صفحه 1:
صفحه 2:
صفحه 3:
صفحه 4:
مقدمه ای بر استافیلوکوک
تافلوکوکها کوکسی های گرم مثبتدبه قطر ۱2۸/۰ ۵/۱ میکرومتر متعلقبه خانواده میکرو کیکلسهحی باشند» که معمولا بطیر نامنظم و
خونه انگور رشد می کنند» مخصوصا زمانیکه در محیط مایع کشت داده شوند.
استافیلو کوک ها فاقد حرکت و بدون اسپور می باشنده آنها قادرند در محیط کشت نوترینت آکار حاوی ۵ درصد نمک رشد کند . تست کاتالاز
مثبت و اکسیداز منفی.عی باشد. اکثر گونه ها نیترات رلبه نب احیاععی کنند. دمای بهینه برای رشد آنها ۳۷ درجه سانتیگراد است. از
میان گونه های متعدد لین جنس سه کونه از همه شایعتر و مهعتر است عبارتند از: کو کوس اورئیس» استافبل وک وکوس اپیدرمیس و
استافیل وکوک ها روی محیط های کشت جامد پیگمانهای طلایی » لبمونی و سنید ایجاد میکنند .
تولید پیگمان به شرایط محیط بستگی دارد . بطور مثال در مجاورت هوا » حرارت ۲۲ درجه سانتیگراد؛ وجود شیر در محیط کشت ؛ پیگمان
بهتر تشکیل میشود.
در سطح پوست؛ دهان و دستگاه تنفس فوقلنی انسان بصورت فلور طبیعی حضور داشته؛ همچنین در مواردی پاتیین انسانی محسوب می
کردد. استافیلو کو کوس اورئوس مهمتیین گهنه بیماریزا است و امکان جداسازی ّن از پوست و مخاط وجود دارد. کلنی این باکتری در
محیط نوترینت آگارسیا آکار خینیبه اندازه اتا ۳ مبلیعتر کدر یبه ینگ زرد طلایی-می باشد. لین باکتری مقاومبه نمک بوده و در محیط
هاى حاوىٍ ۰ درصد نمک طعام رشد می کند و دارای ۴ ویژکی متمایز زیر است:
* همیشه آنزيم كواكولاز توليد مى كند.
** قدرت تخمير مانيتول رأ داشته و ايجاد اسيد مى نمايد.
= * در معیط وو ابجاد مى كند( به دليل وجود آلفاتوكسين).
4 ** ایجاد رنگدانه زرد طلابی می نماید.
صفحه 5:
oe
تست کواگولاز و اساس و
يكنا زتلي تك وظقايل مناد در شناسایی استافیلو کوکوس اورئوس میباشد که به دو روش
لولهاىسيا اسلايدى قلبل اجرا است. كوآكولاز استافبلوكوكىميك بروتئينمبا تركيبات ناشناخته
ینوژن را تبدیل میکند و لخته
ام تست کواکولاز از پلاسمای خرگوش با انسان که با 607۸ ات
قلبل دسترسی میباشد) استفاده میشود. میتوان از خون تاریخ گذشته
بلنک خون و پالسمای فویز شدمتا دو هفته برای انجام آزملیش استفاده کرد.بلید توجه داشت
که در بلاسمای سیتراته بعضاً واکنش مثبت کاذب توسط برخی باکتریها از جمله استریتو کوک
فکالیس ایجاد میشود. بیش از ۸۹۵ از جدایههای 2۷1۲6۷5 .5 تست اسلایدی کواگولاز
جدايمها تست ۰ ple مثبت هستندکه ۲3۵6۲0۲ 010۳0۳۵۱۳9 را شنلسایی میکنند.
لولهای کوآکولاز مثبت می شود. تست اسلایدی کواکولاز در استافیلوکوکوسلگدنسیس»
استافیلو کوکوس شلفری مثبت است. در هر آزمون اسلاید بلیسیک کنترل از امولسیون کلنیهای
@, autoagglutination شوددتا اطمينان حاصل كردد كه ea مشکوک در نمک
نداده است. لگر اتوآکلوتیناسبین رخ داد» نتلیج آزمون اسلاید برای تعیین ماهیت کواگولاز
طبیعی در ایزولهها نامناسب است.
برای کنترل کیفی تست بلید از سوشهای استاندارد استافیلو کوکوس اورئوس (کنترل مثبت) و
استافیلو کو کوس اپید رمیدیس (کنترل منفی) استفاده کرد.
Staph epidennists
Coagulase Test
000
صفحه 6:
مراحل تست
إن ۳ انجام میشود : روش لوله و روی لام
لاز مثبت ملنند اورئوس قادریبه تولید آنييم کواکولاز و برضی پروتئین های دیگرببا خاصیت انعقادیصی باشند. این
فاکتورها قادرند پروترومبین را بدون نیاز به کلسیم به ترومبین تبدیل نموده و پلاسما را منعقد کنند
روش لوله :
ابتدا پلاسمای سیتراته (حاوی ضد انعقاد سیترات) خرگوشیا انسان رلبه نسبت اجه ۵ رقیق کنیسبرای رقیق کردن میتوانید از سرم
فیزیولوژی استفاده کنید.(۱ پلاسما و ۵ سرم فیزیولوژی)..
سيس از اين بلاسماى رقيق شده مقدار ۰۰۵ سی سی را درون یک لوله بريزيد.
حال مقدار کمی از کلنی استافیلوکوک را با پلاسمای درون لوله خوب مخلوط کنید.
لوله را ۴ ساعت در انکوباتور ۳۷ درجه قرار دهید.
لگر مشاهده کردید پلاسما لخته شد؛ باکتری کواگولاز مثبت لست و لگر لخته مشاهده نکردید میبایست ۲۳ساعت لوله را در انکوباتور
۷ درجه قرار دهید و سپس وجود لخته را بررسی نمایید...
روش لام:
ابتدا یک لام تمیز را روی سطح قرار ذهید.
یک قطره سرم فیزیو لوژی روی آن ب:
خال مقدارى كلنى استافيلوكوك را باد
سپس یک قطره پلاسمای را به
أكر استافيلو كو كواكولاز مثبت باشد در عرض
٠ ثانيه أكلوتينا ون به صورت ذرات توده مانند روى لام مشاهده خواهد شد.
صفحه 7:
تست کاتالاز
در رنجیره ی انتقال الکترون که در غشای سیتوپلاسمی باکتری ها قرار
دایند» آنزیم سیتوکروم اکسیداز وجود دارد.سیتوکروم اکسیداز آنزیمی
تنفسی است و هیدروین و اکسیژن راترکیب کرده و مولکول آب ایجاد می
کند.در متابولیسم باکتری های هوازی»
هميشه ّب تولید نمی شود و در بعضی موارد سوپر اكسيد با رادیکال آزاد
اکسیژن تولید حی شود که بون فوق العاده فعللی است و با مولکول های
داخل سلولی واکنش داده و به آنها آسیب می رساند.
آنزیم کاتالاز بلهث تجزیه پراکسید هیدروینبه آب و اکسیژن میگردد.
پراکسید. هيدرو محصول متابولیک سمی برای باکتربهاست. تمام
اعضاء خانواده استافیلو کوک کاتالاز هستند» در صورتی که اعضاء
جنس استربتوکوک کاتلاز - منفی میباشند. همچنین آزمایش کاتالاز
میتولند لیستریا منسیتوژن (کاتالاز - مثبت) را از استرپت وکوک ی
متملیز کند. بيشتر گونههای نایسریا کانلاز -
آزملیش کاتالاز میتوان جهت تملیز ین کونههای بلسیلوس (کانالاز
از گونههای کلوستریدیوم (اغلب کانالاز - منفی) کمک گرفت. آزمایش
کاتالاز را میتوان بر روی مقدار بسیار کمی از باکتریهای رشد نموده بر روی
سطح آگار انجام داد.
صفحه 8:
لاه برکسید هبدریین رلبهّب و اکسیزن میشکند.لکرمقدار کمی از اركانيسمهاى توليد كننده لين آنييم را
اکسیژنه مجاور نمائید» بلافاصله حبابهای اکسیژن آزاد میشود.
روش انجام
cate SAL شده از محیط کشت را روی لام حاوی آب مقطر قرار داده و گسترش
تهیه کنید.
۲- یک قطره از پراکسید هیدروژن را بر روی لام ريخته و با میکرور گانیسم کاتالاز
مثبت مجاور می کنیم.
(بلافاصله حباب های اکسیزن آزاد می شود.)
“*" استافبل وکوک هاء کاتالاز مثبت هستند و مقدار زیادی حبابهای گاز اکسیژن تولید میکنند. استرپتو کوکها کاتالاز منفی میباشند:
و هیچ حباب گازی را تولید نمی کنند.
صفحه 9:
نکات مورد
توصیه میشود که آزملیش کاتالاز بر روی کلنی هلنی که در محیطهای فلقد خون رشد نموده لند انجام گردد. گلبولهای قرمز
مقداری آنزیم کاتالاز دایند که واکنش ضعیفی را در آزملیش کاتالاز ایجاد میکنند. برای کنترل آزملیش کاتالاز در اين موارد»
مقداری کلنی ارگانیسمی راکه بر روی محیط خوندار رشد نموده را در نقطة مجزلنی از سطح اسلاید قرار میدهند یبه تن آب
اکسیژنه اضافه میکنند. اگر واکنش کاتالاز به طور قابل توجهی قویتر از واکنش در محیط آگار فاقد خون باشد آزمایش کاتالاز مثبت
در نظر گرفته میشود. برخی از ارگانیسمها در آزمایش کاتالاز واکنش ضعیفی را ایجاد میکنند که ممکن لست از چشم تکنولوژیست
دور بماند. در لین موارد مقداری از کلنی ارگانیسم بر روی محیط فلقد خون را روی اسلاید قرار داده ویک قطره لب اکسیژنه 1/۳
جهن اضلفه میکنيم. سپس سریعلیک لامل را روی لّن قرار میدهيم. تجمع حبابهای اکسیژن در زیر للمل و تشکیل حبابهای
بزرگ به خوبی قابل مشاهده خواهند بود.
صفحه 10:
صفحه 11:
DNase
Gal معیط کشت در ارزیلبیفعللیت دزو کسی ریبونوکلئز (00356) باکتری ها و قارج
ها و خصوصابه عنوان کمک در تشخیص استائیلو کوک های بیماری زا بکار ی رود.
Toluidine Blue Test Agar DNase ۷:۲ برای کمک در تنکیک و
تشخیص گنه سراشیای بدون پیگمان که ممکن استبه اشتباه بعنوان گینه انتروباکتر و
کلبسیلا تشخیص داده شونده به کار می رود.
اساس ویژگی های
مآنهاسشعوى اتيم 5 داشته باشد لین آنییم؛ اسیدنو کلئیک را هیدرولیزعی نملید که
با استفاده از معرف و ايجاد هاله شفاف در اطراف محل رشد باكترى مى توان اين موضوع پی برد.
144 استافیلوکوک های کوائولاز مثست» 022256
اختصاصیت:۲۰./ استافیلو کوک های کواگولاز منفی» 0۱1356 مثبت هستند.
صفحه 12:
Sheep Blood & LEMB Agar,
Trypticase Soy Agar with
صفحه 13:
روش انجام
تپلمسهای 3۳و۵۸ Agar with Toluidine Bluel DNase Test 0(۱356 رلبا نمیته مورد نظربه صورت نقطه ای یا خطی) تلقیح
نمایید.پلیت ها رلبه مدت ۱۸-۲۴ساعت در دمای ۲ + ۳۵ سانتی گرا انکوبهنمایید-پس از انکوبلسیون» روی DNase Test Agar slo cul
: 32 / بریزیسبه کینه اى كه سطح بليت را كاملا پوشلند و سپس ّن را بر روى زمينه تبره ق
» جون بعضى ازسوبه هاى استافبلوكوك اورنوس.به خوبى بر روى محيطء رشد نصى كنند و در نتب
برای ارزیلبی DNase called کلفی نخولهد بود. در صورت تلقیح نقطه ای؛ حتی لگر در معل تلقیح؛ رشدى ایجاد نشودمی توان فعالیت 0۱1356 را
ت ی مت ی نمود.
Test Agar - 0۸۱256 که اسید کلریدریک یک نرمال روی آن ربخته شده است .
you cain (A هله هاوشفافكاملامشخصيإطرلفك انوبا محل لقيح را در ححیط کشاحاطه مک نند.
8) حنفی اطرافکنیها با محلتساقیح شفافنمیشود.
- ۸9۲ 151 0۸۱556 که تولونیدین بلو ۱/۰/ روی آن ریخته شده است.
۸) حثبتهلا هاینسفافقرمز صویتیاطرا فک لنوبا محلتساقیح رلاحاطه میکنند. ححیط در جلییکه 0۱1۸ بساقیمانده بساشد آبیهیشود.
8) عنفن هله هایکدر قرمز صویتیٍطرافک انیا محلت اقیح رلاحاطه میکنند.
Test Agar With Toluidine Blue gle cul 59) comb sSil jf ا ع ا كور بريد ليت
(+): هاله شفاف فرمز صورتی واضحی اطراف کلنی با محل تلقبح را در يك محيط آبى (نبلى) اخاطه مى کند
منفى (-): بدون تغيير» محیط به رنگ آبی تیره شفاف باقی مى مافد.
بعضی از سویه های استافیلوکوک معکنن است روی DNase Test Medium with Toluidine Blue مهار شوند.
پروتلوس ولکاریس» سودوموناس آنروژینوزا و آثروموناس؛ واکنش های مثبت زیادی برای تولید 0۱1356 نشان می دهند.
صفحه 14:
تست مانیتول سالت
2
اساس
:آزمایش
غلظت بالای نمک (۵/۷./ ) رشد اکثر سوش های گرم منفی و گرم مثبت بجز استافیل و کوک اورئوس را
مبارحى كندد استافيلوكوك هى تواندا Ar را تخمير كرده ( ما 5 کربوهیدرات موجود در
تغییر ينك فئل ردسبه زرد مى شوده دو
و توسط هلله زردى احاطه مى
رل را ندایند .با شکستن يبتون
موجود در معیط کلنی های قرمز رنک با هله ای ارغوانی - قرمز ایجاد می کنند.
صفحه 15:
تست مانیتول سالت
elas! Joss
ني dla وفرم نظر را روى محيط تلقیح کرده به مدت ۲۳-۴۸ ساعت در حرارت 35 96 انکوبه نمایید (محیط بدون ۲02 ) و سپس نتبجه
را بررسی کنیدء
از آنجا که بعضی از گونه های استافیلو کوک آهسته تر مانیتول را تخمیر می کنند؛ بنابراین لازم است ختماً تا ۴۸ ساعت پلیت ها نگهداری شود.
- کلنی های استافیلو کوک زرد رنگ بوده و توسط هاله زردی احاطه می شود.
:تداخلات
نتروکوک هی تیلندروی لین معیط رشد کرفه و مانتل را نیز کمی تخمیرکن.فترق از ستاو کوک بر اساس ینک آ میزی رم و تست
از خواهد بود.
اگر مدت انکوباسون از ۴۸ ساعت طولانی تر شود ار کانیزم های دیگر نیز قدرت رشد و تخمیر مانیتول را دارند.
Ss:
تمام كلنى هاى مشكوكسبه استافيلوكوك بليسبه كمك تست كواكولازسيا ساير تست هاى افتلقی تیبد شوند. بعضی فرمولاسیونها توصیه می
كنند 200 زرده تخم مرغ استرب لبه محيط اضلفه شود» لستافيلوكوك هاى كواكولاز مثبت همزمان لببازخيز دايند بنابرلين رسوب كدرى دو
افیلو کوک هایی که کواتولاز تولید نمی كنند لبباز نداشته و هاله ابجاد نمى کنند.
صفحه 16:
تست حساسیت به باسیتراسین و
نووبيوسين
خانواده ی میکروکوکاسه دارای ۲ جنس میکروکوک و استافیلوکوک میباشد . تست حساسيت به باسيتراسين (88) براى
میکرو کوک که حساس به باسیتراسین هست از جنس استافبلوکوک که مقاوم به باسيتراسين است ميباشد .
جنس استافيلوكوك داراى "1 كونه استافيلوكوى اورنوس » استایلو کوک اپیدرمایدیس و استافیو کوک سایروفیتیکوسحی باشد
tee a erties ۳ 3 وویوسین [ ) است ازاستافیلو کوک
باکتری را در محیط آبکوشت reed را رت ار سس ۱39
نموده و سپسبا پنس,یک دیسک باسیتراسین و نوببوسین را روی منطقه کشت قرار میدهیم وپس از ۲۴ ساعت آنکوباسیون
معبط را مورد بررسی قرار میدهیمکه در صورت حساسیتبه دیسک باسیتراین هلله عدم رشد در اطراف .كن ديده ميشود که
استافيلو كوك ها بدان مقاوم مى باشند .
صفحه 17:
صفحه 18:
پروبیوتیک ها و کاربردشان در
صنایع غذایی
پروبسوتیک هاسبه عنوان اجزای ee x زنده aa تعویف حی
باکتریهای پروببوتیکبه جنس بیفیدوبا
روی بیماری های رو
خصوصیات ضد جهش زلیی؛
هليكوباكتربيلورى با افزودن تونه مورد نظر به محصول غدايى كزارش كرده ان
استفاده.مى شوند. اكرجه اخيراً جندين ماده ى خامبه طور كسترده اى در جهت تعيين و توليد ميكروار كانيسمهاى
پروبیوتیک فیر لبنی جدیده مورد بررسی قرار گرفتند.
aces و
معمولا داراى منشأً انسانییا حیولنی مشر ب 1
. اگرچه کونه های متعلق-به جنس های لاکت وک و کوس Bens cits pontine es ta
۰ شده_ اند.
بيفيدويا كترها بطور معمول در رودهانمان و حبوان ساكن هستند و حضور آنها در دهان و مدفوع انان و حيوان عجيب فيست.
pH و هم Mises و 717-51 ديجه سلنتيكراد عوياشد
میکروارکانیسم های پرو!
صفحه 19:
صفحه 20:
روش انجام
ne
آمیزی کرمبه قرار زیر Sig پیش از آغاز نگ آمیزی» نخست بلیسیک فریتی از محیط کشت خللص باکتری بر روی لام تهّه کنیم. در ادلمه مراحل
نیت ینگ کریستال وبیله رلبه مدت ۳۰تا ۴۵ ثلنیه بر روی فریتی باکتری روی لام حی ريزیم. درنتیجه همه باکتریهلبه ینگ بنفش درخواهد
آمد.
ote از شستشوی فروتیبا آب؛ ینگ کربستال وبوله رلباافزودن لوکولبه مدت ۰ تا ۴۵ ثانیهتثیت-عی کنیم. لوگل باکریستال وبوله ترکیب شده و
ایجاد کمپلکسهایی میملید که بلعث تثییت ینگ کریستال وبوله در داخل دیواره سلولی باکتری میشودسپس از لین مرحله؛ همه باکتریها کماکان
به رنگ بنفش مشاهده میشوند .
مرحله رنگ زدایی
مهمتیین مرحله ینگ آمیزی است. درلین مرحلمپس از نستشوی لامبانلب, لامیه Yo GNM core
قرار گرفته» سپس,ب لب مورد شستشو قرار میکیرد. در باكتريهاى كرم منفى كه داراى لايدهاى
هستند كين حلال بلعث حذف كين لايدها وغشا م ىكردد و باکتری ونگ مراحل قبل را از دست میدهدء ولی در باکتویهای گرم مثبتبه علت ضخامت
زياد لليه ى ببتيدوكلبكلنى وعدم وجود لیبید فراوان در غشا ینگ مرحله قبل ازغشا خارج نمیشود. در تجهپس از کین مرحله باکتربهای گرم منفی
بی رنگ» ولی باکتریهای گرم مثبت کماکان بنفش باقی خواهند ماند .
در انتما سطح فروتی رالبا سافرانینبا فوشین (قرهز ینگ)به مدت ۳۰تا ۴۵ ثانبه میپوشانیم: سبسبا لب داده وس از خشک
میکروسکوب مورد بررسی قرارمی کیرد. درلین مرحله باکتریهاییی ونگ (باکتری های گرم منفی)به ینک قیمز درمی آیند و باکتریهای بنفش
(باکتری های گرم مثبت) بدون تغببر رنگ باقی میمانند .
در معرض مواد يذك زدا ملتند الكل استون
,وگلیکان محدود وغشاى خارجى غنى از جربى
صفحه 21:
تست کاتالاز
در رنجیره ی انتقال الکترون که در غشای سیتوپلاسمی باکتری ها قرار
دایند» آنزیم سیتوکروم اکسیداز وجود دارد.سیتوکروم اکسیداز آنزیمی
تنفسی است و هیدروین و اکسیژن راترکیب کرده و مولکول آب ایجاد می
کند.در متابولیسم باکتری های هوازی»
هميشه ّب تولید نمی شود و در بعضی موارد سوپر اكسيد با رادیکال آزاد
اکسیژن تولید حی شود که بون فوق العاده فعللی است و با مولکول های
داخل سلولی واکنش داده و به آنها آسیب می رساند.
آنزیم کاتالاز بلهث تجزیه پراکسید هیدروینبه آب و اکسیژن میگردد.
پراکسید. هيدرو محصول متابولیک سمی برای باکتربهاست. تمام
اعضاء خانواده استافیلو کوک کاتالاز هستند» در صورتی که اعضاء
جنس استربتوکوک کاتلاز - منفی میباشند. همچنین آزمایش کاتالاز
میتولند لیستریا منسیتوژن (کاتالاز - مثبت) را از استرپت وکوک ی
متملیز کند. بيشتر گونههای نایسریا کانلاز -
آزملیش کاتالاز میتوان جهت تملیز ین کونههای بلسیلوس (کانالاز
از گونههای کلوستریدیوم (اغلب کانالاز - منفی) کمک گرفت. آزمایش
کاتالاز را میتوان بر روی مقدار بسیار کمی از باکتریهای رشد نموده بر روی
سطح آگار انجام داد.
صفحه 22:
لاه برکسید هبدریین رلبهّب و اکسیزن میشکند.لکرمقدار کمی از اركانيسمهاى توليد كننده لين آنييم را
اکسیژنه مجاور نمائید» بلافاصله حبابهای اکسیژن آزاد میشود.
روش انجام
cate SAL شده از محیط کشت را روی لام حاوی آب مقطر قرار داده و گسترش
تهیه کنید.
۲- یک قطره از پراکسید هیدروژن را بر روی لام ريخته و با میکرور گانیسم کاتالاز
مثبت مجاور می کنیم.
(بلافاصله حباب های اکسیزن آزاد می شود.)
“*" استافبل وکوک هاء کاتالاز مثبت هستند و مقدار زیادی حبابهای گاز اکسیژن تولید میکنند. استرپتو کوکها کاتالاز منفی میباشند:
و هیچ حباب گازی را تولید نمی کنند.
صفحه 23:
نکات مورد
توصیه میشود که آزملیش کاتالاز بر روی کلنی هلنی که در محیطهای فلقد خون رشد نموده لند انجام گردد. گلبولهای قرمز
مقداری آنزیم کاتالاز دایند که واکنش ضعیفی را در آزملیش کاتالاز ایجاد میکنند. برای کنترل آزملیش کاتالاز در اين موارد»
مقداری کلنی ارگانیسمی راکه بر روی محیط خوندار رشد نموده را در نقطة مجزلنی از سطح اسلاید قرار میدهند یبه تن آب
اکسیژنه اضافه میکنند. اگر واکنش کاتالاز به طور قابل توجهی قویتر از واکنش در محیط آگار فاقد خون باشد آزمایش کاتالاز مثبت
در نظر گرفته میشود. برخی از ارگانیسمها در آزمایش کاتالاز واکنش ضعیفی را ایجاد میکنند که ممکن لست از چشم تکنولوژیست
دور بماند. در لین موارد مقداری از کلنی ارگانیسم بر روی محیط فلقد خون را روی اسلاید قرار داده ویک قطره لب اکسیژنه 1/۳
جهن اضلفه میکنيم. سپس سریعلیک لامل را روی لّن قرار میدهيم. تجمع حبابهای اکسیژن در زیر للمل و تشکیل حبابهای
بزرگ به خوبی قابل مشاهده خواهند بود.
صفحه 24:
تست محلول
ت تحمل نمکی شامل کشت باکتری در درصدهاي.
از رشد مشاهده میگردد و درصورتیکه قابلیت رشد
بسیاری از باکتری های پروببیوتیک جدا شده از رو 1 حمودی قابلیت تعمل درسخ بای نفک وا دارفا
Salt Tolerance Test
ve
Uninoculated Negative Positive
ieee Shs os
صفحه 25:
تست احیا ء
نیترات
مکانیسم آزمایش
آنتروباکتریاسه ها داری آنزیمی هستنسبه نام یترات ردوکتاز که قادراست نيترات
راب با
باکتری در صورت" احیای نیترات محصولات جدیدی مانند نيتريت اكسيدوزء
تشکیل رنگ قرمزيا بنفش محلول درآب رامى دهد
الكو ام
صفحه 26:
نشان دهنده ior
آمین (0) مشخص هی
در صورتی که رنگ قرمز پدید نیاید ممکن است:
الف) نیترات احیا ذ
ب)نيترا اتر از نیتریت احبا شده و ۱۱2 یا ۱۷0 یا ۱۱20 و یا ۱۱۲3 ایجاد کرده باشد.
براى اطمينان از نتيجه مى توان مقدار كمى بودر روى (200) به محيط كشت افزود. در صورتى كه در محيط فيد
فيترات را احيا ذكرده باشد) نيترات توسط روىببه نيتييت احيا شده و ينك قرعز بسيدحى آيد. ( احياى
لگر محيط حتى بعد از افزودن 210 قرهز نشود نشان دهنده .كن استكه باكترى مورد نظر نيترات رلبه نيتيب
يا كرده است.(احياى نيترات توسط باكترى مثبت)
در هنكام افزودن بودر روی-به معیط کشت بلید توجه داشت که افزودن بیش از هد بودر روى ممكن است موجب اشتباه شود. زيرا در
صورت زیاد بودن روی» اکسیژن تولید شده نبتیبت حاصل از نیترات احیاء نشده رلبه آمونياک تبدیل-می کندکه ملنع از پیدلیش رنک و
با فقط یک واکنش رنکی ضعیف خواهیم داشت.
و سپسبه محصولات دیگر
صفحه 27:
سیمون
سیترات
محیط کشت سیمون سیترات آکار (293۳ 616۳۵86 six (Simmons
افتراق باکتری های گرم منفی براساس مصرف سیترات به کار می رود.
برای تعیین قدرت باکتری در استفاده از سیتراتبه عنوان تنها عامل کربندار
ود در محيط میباشد. باکتری هلیی که قادرسبه رشد در لین معیط باشند در
توانسته لند از سیترات که تنها علمل کیبن دار در محيط الست =
۲ در مجاورت معرف رنکی بروموتبمول بلوبه ينك بی در مي
غیر این صورت به علت عدم رشد باکتری و عدم تغییر رنگ محیط آزمایش سیترات
منفی است.
بوردتلا برتوسيس ( علمل سياه سرفه ) سبترات منفی بوده ؛ در حللیکه گونه
هاى ديكر بوردتلاء
** باكتريهاى روده اى مثل كلبسيلا بنومونيه ( علمل بنومونى و عفونتهاى مجارى
ادرارى ) و انتروباكتر سيترات مثبت حى باشند ولى اشرشيا كلى( عامل
عفونتهاى ادرارى ) سيترات منفى ميباشد ٠
صفحه 28:
صفحه 29:
صفحه 30:
یکی از مهمتیین خصوصیات افترلقيی oat های گرم منفی غیر تخمیری از انتروباکترباسه» توانلبی ارگانیسم در استفاده از
کروبوهیدرات هاعی باشد. در لین آزملیش از محیطیبه نام ۱۸۵012 ۴۵۲۳۳۱۵۳6۵61۷6 021038:۷6 که دارای مقادیر
بسیار کمی پیتون است؛ استفادهمی شود. هرچند محیط ۲51 padi KIA og و عدم تخمیر قند را نشانمی دهدء یلیبه علت بل
ea ita eee NN ama aed fees edn eos در ی ی ی از
محیط ها را با بارافین استریل پوشانده که شرایط بی هوازی ایجاد شود.
بعد از انکوبلسیون در لیله هلیی که ونگ زرد ایجاد شده؛ لسيد تولميد و كلوكز مصرف شده است. در لوله واجد پارافین (شرلیط بی
هوازی) عمل تخمیر و در وله ی فاقد پارافین (شرایط هوازی) عمل اکسیداسیون صورت می گیرد.
لین محیط دارای قند گلوکز و معرف برموتیمول بلوحی باشد. لگر کلوکز محیط مصرف شود؛ اسید تولیدصی شود و برموتیمول بلو از
حللت سسزیبه زرد تغیبر ینگمی دهد. لگر هر دو لوله (بلیا بدون ریغن) زرد شود میکروارکانیسمبی هوازی اختیاریهی باشد؛
یعنی توانلیی استفاده از گلوکز را در حضورسیا عدم حضور اکسیژن دارد. در صورتی که فقط در لیله بدون ریغن رنگ زرد ایجاد
شود باکتری هوازی است و توانلیی استفاده از گلیکز را تنها در حضور اکسیژن داراعی باشند. عدم تغیبر ینک در لوله نشلنه اين
است که میکروار کانیسم قادر به مصرف گلو کز نمی باشد.
صفحه 31:
ت وشد دارند . .
ae ۱ iat 1
ناشی از رشد را حفظ کند؛ یعنی توانسته است
لکر باکت
صفحه 32:
صفحه 33:
مقدم
a
سالمونلا باکتری باسیل گرم منفی است که در جوجهها و تخممرغها معمولاً وجود دارد. و علمل یکی از سر مسمومیتهای غذایی میباشد.
يق غذای ae Medi ag میشوند و به Fi سلولهای ی
مخاط روده متصل میگردند: سپس در sous درون این سلولها وارد میشوند. اما گاهی اتصالات ميان سلولى وارد میکر دند. باکتریها در
محل ورود تكثير مى شوند و جون توائلبى عبور از لامینا پروپیبا را دایند از آنجلبه کردش خون وارد میشوند و در تمام قسمتهای بدن منتشر میشوند.
آنها بخشهای مختلف سیستم لنفاوی را آلوده میکنند. در سلولهای سیستم ماکروفاژ و رتیکلواندوتلیال وارد شده وبه تکثیر خود ادامه میدهند. یکی از
بيماريها ,که از طییق سالمونلا ایجاد میشوشتب تیفوییدسیا همان حصبه میباشد که بیشتر از طویق لب و غذای آلوده سرایت میکند. حصبه را بیماری
دستهای آلوده نامیده اند» چون شایعترین راه انتقال بیماری از راه دهان است.
صفحه 34:
جنس
سالمونلا
جنس سالمونل داراى باكترى هليى است كه سابقاً بدعنوان سالمونلا و ريزونا شناخته
حی شدند. سالمونلهاباسیلهای گرم متفی؛ متحرک (بهجز کالناروم و بولوروم) و
دارای کپسول و پیلی و انگل اجباری روده حیوانات. S. abortusovis »4
گوسفندان» S. gallinarum در ماکیان» typhi .5 در انسان و 5
155 1أملا؟ در خوک بیماریزا هستند. سیستم طبقبندی قبلی سالمونلاها عبارت
بودند
)١( سيستم كافمن وايتكه هر سروتیپ را بدعنوان کونه جداكانداى از سالمونلا
میشناختند.
(؟) سيستم ادواردز -اوينككه سالمونلا لبه سه گونه (سالمونلا کر اسوئیس, سالمونا
انتريتيديسو سالمونلا تيفى) و صدها سروتيب تقسيم مى كردند.
نمای هیبریداسیون ۵۱۷۵ که سالمونلاها را دربیک کینه بنام سالموتلا
ب نه راسبه زيركونه هاى آريزون
كوي ie ار oa
AD و همکاران در سال 111/7 سالمونلا را بر اساس همولوزى .9128© انجام
دادند, سالمونلاها رلبه هفت گروه تکاملی (زیر گروههای ۸۱ ۸۲ 98 23:532 و ع)
طبقهبندی نمودند.
صفحه 35:
تقرباً تعامی سروتیپهای سالمونلاکه انسان را آلودهمیکنند در کروه | قرار دایند و ارگانیسمهایی
که بهندرت در انسان ایجاد عفینت میکنند در گروه ۱۱12 و ۱۱15 قرار میگییند» همچنین بر اساس
همولوزی 01۸ سالمونالبمیک جنس سالمونا و دوکونهاتریک و بونگوری تقسیم شد که زبرگونه
ّن انتریکا نام گرفت. تمام سروتیپها از سالمونلاهایی که برای انسان و حیوانات خونگرم بیماریزا
هستند در ين زير تون قرار كرفند.زيركنه الا / فق برا موجودات خوتسرد بمارى یی دار
لين تملمى سالموتلاهاى بيماريزا براى انسان و حيوانات در جنس سالموتلاء كينه انتريكا و زيركوفه
. در آزمایشگاههای بالیشی بهوسیله آنتیزین 0 سالمونلاها به
انتریکا تقسیبندی میشوا
ایندول و 08186 منفی بوده و تولید مه رب و در
سروتیپ تیفی آزمایشهای سیمون سیترات؛ اوزنیتین دکربو کسیلاز» تولید گاز از کلوکزء تخمير
دولسیتول» آرابینوز: رامنوز و موسیات و مصرف استات منفی است.
Triple Sugar Iron (TSI)
Uninoculated
صفحه 36:
جدول ۱: فرمول آنتیژنی سالمولاها
سروتایپ
‘Salmonella typhi
Salmonella paratyphi A
Salmonella choleraesuis 1
Salmonella typhimurium ۱4 ۹ 2
‘Salmonella enteritidis 1.9, 12:8, m:—
ذكته: در فرمول آنتىزنى سالموئلا ابتذا اسم جنس. كونه. شماره سروتيب» داخل برائتز در صورت داشتن
آنتیژن ۰۷ کلمه ۷۱ نوشته شده و بعد حروف کوچک انگلیسی که نشاندهنده فاز ۱ است و در صورت وجود.
فاز ۲ صورت عدد نشان دادهمیشود, نوشته میشود (جدول ):
Salmonella typhi 44" (Vi):d:+8 Ste
36
صفحه 37:
اریزایی سالمونلهاتوناییتهاجم بافت و قدرت زنده ماندن درون ماکروفاژهاست. آنتیژن ۸/1 کپسولی است كه عامل محافظت
فی فا گوسیت میگردد؛ از ایجاد رادیکالهای آزاد اکسیدا 1
نتوين است. آنتیبادی ضد آن
دیرتیین آنتیبادی است که تولید میشود و سریع حذف میگردد؛ بعلاوه سالمونلا دارای لیپوبلیساکارید اندوتو کسیکی است که در بیماران مبتلابه
باکتریمی عامل شوک سپتیک است.
البنى انتييت هستند. ایلی پروتتین کوچکی (۰ ۲۵-۳
سالمونلاهای مولد انتییت حدلقل دو انتروتوکسین تولید میکنند که سبب
کیلودالتون) است که به كانكليوزيد 031011 متصل شده و سیب افزایش ۲/۸۱۸۴ می گردد. بدنظر مى رسد هم بروتئين كبناز © و هم بروستاكلاندين 2
در آين امر دخالت دارند. دومی انتروتوکسین بزرگی است (حدود ۱۰۰ کیلودالتون) که هیج شباهتی از نظر ساختمان و مكانيسم عمل با اولى ندارد.
سویههای سالمونلای مولد انتروتو کسین؛ و وسیعتر از سویههای فلقد انتروتو کسین-به دیوارهی روده حمله میکنند. بین دو سومتا سه چهارم
سویههای سالمونلای جداشده از بیماران مبتلا به انتروتوکسین تولید می کنند.
از دیگر ویژگیهای آنتیژنیک و فاکتورهای وبروللنس سالمونلاها میتوان-به موارد یر اشاره کرد: پیلی تیب ااو ۵9۲-۳۰۱8۴ در
لین باکتری 0101:3516 است. فازسیکسبا حروف الفبای کوچک انگلیسی (2تا 2) و فاز دبا عدد نشان داده میشود. فازییک اختصاصی و فاز ۲
غير اختصاصى است. 8.014 در تمام سالمونلاها به غير از سالمونلا كاليناروم و سالمونلا بولوروم ديده مىشود.
صفحه 38:
gala sea ce است که مجاری دستگاهگوارش را تعت تلیرقار میدهد. باکتری سالمونلابه طور معمول در حبوانات و روده
انسان زندگی میکند و از طریق مدفوع پخش میشود. انسانها اغلب از طریق آب یا غذای آلوده دجار سالمونلا میشوند.
به طور معمول, افراد مبتلا به عفونت سالمونلا هیچ نشانهای ندارند. دیگران ظرف ۸ تا ۷۲ ساعت به اسهال, تب و درد شکمی دچار میشوند. اکثر افراد
سالم در عرض چند روز بدون درمان خاصی بهبود مییابند. _ ۱ رو = ۳1
در برخی موارد؛ اسهال همرامبا عفونت سالمونلا میتولند آنقدر بلعث دهیدراسیون شودکبه توجه فوری پزشکی نیا بیدا انك cSt aaa
زندکی فیز در صورتی ایجاد میشودکه عفونت فرلتر از روده کسترش میبابد. خطر ابتالبه عفوفت سالمونلا در صورتی بالتر است کمبه کشورهلیی با
سطح بهداشت ضعیف سفو ۲ :
عفونت سالمونلامعمولایبا خوردن گوشت؛ مرغ» تخممرغ وبا محصولات تخممرشی خامیا
محدودهای از چند ساعت تا دو روز را دربرمیگیرد. بیشتر عفونتهای سالمونلا میتوانند به نام كاستروانترب
علانم و شانههای احتمالی عبر ند از:
اد میشود. دوره کومون این بیماری
(لتهاب شکم و روده) طبقهبندی شوند.
صفحه 39:
تست های
سیب
DN peer
ats ar ی
8 (نوزیرمتیارسلو)|
8
See ۰
۱۵ +
ت 3
صفحه 40:
صفحه 41:
ست بیط کشت
مکانکی آگار
تعریف و کاربرد
محیط کشت مکانکی آکار محبط کشت 393۲ ۵660016۷ یک محیط انتخلبی اشت که عمدتا
برای شناسایی و جداسازی باکتوی های گرم منفی از مواد غذایی؛ آب؛ دارو و ديكر مواد صنعتی استفاده
حی شود. همجنین کین محیط برای جداسازی باکتری های تخمبز كننده لاكتوز از غير تخمیر کنندهها به
کار می رود.
در ابتدا از لین محیط برای جداسازی سویه های سالمونل تیفوزا از دیکر اعضای کلیفرم ها استفاده می
شد سپس اصلاح فرمول لین محيط بلعث بهبود رشد شبكلا و سالمونلا شد که لین تغیبرات شلمل
کردن ۰۰۵ درصد کلرید سدیم کاهش میزان آگار و تغیبر غلظت نمک های صفراوی و قرمز ختنی بود.
لین محیطبا داشتن کربستال وبیله و نمک صفراوی ملفع رشد گرم مثبتها و افزلیش رشد باکتری های
گرم منفی می شود. کلنی های جدا شده از باکتری های کلیفرمبه ینک قرمز آجری هستند و ممکن است
توسط نمک های صفراوی احاطه شده باشند لین رسوب صفرا نلشی از کاهش !0۲ محلی در اطراف کلنی
و به خاطر تخمیر لاکتوز است. کلنی هایی که لاکتوز را تخمیر نمی کنند به صورت بی رنگ می مانند.
صفحه 42:
هدف:
- لین محیط کشت؛ یک محیط انتخلیی و افترلقی برای تشخیص
ارگانیسم های کلسی فرم و پاتوژسن های روده ای است.
- برای جداسازی انواع مایکوباکتربوم از مک کانکی آگار بدون
کریستال ویوله استفاده می شود.
اساس آزمایش:
کریستال وبوله رشد میکروا رگانیسم های گرم مثبت بویژه انترو کوک ها
و استافیلو کوک ها را مهارحی کند. جهت تفکیک ميكروار كانيسم هاى
روده ای» از ترکیب لاکتوز و معرف قرهز استفاده میشود. بسته به
ene
زند. لگرسیک باسیل گرم منفی روی بلاد آکار رشد کند لعا روی مک
کانکی آكار وشد تكندييا بطور ضعيف رشد كندء مشکوک به کروه
وابسته به غي رتخمير كننده ها (نان فرمنترها) است.
1
Non-tectose
fermenting
‘colonies
COLORLESS
1
fermenting
colonies
PINK
صفحه 43:
ویژگی های تست:
غلظت نمک های صفراوی در لین محیط در مقایسهبا دیگر محیط های پلیتی جهت کشت
آنتروباکترباسه هام نسبتأ کم است. بنابرلین انتخلبی بودن لین محیط برای باکتری های گرم
منضی» _از بعضی فرمول های Salmonella Shigella Agar Je) Bas 4
(۸93۲ ۴66۵۲16 ۲۱610۲۵65 بیشتر نیستبه عنوان مثال استرپتوکوک فکالیس به طور
جزنی توانایی رشد روی این محیط را دارد.
روش انجام کارت
به معض دریلفت نمینه در آزمایشگاه پلیت های محیط کشت رلبه روش کشت خطییا سواب
کشیدن؛ تلقیح نمایید. توصیهمی شود برای افزلیش شلنس جداسازی باکتری های گرم منفی»
وقتی تعداد آنها کم است و نیز جهت تعبین ارکانیسم های دیگری که در نمونه وجود دارند؛
ند مسد فق معط فسر اتغاینن تزا نسح وها گت ۵ esc
بليت ها را دور از نور نكه داشته و در دماى 35 + °2 LC دمای مناسب دیگری به مدت
۱۸-۲۴ ساعت انکیبه نمایید. لگر بعد از ۲۴ ساعت منفی بود» دوباره برای ۲۴ ساعت دیگر
انکوبه نمایید. انکوباسون در دمای اتاق» شانس جداسازی برسینیا انتروکولیتیکا را افزایش می
دهد. پلیت ها را نبلید بیش از ۴۸ ساعت انکوبه کرد» چون در تفسیر نتلیج اشکال پیش می
آید.
- بعضی از انتروباکتربلسه ها و سودوموناس آنروژینوز وقتی در محیط دارای COR انکوبه
شوند» رشدشان روی این محیط, مهار میشود.
صفحه 44:
۱ ائوزین متیلن بلو)
است سبه علت دارا بودن قند لاکتوز و تخمیر آن مانند.حک کانکی
آکار » تخمیر لاکتوز را به عنوان عاملی برای افتراقی نامیدن این محیط انتخاب می
* باتریهاي گم مفی نروباکترله مد الیو انتروبکتر ثروزتیلانوز را تخمیر
می
کلونی های اکلای در محیط 8018 دارای جلای فلزی سبز رنگ هستند
> انتروباکتراثروزنس در این محیط کلنی های صورتی رنکی ایجاد می کند که گاهی دارای
نقاط بنفش در مرکز انها (چشم ماهی) هستند .
باکتری های گرم منقی پروتتوس ولکاییس و سالمونلاتفبموریوم در محیط حک کانکی
آکار رشد می کنند اما قند لاکنوز را تخمیر نمی کتند.
در ضمن در محيط 2908 از قند ساكاروز هم براى تخمير استفاده مى شود .
ma (eosin Methylene sue) Agar
صفحه 45:
تست محيط كشت 00
(محيط ليز
يكى از توانايى جشمكير aes برون (IST ن مى باشد كه همراه خود هيدروزن سولفيد توليد مى كند كه به دليل وجود ابن توانايى
حركت اركانيسم موجود در روده به راحتی قابل شناسایی می باشد .
گلهی محیط لسیدی و قرمز ینگمی شوشبه علت تغییر دامینسبه لیزین لین واکنش رخحی دهد و گلهی روده همراه خود باسیلی تولید می
کندکه سب تیرگی محیطحی شود (01] محیط تملیلبه افزلیش پیداحی کنسبه قدری که غلظت محیط بالا و ینگ محیطبه ارغولنی تبدیل
می شود که يك محيط باز توليد مى شود.
ویژگی:
قالیت تفکیک ارکانیسم ها را افا می کند
صفحه 46:
تست
محيط ليبن آبرون آكار داراى لسيد آمينه لبنين كلوكز ويبتون است معرف لین محیط بروموکروزول ارغولنی است وینگ اولیه محیط بنفش
می باشد . این محیط معمولا بصورت شیب داروقسمت استوانه ای می باشد .
ز آنجاییکه که توانلیی باکتری در دآمیناسیون در شرلیط هوازی وتوانلیی باکتری برای دکربو کسیلاسیون درشرلیط بیهوازی بررسی می
زین دآمیناز وقسمت استوانه به منظور بررسی واکنش لیزین دکربو کسیلاز مطالعه مى شود .
باكترى درابتدابامتابوليسم لوكا بانوباد اسيد بلعث لفيدر ونا معط جه زره امي شودوتن از َن درصورت
دکربوکسیلاسیون لینین باشد درعمق لیله آز آ
نفش می شود .لذ درصورتیکه رنگ قسمت استوا
محیط می گردد .این مورد به همراه استفاد:
قرمز آلبالویی می گردد .
لذادرصورتیکه ینک قسمت شیبداربپس از ۲۴ساعت قرمز آلبالیبی باشد نشلنهتوانلیی باکتری در دآمیناسیون لیزین است ودرصورتیکه
باکتری قادر به دآمیناسیون لیزین نباشد سطح شیبدار به رنگ بنفش دیده مى شود .
صفحه 47:
روش کار
سیک کلنی از باکتری مور آزملیش رلبه وسیله آنس نوک تيز به محیط کشت لیزین آیرون آگار
منتقل كنيد .برای این منظور ابتدا در قسمت استوانه ای رابافروبردن مستقیم آنس تاعمق محیط
کشت نموده وسپس قسمت شیبدار رابهصورت زیگزاگ تلقیح نمایید .محبط کشت رابه مدت
۴ساعت در گرمخانه ۳۷ درجه سانتیگراد نگهداری نمایید وسپس واکنشهای دکربو کسیلاسیون
و دآمیناسیون رابررسى كنيد دراين محيط همجنين تولید ۲12 کرا نیز می توان بررسی کرد.
تفسیر آزمایش:
از آنجانکه همه آنتروباکتریاسهها در نتبجه تخمیر قند کلوکز؛ اسید تولید کرده و معیط را به
ینک زرد درحی آورند. محیطبه ینگ زرد بلفی خواهند ماند. مکرآنکه باکتری آمینواسید
مورت نظر را دكريو كسيله كند.
ت قليائيت حاصله » محيط به رنك بنفش در خواهد آمد.
: دكربوكسيله شدن ليزين ( در باكترى سالمونلا ) .
: عدم دكربوكسيله شدن و دآمينه شدن ليزين ( وذى زرسبه دليل
رنگ شده باشد فقط به علت قلیایی شدن و وجود
صفحه 48:
محیط کشت سالمونلا
مسشعيكلل Agar 4S) ytSh 5 معیط کشت 55 آکارمیک معیط اننخلبی و افتراقی
برای جداسازي باسیل های پاتوژن به ویژه آنهایی که متعلق به جنس سالمونلا هستند» می باشد.
ee رس و
تخمیرسی کنند اسید تولید.حی کنند و در حضور شاخص قرحز خنثی بلعث تشکیل کلونی های قرهز می
شود و دیگر ار کانیزم ها که نمی توانند لاکتوز را تخمیر کنند کلنی های بی رنگ تولید مى کنند.
ابن محيط كشت برای ایزوله سالمونلا و کونه های 5۱196113 از نمونه های خیلی آلوده
بسیار انتخلبی است. انتخلبی بودن لین محبط کشت به دلیل غلظت بالای نمک های صفراوی و
4S Cul Brilliant green باعث توقف رشد باکتری های گرم مثبت می شود.
جود سیترات و تیوسولغات؛ رشد باكترى هاى كرم منفى كاملا مرکوب می شود.
در این محیط کشت بعضی از کلی فرم ها احتمال دارد باز هم رشد کت
تملیز بین گینه های بیماری زا و کلی فرم ها با عوض کردن رنگ روی شاخص Neutrah
(60)۳]مشخص می شود.
هر کینه ای که کاز ۲۱25 تولید هی کندبه راحتی قلبل شناسایی است.به دلیل رسوب سیاه رنک
(Ferrous sulfide) که کلنی ها را سیاهعی کنند. پپتون و عصاره گوشت قابلیت تحریک کردن
دارند و در رشد اکثریت گونه های بیماری زا منز هستند»
صفحه 49:
محیط کلیگر آیرون
آگار KIA
محیط کلیگر آبرون آکار»مکانیسم شناسایی و توانلیی تخمیرقند در بسیاری از باکتیها کلوکز اولین منبع انرژٌی مورد استفاده است و در صورت
انمام اين منبع باکتری متابولیسم خود را برای استفاده از دیگر منابع به ترتیب توانایی خود تغییر میدهد.
در محیط کلیگر آبرون آکار باکتری در صورت تخمیر قندها ایحاد لسید مبکند.که بلعث تغبیر ینگ معرف موجود(فنل رد) از قیمزسبه زرد میشودء
در كين معيط در موی که بکتری فده تخر «هاى موجود نبلشد براى نامين انرؤيى از ببتون استفاده ميكند.كاببا توليد مواد قليليى رنى
معرف به قرمسز بها فقط در شرابسط هوازى قادر به متابوليسم هستند.
Sahil at ahi ish Gort aed eS ‘(Gs pha Gest es
شيبدار و قسسمت اسستوانه ای هردو ایجاد اسسيد ميشود در نتیجسه بالا و پالیسن لولسه زرد میشوند.
در قسمت استوانه ایبه علتی که تعداد با کنریکم لست در صورتیکه باکتری قادرسبه تخمیر کلوکز بلشد مدت انکوبلسیون ۸لتا ۲۴ ساعت ادامه
می یابدو رنگ معرف زرد رنگ باقى ميماند. بس از جندساعت به علت كثرت باكترى در سطح شیبدار ؛ گلوکز در این قسمت تمام ميشود.
> در صورتی که باکتری فادر به تخمیر لاکتوز باشد پس از کلوکز از لاكتوز استفاده میکند و با تداوم تولیداسید رنگ معرف همچنان زرد میماند.
(اسید / اسید) (سطح و عمق زرد) مانند ۴01
** در صورتیکه باکتری قادربه تخمبر کلوکز باشد یلی قادر.به تخمير لاكتوز نباشسيس از سه ساعت اول سطح و عمق هردو زرد میشوند ولی
-چپس از آنبه علت تمام شدن کلوکز در سطح شیبدارسبه علت کثرت باکتری » باکتری از منبع بعدی (ببتون) لستفاده کرده و سطح قرمز میشود
ولی قسمت استوانه ای زرد رنگ بافی میماند.( آلکالن/ اسید)( سطح قرمز » عمق زرد) مثل شيكلا
:* در صورتی که باكترى قادر به تخمير كلوكز و لاكتوز نباشد از ابتدا به استفاده از ببتون ميبردازد و قسمت استوانه ای و سطح شیبدار هردو قرمز
ميشود (آلكالن /آلكالن) مثل سودوموناس
صفحه 50:
لوله یک : حالت آلكالين / آلكالين » غير تخميرى 7
لوله دو : حالت اسيد / اسيد»
تخمیر کلوکز و لاکتوز
لوله سوم: حالت اسید/ سيد .
صفحه 51:
AJA+H2S مکانیسم
K/A+H; ۳
مکانسم ای توانایی احیای گوگرد و تولید سولفید هیدروژن در محیط ۷۱۵
دا ی
۱۳ ne Gade ae
nl / سمت راست : آلکالین
تولید ۱425 مثبت
سمت چپ : اسید / اسید
تولید ۱425 مثبت
محیط کلیگر آیرون آکار
مكانيسم شناسابى نوانابى توليد كاز در محبط كليكر آبرون آكار
برخى باكتريها در جریان واکنش های متابولیسمی» گاز هیدروژن و محتوی 02 توليد
میکنند که موجب تشکیل حباب و با پاره شدن محیط میشود.
كاهى تجمع كاز در عمق محيظ باعث راندن محيط كشت به سمت بالاى لوله ميكردد.
ایجاد حباب و باره شدكى در محیط ۷۱۸ - تولید کاز مثبت
صفحه 52:
es Yellow / Yellow “Acid slant/Acid butt. Glucose! Tactose
1 fermented
تخمیر گلوکز اسید در عمق , قلیا در سطح زرد
Alkaline slent/Acid butt, Glucose Fermented
5
Red/yellow
كلوكز و عدم تخمير لاكتوز قليادر عمق , قليا در سطح
Glucose & Lactose ماهلا اجهاه مشاه
صفحه 53:
ترات
لین نت برای نان دادن توایی نیم در استفاده از یرنه عون نع وه کار بدهمی
شود. ابن توانابى بستكى به آنزيم سيتراز دارد .
سیمون سیترات آکار حاوی سیترات سدیم به عنوان نها منبع كوبن و بون آمونبوم به عنوان تنهامنبه مٍ
باشد. برموتيمول بلو نيز معرف ۳۳ می باشد. ۳۱4 این محیط حدوه ۶۰۹ بو PH
. در 11 بالاتر از ۷۰۶ برموتیمول بلو به رنگ آبی
از ن 0
قابل تخمیر در دسترس نباشد . این عمل ai
سیتراتبه سلول میشود ).در داخل سلول سیتراتء طبق مکانیسم فوق استیل کو آنزیم ۲و اکزالواستات
اسید شکسته می شود.
دی اکسید کربن تولید شده از ار کانیسم سیترات مثبت با بونی سدیم و آب واکنش داده و تولید کربنات
سدیم قلیایی می کند. برموتیمول بلو در این ۳۷ به رنک آبی در می آید. از آنجا که واکنش فوق در
شرایط هوازی انجام می شود فقط در سطح شیب دار محبط مش 0
در باکتری هاي هوازی سیترات مثبت» ابتدا سیترات به وسیله سیتراز به اگزالواستات و اسید استیک
هیدرولیز می شود. آگزالواستات به اسید ببرویک و 002 تجزیه شده و COZ عامل تخر رنگ محیط
مى باشد.
سالمونلا سیترات مثبت و ۰6013 سیترات منفی است.
صفحه 54:
آزمایش
یهای خانواده آنتروباکترباسه نظیر اشر
میتوانند از اسید آمیندی ترد از ای بررسی قابلیت تولید گاز ایندول»
باكترى را در محيط داراى تریپتوة 5 توصیه شده لست) کشت داده و به مدت
۴ساعت در حرارت ۳۷ درجه سانتیگراد قرار میدهند؛ سپس,به قسمت سطح لوله محبط كشت ج
قطره معرف کواکس (6۷36) یا معرف ارلیش-بوهمه 4s! (Ehrlich-Boeheme)
مینمایند. در صورت وجود کاز ایندول» ۲ دقيقه بعد از اضلفه کردن معرف» حلقه قرمز رنگی در سلح
محیط تشکیل میشود (شکل ۷). بعد از چند دقیقه سید کلریدریک موجود در معرف کواکس با پلاستیک
کلاهک واکنش میدهد و 1 ءا ۱
درم ىنيد كه لین واکنش منفی است. از محیطهلیی مانند 5100» اورنیتین-موتیلیتی-:
(081۲) و ایندول نیترات جهت بررسی تولید ایندول استفاده میشود.
نکنها: محیط کشتیکه برای آزملیش ایندول به کار میرودبایستی فلقد قند (کلوکز)باشده چرلکه قند
کلی که دارای آننیم تریبتوفاناز هستند»
در شرایط هوازی ایندول ب
هن
نته ۲: از اشريشيا كلى بدعنوان كنتول منبت و از “اس بنوموقيه بدعنوان كنترل منفى در لين تست
استفاده میشود.
Indole positive Indole negative
صفحه 55:
ری مر ربا ادزوكسى كولات آكار به
عنوان-یک محیط انتخلبی و تمایزی برای جداسازی و ایزیله کردن پانون های گرم منفی روده ای
(سالمونلا و شیکلا ) از نمونه های مدفوع و یا سایر نمونه ها استفاده می شود.
ين محيط توسط تبلور به منظور افزايش
5
تفکیکمی کنندسبه علاوه اد رن
اند که باعث افزایش رشد کونه های شیکلا میشوند در صورتی که در محیط های دیگر به دلیل وجود مهار
کننده های سمی این اتفاق نمی افتد.
لین محیط دارای عصاره مخمريبه عنوان منبع مواد مغذی و ويتامين ها لست و سدیم دزوکسی كولات به
متصل شده و توسط تمام كونه حلبه جز شيكلا تخميرحى شود و همین بلعث تعليز كونه هاى شيكلا مى
يزين به ابن محيعا اضافه مى شود ذا كرو سا نلا از غير باتوزن ها متمايز شود جون
eames yh
ols Jussi 42 Gon Geto Pare 3 هلیی نبا ماکز ما
سولفیدهیدروژن تولید شده قابل مشاهده گردد.
صفحه 56:
بررسی
ASE و برسی ولد عازسوند هیدرین (0025)) کر مریند ماد از یسوت
سولفید؛ سیترات سولفید آگار» ۱۱۸ (لیشین آبرون آگار) :۲51 KIA و 5۱۳۸ تولید 1425 همچنین
در محيط 1.0كاء, 55,115 وبا نوار استات سرب میتولند سنجیده شود. لازجبه کر است که محیط Lz.
9 در مقابسه با محیطهای ۲5۱: ۷۱۸ حساسیت بیشتری برای سنجش H2S نشان میدهد.
هرچند که حساسیت استات سرب بیشتر از محیط Cont SIM و اغلب برای مواقعی که میزان تولید 1425
كم است (در شناسایی بروسلاها) بکار میرود. مشاهده رنگ سیاه در محبط کشت فشانه تولید گاز 1425
است.
محيط
معا کیک معیط نمهجکمد بوده و کشت باکتری در كن بوصورت عمودى و عمقى صورت
مى كيرد. لين محيطاء علايبر نشان دادن حركت و ولید ايندول» تولید 1125 را نشان مى دهد.
تبوسولفات سديم) و در ند
سولفیت فرو سیاهرنگ مینمای
محیط 5100 (سمت راست) و 1۱۸۵ (سمت چپ)
حساسیت تولید ۲125 را نشان میدهد.
صفحه 57:
صفحه 58:
مقدم
3 ۲ a
باسیلهای گرم مثبت تولیدکننده اسپور عبارتند از گونههای کلستریدیوم و باسیلوس. این
باسیلها در همهجا پراکنده بوده و از آنجاییکه اسپور تولید میکنند» میتوانند سالها در
محیط زنده باقی بمانند. گونههای بایلوس هوازی هستند درحالی که کلستریدبومها بیهوازی
اجباری می باشند.
در لین جنس تعداد زیادی باسیلهای درشت؛ گرم
مثبت و متحرک قرار دایندکه در طبیعتبه فراولفی بلفت میشوند. بلسیلوسها اهمیت زیادی
از لحاظ پزشکی و اقتصادی دارند. بسیاری از گونهها استفاده صنعتی دایند و برای تولید
آنتیبیوتیک (پلیمیکسین 8 و باسیتراسین) الکل ویتامینهاء حلالها و آنزیمها استفاده
میشوند.
« هوازی با بیهوازی اختیاری» کاتالاز
صفحه 59:
باسلوس
بالمفقر لاع مهو ريسل كرم منبتبا ١ مبكرومتر قطر و تا ۱۰ میکرومتر طول
است كه انتهاى باسيلها جهاركوش بوده و بدصورت واكنهاى قطارء يشت سر هم
و بدون حركت لست (شكل .)١ كبسول “كن برخلاف ساير باكترىها از
جنس بروتئين (0 كلوناميى) لست وبه همراه اكزوتوكسين در باتوْنز باكترى نقش
دارد. اسبور كين باکتری حدودیک میکرومتر طول دارد و میتواند برای مدتهای
طوالنی در طبیعت بلقی hoy ار در محیطهای کشت معمولی آزمایشگاه در
۷ درجه سانتیگراد بهراحتی تبدیل به فرم رویشی شده و بهصورت کلافی
درهمپیجیده درمیآید. اسپور باکتری در دمای ۱۱۵ درجه سانتیکراد در مدت ۱۵
دقيقه غيرفعال میشود؛ یلی قادر است سالها (حتینا ۲۰ سال) در خاک و
فرآوردههای دامی زنده بملند که لین ویژگی علمل مهمی در انتشار بیماری
is BO gs hoy خم یکی از جدیتیین بیماریهلیی است که میتواند تعداد
زيادى كشته درسيى شهرنها منطقه بر جاى كذارد. دوز كشند تنفسی اسپور حدود
ينيم كرم است. از سوى ديكرء دانشمندانمبا دستكارى در رجن اين ميكروب
ae كونههاى مقاوم در برابر واكسنها و درمانهاى موجود را توليد نمايند.
کلنی های باسیلوس آنتراسیس بر روی محیط ژلوز خوندار
صفحه 60:
لترى در خون» گوشت؛ پشم» پوست؛ مو ادرار و مدفوع حیوانان مبتلا به سیاهزخم
یافت میشود و باعث آلودگی چراگاهها و مزارع میگردد و انسان بهصورت تصادفی از
طییق خراش پوستی» تماسبا حبوانات آلوده» تنفس و مواد خوراکی آلوده میکردد.
باسیلوس آنتراسیس موجب بیماری سیاهزخم (آنتراکس) میشود. لین نام از کلمه
بونلنی 270۴۱۳3115 به معنی زغال گرفته شدهکمبه خاطر ینگ سیاهی ست که در
زخم ناشی از بیماری ایجاد میشد. لین بیماری عمدتاً ببماری گوسفند»بز
اسب و جاربایان است و حبوانات دیگر (مانند موش صحرایی) به این بیماری ذ
هستند. در انسان تقریبً ۹۵ درصد از موارد سیاهزخم را فرم پوستی (پوستول بدخیم) و
۵ درصد موارد را عنونست تنفسی بیماری پشمریسان (۷۷/۵۵۱5۵۲۵۵۲5۲
56 تشکیل میدهد. سیاهزخم کوارشی نادر است و در بشتر موارد از آفریقا
و آسیاکه گوشت آلوده را مصرف میکنند» گزارش شده لست. در حبوانات سیاهزخم
کوارشی بیشتر از دو فرم دیگر بیماری است. آنتراکس مفزی (۱60۱896۵1
113 در حدود ۵ درصد موارد» از ادامه نسه فرم دیگر آنتراکس حاصل
میشود. باکتری توسط خون به مغز رفته و سبب مننژیت هموراژیک میکودد.
نمای باسیلهای چهار کوش پشت سره باسيلوس آنتراسيس
صفحه 61:
۳
صفحه 62:
باسیلوس
باسیلودی ورئیویبویورت ساپروفیت در خاک ب و هوا وجود دارد. لین باکتری برخلاف باسلوس
آنتراسیس متحرک بوده و همولیزین تولید میکند. لین باکتری در انسان سیب مسمومیت غذایی میشود
بونج بختهشده است و نوع اسهالی که ناشی
از مصرف گوشت و سس لست. باسیلوس سرئوس در غذلیا روده دو التروتوكسين تولميد مى كند. شيوه عمل
یکی از انتروتوكسينهاى .كن مشلبه سم وبا است و ایجاد لسهال مى كند. شيوه عمل انتروتو كسين دیگر شبیه
-به انتروتو کسین استافیلو کک اورئوس است که فرم استفراغی را سبب مىشود. لين فرم از انتروتوكسين
مقاومبه گرما است. فرم اسهالی مسمومیت غذلیی ناشی از باسبلوس سرئوس ۱۰-۱۸ ساعت پس از
خوردن بونج پخته و محصولات لبنی در فرد ایجاد میشود و مشلبه مسمومیت غذلیی نلشی از کلستریدیوم
پرفرنژنز است.
فرم استفراغی مسمومیت غذلیی ناشی از باسبلوس سرئوس ۱-۵ ساعتپس از خوردن غذاهای آلوده به
5 اسپور در فرد ظاهر شده و علاوه بر استفراغ؛ تهوع نیز مشاهده میشود. برای این بیماری درمان
تيكى توصيه نشده و فقط درمان علامتى صورت مىكيرد. براى بيشكيرى روش خاصى وجود
i ف
باسیلوس سرئوس aa مسمومیت غذلیی علصل مهم عفونتهای چشمی شامل کراتیت شدید»
آندوفتالعیت و بانافتالعیت است. بهطور تیپیک ار گانیسم توسط جسم خارجی ناشی از ضربه وارد چشم
میشود. این باکتری با عفونتهای موضعی مثل اندو کاردیت» مننژیت؛ استئومیلیت و پنومونی ارتباط دارد.
مصرف داروهای تزریقیبا وجود وسایل پزشکی در بدن» احتمال بروز لین عفونتها را بالا میبرد.
باسیلوس سویتیلیس عامل مسمومیت غذایی است و گاهی سیب عفوفت در افراد با ضعف ایمنی میشود.
5
نمای میکروسکیی باسیلوس سرئوس
صفحه 63:
سس
آزمایشگاهی
نمونههای ارسالی-به آزمایشگاه: برای تشخیص بیماری سياه زخم» از خون» CSF چرک آبسه (پوستول)» خلط و مدفوع بیمار
نمونهبرداری مینمایند و برای تشخیص مسمومیت غذلیی از بافیمانده مواد غذلیی» مدفوع بیماره مواد حاصل از استفراغ يا
نمونههای دیگر (نمونههای چرک و خلط) استفاده میشود. در زخمهای تازه میتوان ملیع رلبا خراشیدن ضایعه بهیسیله سوزن
تهیه و توسط سو آب برداشت نمود.
برای تشخیص باسیلوسها از روشهای زبر استفاده میشود:
> آزمایش مستقیم
کشت
+
* نست سرولوژی
Sy > آمیزی گرم
&
رنگ آمیزی اسپور
بررسی قدرت همولیز
تست کاتالاز
تست السيتيتكز
sou Motility cat :
صفحه 64:
‘ بعد از خشک کردنسیک لام را رنگ آمیزی کرم و دیگری را که بدطور تلقصببا سه بار عبور
سریع از روی شعله فیکس شده است؛ با رنگ گیمسا رنگ نمایید.
باسیل شاربن (سیاهزخم) در رنک آمیزی گرم بهصورت باسیلهای بزرگ گرم مثبت؛ کپسولدار و بدون اسپور و مشابه واگنهای
قطار بشت سرهم قرار مى كيرند. در رن آمیزی کیمسلبه شکل باسیلهای آآبی که بهوسیله مواد کپسولی (قرمز-ارغوانی)
بهطور نامنظم احاطه شده است؛ مشاهده میگردد.
نمونهها را میتوان مستقیماً آدر هی آز کی در فیط جاص S19 تریط نی بای هه کت داد
در مسموميت غذلبى نمینه هاي مدفوع را میتوانبا ستفاده از شوک حرایتی کشت نمودسبه لین صورتکه ادا نمونه را در
سرم فیزیولوژی با آب مقطر رقیق نموده و در حرارت ۶۲/۵ درجه برای ۱۵ دقيقه (۷۰ درجه به مدت ۱۰ دقیقه) قرار میدهند
نا كليه باكترى هاى فعال از بين رفته و در اين صورت فقط اسپورهای باقیمانده را بر روی محیطهای مختلف کشت میدهند. بس
از انکوباسیون در ۳۵-۳۷ درجه برای مدت ۱۸-۲۴ ساعت؛ مشخصات کلنی را بررسی مینمایند.
باسیلوسهاء از جمله باسیل سياه زخم و بلسيلوس سرئوس کلنیهای بزر گ؛ پهن نامنظهبا حاشیه چیندار بهاندازه Bem
۴ که در اطراف کلنی رشتههلیی (6213106100) کشیده و بیچیده یه مسسوی مجعد (Medusa head)
ایجاد مینمایند. کشت نمهنه باکتری در مجاورت -11603, 602 و محیطهای غنی» سبب ایجاد کپسول بلىيبتيدى (از
جنس پلی گاما دی گلونامیک اسید) میگردد.
صفحه 65:
صفحه 66:
افتراق باسیلوس آنتراسیس از
سایر باسیلوسها
باسیلوس آنتراسیس بر روی معیط بلادآکارفلقد همولیزبوده درحالیکه بامیلوس
سرئوس و بقیهباسیلوسها همولیز 8 ایجاد مينماید.باسیلوس آنتراسیس در کمتر
از ١5 درجه و بيشتر از ۲۴ درجه رشد نسسمیکند و در ۴۲-۴۴ قدرت
باکتری را در محیط لوله حاوی
) ایجاد میکند و در محیط آب
ک در سطح تشکیل میدهده
پپتونه و آبگوشت, دلنه درشت درته لیله و پرده
awe easton ی ما باسل td il دون
ااسیس بر روی محيط | صل و بارا ركد
. تزییق نمونه مشکوک به سیاهزخم»به حیوان حساس
(خوکچه (sun سیب مرک قّن حیوان.پس از ۲۴-۴۸ ساعت میکردد. باسیل
اه زخجبه فا کلما (۷) حساس دم درحالیکه سایر باسیلوسها مقاوم هستند.
باسیلوس سرئوس مانند باسیلوس آنتراسیس لسیتینازمثبت است. در جدول | وجه
تمایز بسیلوس آنتراسیس و باسیلوس سرئوس نشان داذه شده است.
آلتراسيس
سرئوس
صفحه 67:
ع رس A laze
trin test 248)
نل درن ينح) ,6 ) زا ing ی ۰ واحدی پنیسیلین زوی cabs YF cite anes]
کیب مودسيس از برداشت تمونه از حاشيه تاحيه عدم رشد وتهيه كسترش و رتك ميزى مىتوان باكتروها را بدصورت وشسد مرواريد (كردن بن
مشاهده نمود» درحالىكه بقيه باسيلوس ها اين خصوصيت را فدارند. تشكيل رشته مرواريد بدليل حساسيت باسيل سياءزخم به بنىسيلين است.
أسكو
تست آسکوتی آزمایشی حساس براى بررسى علت مرى حيوان ناشى از باسیل سیاهز خم استگبه لین صورت كه قطعه كوجكى از احشاء حيوان
مرده در اثر بیماری سیاهزخم را در هاون کوبیده» سپس به آن ۵ برابر سرم فیزیولوژی اضافه نموده و آن را میجوشانند» پس از سرد شدن؛ مقدار
"٩۱ 5 از ّن را درمیک لوله آزملیش ريخته و بر روى كن جند قطره آنتیبادی اختصاصی میریزند. چنانچه صفحه کدری در محل برخورد
آنتیژن با آنتیبادی مشاهده شود (واكنش برسىببتاسبون) دلیل بر وجود آنتیژن باسیل سیاه زخم است.
صفحه 68:
68
تکته ۱
انتراكس را نمیتوان در گسترههای خشت با تکنیكهای رنگآمیزی ایمونوفلورسانس قناسایی, نمود. در
آزمایشگاههای کلیتیکی و مرجع از كشت دادن. تلتیح به حیوانات آزمایشگاهی (موش و خوکچه سندی).
فازتایپینگ. الیزا و روشهای مولکولی (668) در تشخیص آزمایشگاهی باسیلوس آنتراسیس استفاده
میشوه
Wax
باسیلوس سرئوس را میتوان در افراد دچار سوختگی. زَخم پس از عمل جراحی. منئژیت. آبسههای مغزی,
خلط و خون بدست اورد. وجود ها عدد باکتری و اسرور در یكك کرم غذا با مدقوع دابل بر آلودکی ۱
was
چتاتچه باسیلوسها در کشت گهنه کم متفی نقان دلده شود. برلی تمایز اینها از باسیلهای کرم منفى واقصی
از بررسی حساسیت به دیسک وانکومایسین استفاده میشود که باسیلوسها حساس ولی داسبلهای گرم
منفیها مقاوماند. همچنین اگر کلنی پاسیلهای گرم مفی را در يك قطره سود ۳۰ ۵" حل تمايیم. ایجاد
صفحه 69:
صفحه 70:
لخد رسد
gate 110
wens
صفحه 71:
۳ 1
<i 4
۱ a 1
درا
صفحه 72:
تست های
شب و
Sees
۳ Oe eee
رنگ آمیزی کرم غالبا گرم
رنگ آمیزی اختصاصی : لاکتوفنول کاتن بلو
وجود رنگ اختصاصی کاتن بلو - حاوی اسید لاکتیک ( کمک به حفظ رنگ و نفوذ رنگ به قارج ) - کلیسرول باعث میشود رنگ در قارج باقی
میماند .
مرحله ی کشت : کشت در محیط های Agar - BHI 566۵ 81۳۵ - ۸92۲ ۱۸۵۵۱ 60۳0 ( معیط غنی برای کشت و رشد)
oe)
محیط اختصاصی و معروف برای کشت : محیط سابرو دکستروز آکار
محیط سابرو دکستروز آکار » یک محیط انتخابی است که به ۲ صورت سابرو دکستروز آکار و سابرو دکستروز براث وجود دارد .
در محيط سابرو دكستروز آكار » دكستروز به عنوان منبع كرد و انرژی است .
محیط سابرو دکستروز آکار ؛ حاوی تیک ام ال 62 د 0 ذا
صفحه 73:
آسپرژیلوس
فلاووس
قارج آسپرزیلوس Aspergillus flavus یک تارج
low
شود. پوسیدگی بعد از برداشت معمولا در طول برداشت» ذ
و فقل توسعهحی یابد. عفینت نلشی از ۴13۷/5 ۵.۰ ممكن الست در حالى
که محصولات کشاورزی هنوزبه کیاه مادر خود متصل هستند رخ دهد که به
لین حال آلوکی پیش از ردشت گفتهحی شود لها اغلب هيج ناه ی از
آلودگیتا قبل از ذ
توجهی از ترکیبات سمي معروشبه میکوتوکسین ها را تولیدحی
مصرف آنها برای پستانداران سمی Si eigen A. flavus
باتويين فرصت طلب انسان و حیوانات است و باعت ایجاد آسپرژیلوز در
افراد مبتلا به نقص و ضعف سيستم ايمنى مى شود.
صفحه 74:
میزبان
ها
chow 9 Aspergillus flavus جهارنسه عنوانسکساپروفیتهر خاک لفتمیشود و ساعنهسیرودر بسسیلرعاز محصولات
کسناورزوممممینسود. میزبنهاویلیج آسپریلوسفالیوس برد از غلات هبوباتو دیختلنیکه عبیه آنهابسه عنوانآجیلاستفاده
میسود. در بسرخیهوارد؛ عفوفته دا 113۷ .۸ باعوسیدکیخوشه در فیتو کسپکزرد در بادلمزمینرقبلبا بسعد از بردلشمی
شود لزع فونم ولزقبلاز بردلشت بعد از بردلشتدر طولذضیره سازوو در هنگام هملو نقاپلیجاد شود.لینسیمار کر
لبع بسوشه و میزبنهایسمیلییدارد. سکته عهم در يلبطه با آندکرتسوسط آسپرزیلابیاسنکه عاالم و ننلنه هلینیاظلب
غیر قلبلمشاهدملست05 113۷ ۸56۲911/۵5 دایلیبستانسیل ده کردنگیا هچه ها بسه وسیله لسپویلسیونرووهلنه هایزخمی
میسانشد. در غلاتبساتوینمیت ولند جنینهاوسنر را از بسبزیسبرد و بساعع فوف تسود لیر عفونسبسه جولنه متنقلمیسود سپسربه
بنوهایجد یدمنتقلشده و بسا آسییسه جنینساعتضاونشود.در نتبجه کیفیتو قیمتبسنور کاهثخواهد بسافتهشراتولسترسها
و خخم هایمحیطیمتولنند بسروز عفوفندر 15 13۷) ۸۰ را تسشدید کنند. تسنشها شاملسوسیدگیساقه» خشکی آسیبسدید
بركو باعواد غفلییکم در دسترسکیاه هستند.بسه طور ای رطودبسینراز هدو دوجه هرلرنل در محیطنگه دلیولنه هاو
هبوباتموجبافزلیشت ولید آفلانیکسیرت وسط 15 1121 ۸۰ میسود. در پستندارلنانوزنمینسولند از طريقمصر فخوراك هم
بسا آسپزیلوز از طريقوشد تهاجمرباعطيجاد سرطانکید نسود.
صفحه 75:
علائم و نشانه های
Aspergillus flavus
کلنی های قارج آسپرژیلوس فلاووس معمولا بصورت توده های پودری شده از اسپورهای سبز-زرد و بر روی سطح بالایی و
طلایی-فرهز ملیل,به قرمز در سطح پالین هستند. در هر دو دلنه و حبوبات, عنونتبه مناطق کوجک محدود می شود و اغلب در این قسمت
ینک و لکه روی بذر ایجادمی شود. رشد کلنی لین قارج سریع بوده و در بلفت کلنی بصورت نازکسیلبه حللت پودری ظلهر میٍ
igs
ی سس مس روج و ی و او
آنزیم های تخییب کننده بروتئین ها تولید.حی کنند بنابرلین لین قارج مواد مغذی (مواد غذلیی) را تجزیه کند. رشته های هیف
در طول تولید ۸۰ flavus انفرادیبا چشم فیر مسلح قلبل دیدن نیستند لما کنیدی های ضخیمبا چشم نیز دیدهعی شوند. کنیدی های
0 ١ مثل روى كنيديفورها توليد مى شوفهه
کنیدیوفورهای آسپرژیلوس فلاووس جبی رنگ و درشت و زبر هستند. فبالیدها هم تک ردیفه و هم دو ردیفه می باشند
a کی «x Petromyces عنوان م2 لميد مثل جنسى 1131/1015 A. شناخته شده لست. آسکوسپورهای ۳۵۲۲۵۳0۷۲65 در
داخل اسکلروت ایجادمی شوز - فوم جنس لذن رج هتروتالیک زملنی تشکیل.عی شودکه استرین هلیی از گونه های آمیزشی مخللف با
يكديكر كشت مى ثوند. توليد مثل جنسى بين کونه های سازگار منعطق به گروه های مختلف سازکاری رویشی رخ مس دهد.
مورفولییی 5 13۷] ۸5!| ]۸506۲ پیچیده است وبه دو گروه بر کساس اندازه لسکلروت تولید شده تقسیجمی شود. گروه اول شامل
سویه های ابا اسکلروت هاییبا فطر بیش از ۴۰۰ میکرومتر است. گروه دوم آسپرژبلوس فلاووس شلمل گنه های 5با اسکلروت هلیی با
قطر کمتر از ۴۰۰ میکرومتر است. هر دو سوبه .| و 5 می توانند دو آفلاتوکسین شایع (51 و 82) را تولید کنند. تولید آفلاتو کسین 61 و
2 منحصریبه سویه های 5 لستکه معمولا تهسط 113۷/5 ۵۰ تولید نمی شود. سویه 1 از نوع سوبه تهاجمیتر است لما آفلاتوکسین
کمتری تولیدحی کند. لین 1 همچنین دارایمیک نقطه ی هیدرواستاتیک اسیدیتر است و در مقابسبا سویه 5 تحت شرلیط محدودتر»
اسکلروت کمتری تولید می کند.
صفحه 76:
چرخه بیماری قارچ
0 2 اسيرزيلوس فلاووس
به نظرمى 9 Spe pci Sa 4 Genego Aspergillus flavus
Ms
وسد یسکملیه تسلقیح رویمواد پسوسیدد هم بسصوونلسکلروتو هممیسلیوم محسوبمی
شود لسكلروتجولنه مرؤند نا هيفها وللسبوووهاوفير جنسویسکه کنیدونام
دلوندرا توليد كنسليركنيدوها در ولقع لولبرهليه تلقيح 5لا/1131 ۸.۰ در طول
دووه آدگیمحسوبمینسوند. بسروباگولهایموجود در خاك كملكنو نكنيدها
هستنه تسوسطباد و هشولت(و ساهوارد حشلبه) سیلکنده مینسوند. کنیدیهاهی
تولنند بر رووزمینو يا دلنه با حبوباظيجاد [إشكىك د اسبورها از طريق
لبییشم فیتوارد غلافشده بسه سمنكئلنه هايرفته و كنها را كؤِمه عمى
كنند كنيديوفريها و كنيدوها در بهار از aS 56۱۲0۵1 تولید می
شوند يكمليه تلقيح نانيبه بولوفلوج آسبرؤيلوسفلايوسوجود دارد كه
حشرك منلبعليناكولوكو تسشديد ولد مات
صفحه 77:
آسپرزیلوس
نایجر
Aspergillus niger بسکقایج و یکیز شلیم ترینگونه هاوجنس
هت
خی موه بیقر دموا من خاک يم نیا بلفت می شود و معمولا
حضور آن در محبط های داخلی و خلنه ببش تر است. کلنی های آن سیاه می باشند
و ممکن است با قارج 513610۷00۴۳۷5 ( گونه هلیی کمبهقن "کیک سید کف
می شود) اشتبه گوفته شود.
برخی از کینه های 196۳ .۸ میکوتوکسین های قوی به نام اکراتوکسین
(0613۳۵۴0<05) تولیدمی کنندگبا لین حالمنلبع دیگری مخللف هستند؛ ادعا
عی کنند که لین گزارش بز اساس ودن شناسایی کهنه های قارچی است.
شواهد اخیر نشان می دهد که برخی از گونه های 196۳ ۸۰ علاوه
اکراتو کسین؛ همچنین ایزوفلاون اوروبول (0۳000۱ 150113۷086 را نیز
تولید می کند.
صفحه 78:
طبقه بندی
يلوس نايجر
آسپرژیلوس نایجر ۱136۳ دنا!!أو:©م85 نیر گینه ی بخش ۱۷19۲1 در
Nigri Avy .9,19 41,5 Aspergillus Circumdati sss شلمل 13
ير كهنه مرتبط.با گونه های.با اسبور سیاه ینگ است که ممکن است با ۸۰
۳ که شامل .۵ A. tubingensis: A. foetidus:
2۳000۵۳5 و 2۷۷3۳00۲ ۸۰ می شود اشتباه گرفته شود. تعدادی از
کهنه های مور فولوژیکی مشلبه در سال ۲۰۰۴ توسط 530150 و همکارانش
شرح داده شده ا
در ATCC 16404 Aspergillus niger su <¥++¥ Jlu تحت
A. brasiliensis gsc طبقه بندی شد. در امریکا و اریپا معمولا از این
سویه در سراسر صنعت داروسازی استفاده می کن
صفحه 79:
بیماریزاي
ی
ایجاد بیماری در گیاهان
۲ ۸5۳۵۳91۱5 سبسلیجاد کپکهایسیله و سفید در بسیاز و کیاها ززبنتیهیشود. عفن نهللسیاز توسط ۱1196۲ ۸۰ حی
تولند سیستمیکب اشد ولینها لقنها زملنیخ میجهد کنه شرلیط مناسوشد قلرج محیا باشد 0196۲ ۸۰ سکبیماریسسیار پلیج
بسعد از بسردلشترا رجوبسیازملیجاد میکند کسه در آنکسبکهایسیله ونگدر بسینفلسهایسیاز قلبلدیدنهستندلیقارج همچنینساعت
بسیملوودر بسادلم زمینییانگور مینسود.
ایجاد بیماری در انسان و حبوانات
۳ ۸50۳9115 نسبته دیگر کینه هایآسریٌیلوسکم تسر درملنسانو حبولنانلیجاد بيطرىمىكندو تتنها در موارد بسار
ناد ر سلنسانها حمکوستدچار بسیماییشوند. معيو لا سیمارو هب صووتعشکلویویجدی که آسپرپیلوز نام دارد بسروز هیک ندساغاملینسیملیی
در کل رکیلنو کارکنانیکه کسار آنهاهربوط به باغبلنىو بر داشتمیوماسندیده میشود وهم جنبیافرادیکه در معرضكرد و غبار
ید هد چا که کرد و فا من کمن لور آسبرؤيلو باش لسبيرهاى سيلدي ذكلية لوج حترهر مقبره هاوموميلبوور
و میسولنندافرادیکه بسللیموارد در لیتباطهستند را دجار بسیطییکنند.
2 انلمكيداز (طدية لاوجب :نييبت كته باك وري آسببشنولييهوقنو در
نيز كزلوش ا عاذد
+5196 0911135همكه بكرادت
حوارد شدید آسیسیسه کاندلسوشو غشا:
صفحه 80:
ols I
اسيرز. هو ای حیط کشتهاوهمیمواز جمله ۳۵۸ بسه خوبیشدمیکند.
استفاده های صنعتی از آسپرژیلوس نایجر
بیلوتولید صنعتیبسسیلیواز حواد غنلبیک شتمینشود. سویه هایمختلف" 0196 ۸۰ در آماده سازی ۸5۲۵۳9111: ۳
صنعتراسید سیتربک(0 533) ولسید کلوکونیک( 74 25) حور داستفاده قرار میبیند و وس سلزمان- هداشتجه ان لبلقبول
بسولومصرفووزلنه هستند. تخمير 71968 .8 وسطادلیه غنا و دار یلید اتعتحده نسحقانونشنا؛دارو و لولزم آلیشی )درل لیلمن
(GRAS Patan cbs te ۰
ی از آنزیم های مفیدبا استفاده از تخمبر صنعتی قارج آسپرژیلوس نابجر 0196۳ ۵۰ تولید هی شوند. به عنوان منال؛ ۸۰
niger glucoamylase (P69328) در توليد شييت ذرنسبا فروكتوز بالا ستفادهمى شود و يكيناز ها (01128) در تخمير
سیب و شراب لستفادهصی شود. آلفاکالاکتوزیداز (GH27) آنزيمى .كه بخشى از فندهاى بيجبده را تجزیهحی کند؛ جزء 86300 و
سایر محصولانی است که بلث کاهش نفخحی شود. استفاده دیگر برای 96۳[ .. ت بیوتکنولوزژی در تولید انواع ایزوتوپ
مغناطيسى ماكر ومو لكول هاى بيولوزيكى برای نجزیه و تحلیل niger wal NMR ۸5۵۳9111۵5 همچنین برای استخراج انزيم
کلوکز اکسیداز (513006) استفادهعی شود که در طراحی دوز سنجی کلوکزنبه دلیل وابستگی بالثیی کمبه 8-0 -کلوکز دارد مورد
استفاده قرار می گیرد.
قارج آسبر زيلوس Aspergillus niger 9 حال رشد از محل استخراج طلا حاوى مجتمع هاى سابانو--فلز ملنند طلاء نقرهه مس»
آهن و روى جدا شده لست. قارج همچنین نقش مهمی در قلبل هل کردن سولفید های سنگین فلز دارد. قارج 196۲ .شبه میزان ۱۰
وزن خشکسبه نقره متصلحی نود. جذب بیولوژیکی نقرمبه وسیله ی تبادل بین (۵)11 و (۱۸9)11 سوربنت رخحی دهد بنابراین
آسپرژیلوس نابجر یکی از جذب کننده ها و استخراج کننده های زنده نقره از طبیعت می باشند.
صفحه 81:
روش رنگ آمیزی لاکتوفنل کاتن
بلو ( ویژه قارچها )
روی یک لام تمیز قطره ای از محلول کاتن بلو ريخته و سپس با آنس مقدار کمی از پرکنه محیط کشت را برداشته و روی آن قرار داده وبا
ینگ کاملا مخلوط نملئید آنگامیک لامل تمیز روی لام گذاشته سبسبا لاک سفید اطراف آنرا مسدود نمودمتا للمل در گثر خشک شدن
لاک جابه جا نشود.
روش دیگر :
مى توان ابتدا با چند قطره الکل متیلیک کشت را روی لام ثابت نموده و سپس رنگ کاتن بلو را به آن اضافه نمائید.
مزابای لاکتوفنل کلتن بلو جهت تشخیص فارج ها به وه فارج های مسیلیال(کبکی) در محبط کشت به کار میرود.
#.در لین رنگ آمیزی اسید لاکتیک به داخل هیف قارج نفوذ کرده و موجب حفظ ساختمان و پیکره فارچ می شود .
فنل سلول های زنده را غیر فعالحی کلتن بو قارج را ینگمی گنه و کلیسرول بلعت.می شود رنک؛ نیع دایمی شده و به احتمال
قوی رسوب رنگ را کاهش می دهد.
صفحه 82: