روش استاندارد انجام آزمایش های اندازه گیری هموگلوبین، PCV و شمارش سلولی
اسلاید 1: روش استاندارد انجام آزمايشهای اندازه گيری هموگلوبين ، PCV و شمارش سلولی
اسلاید 2: Measurement of Blood Hemoglobin using Hemiglobincyanide(HiCN) Method
اسلاید 3: اصول ابتداآهن هموگلوبين توسط فري سيانيد پتاسيم اكسيده شده (همي گلوبين)سپس همي گلوبين توسط سيانيد پتاسيم تبديل به همي گلوبين سيانيد ميشود.واكنش در حرارت اتاق زمان لازم براي ايجاد واكنش 5 دقيقه يا كمتر
اسلاید 4: معرف KCN 0.05g K3Fe(CN) 6 0.2g KH2PO4(Anhydrous) 0.140gDetergent 0.5-1mlReagent water(Type 1) 1000ml
اسلاید 5: مشخصات معرفشفاف وزرد رنگزمان لازم براي ايجاد واكنش 5 دقيقه يا كمتردترژانها ليز گلبول هاي قرمزورسوب پروتئين ها را افزايش مي دهند.در طول موج بيشتر از 480 نانومتر جذب نوری ندارد. pH=7-7.4در صورت كدورت دور ريخته شود.هرماه بصورت تازه تهيه شود.
اسلاید 6: SamplingVenipunctureK2EDTA or Na2EDTA(1.5-2.2mg/ml blood)Fresh sampleSolution of sample &Reagent is stableK3EDTA
اسلاید 7: مواد؛ وسايل وتجهيزاتكليه وسايل شيشه اي مثل پي پتها ولوله ها استاندارد وكاليبرهاز لحاظ شيميايي تميز باشند.اسپكتروفتومتر كاليبرهاستانداردهموگلوبين
اسلاید 8: Reference Method Macrodilution 100ميكروليتر خون با 25 ميلي ليتر معرف4/0 يا5/0 ميلي ليتر خون با 100 ميلي ليتر معرف04/0 ميلي ليتر خون با 10ميلي ليتر معرف
اسلاید 9: Routin procedure20ميكروليتر خون + 5ميلي ليتر معرف
اسلاید 10: روش آزمايش
اسلاید 11: غلظت هموگلوبين نمونه با استفاده از جذب نوري نمونه در طول موج 540 نانومتر در مقابل بلانك با كمك جذب نوري و غلظت استانداردو يا با كمك منحني استاندارد محاسبه ميشود.واحد اندازه گيري گرم در ليتر
اسلاید 12: تداخلاتLipoproteinemiaLipemiaWBC>20×109/LPlt>700×109/LHb S
اسلاید 13: خطا هاخطا هاي نمونه گيريخطا هاي روش انجام آزمايشخطا هاي مربوط به مواد و تجهيزاتخطا هاي آزمايشگر
اسلاید 14:
اسلاید 15: Procedure For Determining Packed Cell Volume By Microhematocrit Method
اسلاید 16: . نسبت حجم گلبولهاي قرمز به حجم خون كامل ميباشد. PCV
اسلاید 17: اصول آزمايشخونگيري مويرگي؛ وريدي وشرياني K2EDTA ضد انعقاد مناسب جهت كاليبراسيونK3EDTA به علت ايجاد چروكيدگي در گلبول هاي قرمزMCV را 2% كاهش وMCHC را به همين ميزان افزايش ميدهد.
اسلاید 18: اصول آزمايشنگهداري نمونه در دماي° 26-18آزمايش حد اكثر 6 ساعت پس از نمونه گيري انجام شود.خطاي قابل قبول دراين روش1% ±ميباشد.انجام آزمايش بصورت دو تايی
اسلاید 19: مشخصات لولهجنس از شيشه مخصوصطول لوله 5/0± 75ميليمترضخامت جداره 2/0 ميليمترقطر داخلي 0.085 +ـ 55/1داراي باند آبي در يك انتها
اسلاید 20: مشخصات دستگاه ميكروسانتريفوژشعاع چرخش بيشتر از 8سانتيمتردر عرض 30 ثانيه به حداكثر سرعت برسدRCF حدود 10-15 هزارg در محيط بمدت حداقل 5 دقيقه بدون افزايش دما از 45 درجه داراي زمان سنج اتوماتيك .(با قابليت تنظيم حداقل 30ثانيه)
اسلاید 21: ×RCF=Relative Centrifugal FieldRPM=Relative Per MinuteRCF=0.00001118 × r × N2
اسلاید 22: روش آزمايش50ميكروليتر خون3/2-4/3طول لوله از خون پرشود.طول خمير مسدود كننده كمتراز 4 ميليمتر نباشد.نمونه ها بصورت مضاعف آزمايش شوند.نتايج حداكثر پس از 10دقيقه خوانده شوند.تفاوت نمونه هاي مضاعف از 05/0بيشتر نباشد.
اسلاید 23: ميانگين ودامنه مرجع مردان (0.54-0.4)0.47 زنان(0.47-0.37)0.42
اسلاید 24: منابع خطاخطاهاي نمونه گيريخطاهاي لولهخطاي خواندنخطاي بدام افتادن پلاسما
اسلاید 25: افزايش كاذب:هيپو ناترمي بدام افتادن پلاسماكاهش كاذب:ضد انعقاد اضافيهموليزهيپرناترمي
اسلاید 26: كاليبراسيون و کنترل کيفی دستگاه ميکروهماتوکريت1-بررسي سرعت2-بررسي زمان سنج 3-بررسي صحت ابزار خوانش
اسلاید 27: روش غير مستقيم بررسی كاليبراسيونچند نمونه خون با PCVکمتر از 5/0 و حاوی ضدانعقاد (K2EDTA را پس از بيست بار سروته نمودن به صورت دوتايی به مدت 3 ، 5 ، 7، 9 و 11 دقيقه سانتريفوژ کرده و نتايج ثبت مي گردد که در صورت مناسب بودن توان دستگاه (g) نتايج حاصله از دقيقه 5 به بعد می بايست بدون تغيير باقی بماند .
اسلاید 28:
اسلاید 29: Blood Cell Counting
اسلاید 30: Leukocyte Counting By Manual method
اسلاید 31: عدم دقت اين روش 5/6% كه در موارد لكوپني به 15% ميرسد.از خون حاوي EDTA استفاده ميشود.مايع رقيق كننده اسيد استيک 2% (رقت 20/1 ) گلبولهاي قرمز را ليز ميكند.در موارد لكوسيتوز رقت 100/1 يا 200/1 در موارد لكوپني رقت 10/1
اسلاید 32: منابع خطامخلوط نکردن به ميزان کافی خطاي آزمايش كنندهخطاي ناشي از وسايلخطاي ميدان ديدهر چه تعداد سلولهاي شمارش شده بيشتر باشد ميزان خطا كمتر ميشود.
اسلاید 33:
اسلاید 34:
اسلاید 35: Platelet counting By Manual Method
اسلاید 36: منابع خطاجمع آوري نمونهتهيه رقيق كننده(فاقد ذرات خارجي مزاحم)تكنيك رقيق سازيپاكيزه نبودن لام
اسلاید 37: عدم دقت اين روش وقتي كه حداقل 100سلول شمارش شود11% واگر 40 پلاكت شمارش شود15%به دليل تمايل پلاكتها به چسبيدن به يكديگر؛جسم خارجي وشيشه شمارش مشكل ميبا شد.نمونه: خون وريدي حاوي ضد انعقاد EDTAمحلول رقيق كننده اگزالات آمونيوم 1% با آب مقطر
اسلاید 38: روش انتخابي شمارش پلاكتها استفاده از ميكروسكوپ فاز كنتراست مي باشد
اسلاید 39: با تشکر از توجه شما
نقد و بررسی ها
هیچ نظری برای این پاورپوینت نوشته نشده است.