اتوکلاو و اون

اتوکلاو و اون

اسلاید 1: اتوكلاو و اونمهناز صارميكارشناس ميكروبيولوژيآزمايشگاههاي رفرانس ايران

اسلاید 2: اتوكلاواگر چه اتوكلاو بهترين وسيله براي استريليزاسيون است، بايد تصديق كنيم كه طولاني شدن مرحلة گرمايي سبب كاهش كيفيت مواد مغذي در محيط هاي كشت كمپلكس كه محتوي قندها، مواد معدني و فلزي هستند مي شود، و در نتيجه به محيط هاي كشت زيان وارد مي كند. بنابراين براي چرخة استريليزاسيون بايد از زمان هاي كوتاهتر و دماهاي بالاتر استفاده كنيم تا علاوه بر آنكه آسيب كمتري به محيط هاي كشت وارد مي شود، براي ارگانيسم ها كشنده تر باشد.

اسلاید 3: چرخة استريليزاسيونمرحلة 1 : زمان بالا رفتن دما در محفظة اتوكلاو (C ۫‍121 -20)مرحلة 2 : زمان نفوذ گرما به داخل ظرف محيط كشت (C ۫‍121 - 100<)مرحلة 3 : زمان نگهداري در دماي مقرر (C ۫‍121 -121)مرحلة 4 : زمان پايين آمدن دماي محفظه (C ۫‍80 -121)

اسلاید 4: انواع استريليزاسيوناستريليزاسيون محيط هاي كشت و محلول هااستريليزاسيون مواد مصرفي آلوده استريليزاسيون مواد خشك بسته بندي شده

اسلاید 5: استريليزاسيون محيط هاي كشت و محلولهابهتر است از لوله و ارلن درپيچ دار استفاده شود. بيشتر از 3/2 آنها را پر نكنيد. درپيچ آنها را شل كنيد.از قرار دادن اشياء بر روي يكديگر بپرهيزيد. بايد فاصلة اشياء از يكديگر و از ديواره هاي اتوكلاو حداقل 5 سانتي متر باشد تا بخار جريان يابد. درب اتوكلاو را ببنديد. زمان و دما را طبق دستور شركت سازنده (معمولاً 15 دقيقه در C ۫‍121) تنظيم كنيد.

اسلاید 6: استريليزاسيون مواد مصرفي آلودهمواد مصرفي آلوده را جدا نموده و در كيسه هاي قابل اتوكلاو شدن قرار دهيدو بر روي آنها برچسب Biohazardنصب كنيد.براي اطمينان از نفوذ بخار به همة قسمتهاي كيسه، يا گرة آنرا شل كنيد يا قبل از محكم كردن گره، يك پيمانه (3/0 ليتر) آب به آن اضافه كنيد. بيش از 4/3 كيسه را پر نكنيد.براي جلوگيري از مسدود شدن آبگذر اتاقك اتوكلاو توسط آگار مذاب، كيسه ها را داخل سطل قرار دهيد.زمان لازم براي استريليزاسيون زباله، 30 دقيقه در C ۫‍121 يا 15 دقيقه در C ‍ ۫ 134 مي باشد.وقتي آگار ذوب شده، سفت شد مثل زبالة طبيعي آنرا دور بريزيد.

اسلاید 7: استريليزاسيون مواد خشك بسته بندي شدهبسته ها را طوري در اتوكلاو قرار دهيد كه حداكثر چرخش بخار در بين آنها ايجاد شود و با ديواره هاي اتوكلاو نيز تماسي نداشته باشند.زمان لازم براي استريليزاسيون مواد خشك بسته بندي شده ، 25 دقيقه با خروج سريع بخار يا 30 دقيقه بدون خروج بخار در دماي C ۫‍121 مي باشد.

اسلاید 8: نحوة نگهداريروزانه: صفحة كف اتوكلاو را از سوراخ آبگذر اتاقك جدا كرده، تميز كنيد. لوازم فرعي مثل طبقات و سيني ها را با آب و صابون بشوييد. سطح آب ژنراتور را كنترل كنيد.هفتگي: آبگذر و درزها را تميز كنيد. سوپاپ اطمينان را بررسي كنيد.ماهانه: آب دستگاه را تعويض نماييد.هر 3 ماه: داخل و خارج دستگاه و قسمت بيروني آبگذر را تميز كنيد.هر 6 ماه: دستگاه توسط نمايندة سرويس تعمير، بازرسي شود.

اسلاید 9: كنترل كيفيتست شيميايي: - نوار كاغذي TST: سه عامل زمان، بخار و دما را كنترل مي كند و از زرد به بنفش تغيير رنگ مي دهد. - برچسب :Sterility-Record علاوه بر سنجش استريليتي، امكان ثبت تاريخ استريليزاسيون، نام فرد استريل كننده و نام محيط كشت بر روي اين برچسب وجود دارد.تست بيولوژيك: استفاده از ويال حاوي اسپور باسيلوس استئاروترموفيلوس ATCC 7953

اسلاید 10: ايمنياز دستكش مقاوم به حرارت و محافظ چشم استفاده كنيد.بعد از آنكه فشار اتاقك اتوكلاو به صفر و دماي آن به حدود C ۫60 رسيد كنار درب اتوكلاو بايستيد و آنرا باز كنيد. منتظر بمانيد تا ظروف كمي خنك شوند، سپس آنها را حمل كنيد.هرگز در هنگام روشن بودن دستگاه اقدام به بارگذاري يا خارج نمودن وسايل و مواد ننماييد.هرگز در هنگام روشن بودن دستگاه و اتصال آن به پريز اقدام به تميز نمودن آن نكنيد.هرگز پيچهاي محكم كنندة درب را در هنگام كار دستگاه شل و سفت نكنيد.

اسلاید 11: فور(اون)اون براي استريل كردن موادي كه بطور كامل تحت نفوذ بخار قرار نمي گيرند، اما مي توانند دماي بالاي مورد نياز مثل C ۫180- 160 را تحمل كنند به كار مي رود. اون بويژه براي ظروف شيشه اي مثل لوله آزمايش، پتريديش، پي پت و نيز براي آلات فلزي مثل پنس، اسكالپل و قيچي به كار مي رود.

اسلاید 12: استريليزاسيون در اون براي بسته بندي اين وسايل جهت استريل نمودن آنها در اون ميتوان از فويل آلومينيومي يا كاغذ كرافت و سربطريهاي پنبه اي استفاده نمود.بايد دقت شود كه كاغذ و پنبه نسوزند چون پنبة نيم سوز مواد ضد باكتري فراري را متصاعد مي كند.حدود 2 سانتي متر از انتهاي فوقاني پي پتها را با پنبة غير جاذب ببنديد و آنها را در ظروف فلزي قرار داده، درب آنها را ببنديد.درپوش لوله هاي آزمايش را با كاغذ آلومينيومي بپوشانيد و آنها را بطور عمودي در جا لوله اي قرار دهيد. درپوش، لبة لوله را از آلودگي از طريق هوا در طي ذخيره سازي حفظ مي كند.

اسلاید 13: ...استريليزاسيون در اوندر صورتي مي توان بطري هاي درپيچ دار را در اون استريل نمود كه درپوش و آستري آنها از موادي مثل فلز، پلي پروپيلن يا لاستيك سيليكون ساخته شده باشد تا در دماي استريليزاسيون از شكل طبيعي خارج نشود.پودر، روغن، چربي و گريس را در ظرف شيشه اي يا فلزي ودر اندازه هاي كوچك كه از وزن 10 گرم يا عمق 1 سانتي متر تجاوز نكند، استريل نماييد.قبل از قرار دادن ظروف شيشه اي در اون، از خشك بودن آنها مطم‍ئن شويد. مواد را به گونه اي در اون قرار دهيد كه هواي داغ در اطراف و مابين آنها در جريان باشد.

اسلاید 14: ...استريليزاسيون در اونزمان نگهداري استريليزاسيون از زماني آغاز مي شود كه اتاقك به دماي استريل انتخابي برسد و نيز مدتي هم بيشتر در نظر گرفته مي شود تا همة قسمتهاي اتاقك و مواد داخل آن به دماي مورد نظر برسند(‍‍C ۫180-160 به مدت 2 ساعت).به دليل عايق بودن دستگاه، چند ساعت طول مي كشد تا اشياء داخل آن خنك شوند. درب اون را باز نكنيد تا اتاقك، ظروف و مواد داخل آن تا دماي حدود ‍C ۫60 خنك شوند. اگر هواي سرد ناگهان وارد دستگاه شود ممكن است ظروف شيشه اي ترك بخورند.

اسلاید 15: فور(اون)نحوة نگهداري: بطور ماهانه داخل آن تميز شود. هر 6 ماه توسط نمايندة سرويس تعمير، بازرسي شود.كنترل كيفي: تست شيميايي: استفاده از ويال شيشه اي Browne و مشاهدة تغيير رنگ مناسب از قرمز به سبز. تست بيولوژيك: استفاده از نوار كاغذي حاوي اسپور باسيلوس سوبتيليس .ATCC 9372ايمني: استفاده از دستكش مقاوم به حرارت و محافظ چشم.