روش تهیه محیط انتقال ویروس
اسلاید 1: روش تهيه محيط انتقال ويروسبرگرفته از دستورالعمل كشوري راهنماي مراقبت و كنترل بيماري آنفلوانزامهناز صارمي كارشناس ميكروب شناسي آزمايشگاه مرجع سلامت
اسلاید 2: مواد لازم براي تهيه يك ليتر محيط انتقال ويروسml 100محيط كشت Hanks BBS 10x بدون NaHCO3 و داراي فنل ردml 870 آب ديونيزه استريل ml10 آلبومين گاوي 20% استريل ml10 محلول پني سيلين- استرپتومايسين استريل ml10 محلول فونگيزون (ضد قارچ) استريلبيكربنات سديم 4/4% استريل براي رساندن pH نهايي محيط كشت به 6/7.
اسلاید 3: نكات مهممحيط كشت Hanks BBS 10x بدون NaHCO3 به شكل پودر و به صورت تجاري توليد و عرضه مي شود. پس از تهيه آن به صورت محلول، به ميزان 2% فنل رد نيز به آن اضافه نماييد.غلظت نهايي آنتي بيوتيك پني سيلين بايد 200 واحد در هر ميلي ليتر، استرپتومايسين 20 ميكروگرم در هر ميلي ليتر و فونگيزون 3-2 ميكروگرم در هر ميلي ليتر باشد (استفاده از فونگيزون الزامي نيست).محلول پني سيلين– استرپتومايسين بايد به صورت يخ زده منتقل شود و فقط در هنگام مصرف يخ زدايي شود. پس از يخ زدايي بايد تمام محتويات ويال مصرف شود و مجددا نبايد آن را در فريزر قرار داد.محلول Hanks BBS 10x و آلبومين گاوي بايد در دماي يخچال نگهداري شوند.معمولا مواد فوق توسط شركت سازنده از طريق فيلتراسيون استريل مي گردد، بنابراين فقط آب ديونيزه و محلول بيكربنات سديم را در اتوكلاو استريل نماييد و ساير مواد را در شرايط استريل و در كنار شعله اضافه نماييد.
اسلاید 4: روش تهيه محيط كشتml 870 آب ديونيزه را در ارلن ريخته و در اتوكلاو (C°121-15 دقيقه) استريل نماييد.جهت تهيه بيكربنات سديم 4/4%،g 4/4 پودر بيكربنات سديم را در ml100 آب ديونيزه حل كنيد و در اتوكلاو (C°121-15دقيقه) استريل نماييد.محلول هاي Hanks BBS 10x، پني سيلين- استرپتومايسين، فونگيزون (در صورت وجود)، آلبومين گاوي 20% را به نسبت مقادير ذكر شده در شرايط استريل و در كنار شعله به آب ديونيزه استريل اضافه نموده و مخلوط كنيد. رنگ محيط كشت در حجم زياد، قرمز رنگ است اما اگر كمي از محلول را در لوله آزمايش بريزيد، رنگ اوليه محيط كشت قبل از افزودن بيكربنات سديم و تنظيم pH، زرد است.
اسلاید 5: ... ادامه4) در شرايط استريل و در كنار شعله با استفاده از محلول بيكربنات سديم، pH محلول حاصله را به 6/7 برسانيد. با هر بار اضافه كردن بيكربنات سديم، محلول را به خوبي تكان دهيد تا مخلوط شود. بيكربنات سديم را كم كم اضافه نماييد، چون در صورت بالا رفتن pH بيش از 6/7، مجاز به استفاده از اسيد براي كاهش pH نيستيد. اگر بعد از تنظيم pH مقداري از محلول نهايي را در لوله آزمايش بريزيد، رنگ آن بايد گل بهي- صورتي باشد (معمولا به ازاي يك ليتر محيط كشت،ml 1 بيكربنات سديم افزوده مي شود تا pH تنظيم شود).5) محيط كشت مايع انتقال ويروس را در شرايط استريل و در كنار شعله، در مقادير 2 ميلي ليتري در لوله هاي پلاستيكي درپوش دار استريل تقسيم نماييد، درب آنها را محكم ببنديد و در يخچال (دماي C° 4) ذخيره نماييد. در اين دما معمولا لوله ها تا 3 ماه قابل نگهداري هستند.
اسلاید 6: معرفي شركت هاي همكارشركت تهيه كننده مواد اوليه محيط كشت انتقال ويروس و شركت وارد كننده سواب داكرون: شركت بهار افشانتلفن: 88966246نمابر: 88960445شركت وارد كننده فونگيزون: شركت فناوري آراطبتلفن: 66960575نمابر: 66966584
نقد و بررسی ها
هیچ نظری برای این پاورپوینت نوشته نشده است.