پزشکی و سلامتپرستاری و پیراپزشکی

استخراج RNA از بافت و تشکیل CDNA

صفحه 1:
9 ارائه دهنده : احمدرضا نجاری ‎٠‏ جكونكى استخراج 808/8 از ‏بافت ‎CONA jiiw °

صفحه 2:

صفحه 3:
وی استحراج11/۳ از بافت: ‎٠‏ 301019 از بافتمورد نظر را همراه با ازتمايع در هاونخرد ميكنيم تابه صورتيودر در بيايد ‎

صفحه 4:
0 ‏ای انتقال‎ Pee oe) rere rer ‏اضافه‎ ‎Pet Dee) جد 1 ود 7 110 عسي اس كردن هموزن كرده و 5 دقيقه در دماى اتاق انكوبه ميكينيم 0 لاندا كلروفرم به ويال اضافه ميكنيم 5 ثانيه ويال را تكان داده (ورتكس نكّردد) ‎٠‏ سيس ويال 10 دقيقه روى مج ویال تا در د مدت ‎١15‏

صفحه 5:
ا اه ‎ie‏ 11 س2 ۰ فاز ل ‎APE)‏ ‎٠‏ فاز يايينى هم شامل باقى اجزاى سلولى (بروتئينى) ‎ ‎

صفحه 6:
ويال را به شدت تكان داده و 15-10 دقيقه در دماى ‎eet pol SOIL nets‏ ار دی ما سپس ویال را به مدت 30-15دقیقه در دمای 4 درجه سانتریفیوژ میکنیم بعد محلول رویی را دور ريخته و چند دقيقه در دمای اتاق انكوبه ميكنيم تا الكل ان بخار شود برحسب ميزان رسوب حدودا 50-20 لاندا اب ديس ( ©عم06) به رسوب اضافه ميكنيم 000 EBLUL Bese) MOP EPO ‏م ل ا‎

صفحه 7:
ane eT 5 ‏َك‎ Bu ‏میدانید‎ ‎Wy‏ گرفتن : در میدان ‎curv ema D DYE VinevttTl -6t‏ مورد نظر میپردازیم . ‎1۱ Berean Cen ‏اگارز مورد استفاده دز ساختن زل میباشد‎ ‎Jin S295 wleled yx SRuN sly + Oy SOS ENN eT LT. ‏برای اين کار 0.34 گرم از تودر أكارز را در‎ ‏حل ميكنيم و طبق‎ 1631 رفابالاا١‎ 3 Penn hens ‏* بعد از اماده شدن زل ان را روى صفحه ا لل ارت سپس شانه ها موجود دز ژل را برمیداریم كه بعدا قالب به جا مانده شانه به عنوان ‎11111111100 es ‎et‏ امام د

صفحه 8:
برای رنگ امیزی و 5 5 pee rna ee es eee) | yl a loading dye lu 3-2 jlaao 5, ‏از ۱20067 برای متوجه شدن طول مولکول ۲۷۷اشده‎ ‏استفاده میکنیم که در اینجا از ۱820067 هایی استفاده‎ L, 1000Base pair-200 yu ub ‏طول‎ aS ope 5 چاهک ‎9SII Ulgic as priSre adLol |, ladder laul o>‏ + در چاهک های بعدی نیز نمونه ۲3 استخراج شده را تزریق در مرحله بعد دستگاه را به برق وصل میکینیم و بهتر است که ولتاژ 150 داشته باشد در این لحظه شاهد حرکت حباب هایی به سمت قطب مثبت ا ا ا ‎WoC ee myer‏ ۳

صفحه 9:
0دقیقه بعد ‎ee‏ ۳ خامويش میکنیم ‎L cae‏ ا ‏2 ۹ در اینجا شاهد تشکیل ‎Liat‏ يل ‎۱ As) ‏دارد) و 8085185در طول‎ ‏68 طولكمترعكدارد) ‎Po) vita © eae] Oper ae -1 0) ‏دهنده استخراج شدن موفق‎ 1 TAY ‏2 اینجا بررسی کیفی به پایان ‎oe‏ ‎ ‎ ‎

صفحه 10:
0-7 00202 | ا ل ا 9[ ee ee OnE eee rei ‏ا لا ا ا ا ا ا‎ ‏ل ل اك‎ Le) el ‏نظر براى‎

صفحه 11:
‎i 0 Te‏ وجود دارد يعنىلينترونان ‎pad» plail pcr ub L cdna jiiw sly ° ‏ردرولقع با نوسان‌دماعن مونه باعنشکسته‎ ۲ ‏شدزو لتصالوشته هاوياز‎ ‎

صفحه 12:

صفحه 13:
Poel rc pene eae peee ry ‏3>»پرایمرها هستند‎ يرايمرها مولكوكقاى كوجى اغازكرى ‎AAA RNA‏ هستتككة با اتصال به نواحى مشخصى سبب اغاز ثاعم ميشود ۳ ‎Reverse‏ Transcription براى سنتز 0573© از 173ااز يرايمر 001 قاع 8300010 استفاده ميكنيم که به صورت تصادفی به هر جایی از 00 فاكتور مهم بعدى در 061 انزيم رونوشت بردار معکوس یا ۲6۷/675 ‎Amplified‏ ‏و۱0۱۱ 55 577 تقيم 0103© از 103 را ‎sey‏ للد سيم ‎Amplification >, 2 a‏ دارد موارد دیگری که در اين سنتز به کار 5ج ميرود انزيم! ونوكليوتيدها . انزيم ‎Core‏ 0

صفحه 14:

صفحه 15:

جهت مطالعه ادامه متن، فایل را دریافت نمایید.
14,000 تومان