاص با تجویز پزشک می باشد . استفاده از تتراسایکلین یا اریترومایسین موجب بهبودی علائم بیماری می‌شود. 

صفحه 19: