اهمیت سرطان

صفحه 1:
QC tumor markers Dr .mehrdad vanaki Consultant of quality assurance & QMS in med labs 

صفحه 2:
درصد مرگو میر ها در لمریکا ناشی‌از کانسر لستسیر مرگو میر ناشی25 ۰ از کانسر هوچکین‌ورحم و دهانه رحم و معده به طور چشمگیر کاهش يافته ولودر عرضسير مركو مير ناشىاز كانسر لنفوم غير وجكينو کانسر ریه و مائوم و مولتیپل‌میلوما به میزلن 19 درصد رشد دلشته لست تشخیص زود رس و درمان موثرتر همراه با پیشگیری به میزان قابل توجهی ۰ مرگ و مير ناشی از کانسر را کاهش می دهد تعریف ساده کانسر: رشد نسبتا خود مختار بافت ۰ کارسینوژن: عاملی که باعث رشد سرطان می گردد که فیزیکی (اشعه ایکس) ۰ يا شيميايى ( بلى سيكليك هيدروكرين- بنزن) يا بيولوزيك ( نوعى ویروس) مى باشد و أز طريق تغييرات در ژنوم یا افزایش تكثير منجر به بروز سرطان می کردد 

صفحه 3:
TUMOR MARKERS 9 Oket we they? * Ore substoaves usu) proteias, thot are produced by the body it espouse to cover youth or by the cower tissue itsel® ood vertoit beige (amorcurervus) poadiias ° Detected to higher frac corced aounis te the blood, urice, or body tues ۰ Gowe tuwer workers ure speviic Por poe ype oP coder, white vers ure sero in severd power iypes * Oessurewerds ow be webu — wheo used doy Luis x-rays, or vier tests tu the detevivd ocd digests DP sows pes DP power 

صفحه 4:
TUMOR MARKERS * Measurements of tumor marker levels alone are not sufficient to diagnose cancer for the following reasons: — Tumor marker levels can be elevated in people with benign conditions — Tumor marker levels are not elevated in every person with cancer - especially in early stages of the disease — Many tumor markers are not specific to a particular type of cancer ‏سنجش تومور مارکر ها به تنهائی در تشخیص کانسر به دلایل ذیل کافی نمی باشد‎ : 1- ‏سطح تومور مارکر در ولکنش‌هوژهابی‌و خوش‌خیم نیز افزایش میب اید‎ 2- ‏سطح بسيارىئاز تومور ماركر ها در مراحلابتدائيو اوليه كانسر لفزايش: موي ابد‎ ‏کت تیوه تومور مارکر فاقد اختصاصیتیا ویژگیک افیی رلوی کنوع کانسر خاص‌می-3‎ 

صفحه 5:
A good tumor maker should have those properties: * 1. A tumor marker should be present in or produced by tumor itself. + 2. A tumor marker should not be present in healthy tissues. + 3, Plasma level of a tumor marker should be at a minimum level in healthy subjects and in benign conditions. ویژگی های یک تومور مارکر خوب در آزمایشگاه بالینی یکتومور مارکر خوبب‌ایستی‌از منبم. خود تومور ترشح و تولید گردد -1 یکتومور مارکر خوب: بایستی‌از لعضای‌سال, بدن‌ترشم شود -2 سطح غظتپ اهماییی کت ومور مارکر خوبب ایستی‌در وضعیتسامتو -3 شرلیط اسلهابی‌خوش‌خیم در حداقل‌میزان‌خود باشد 

صفحه 6:
4. A tumor marker should be specific for a tissue, it should have different immunological properties when it is synthesized in other tissues. 5. Plasma level of the tumor marker should be in proportion to the both size of tumor and activity of tumor. 6. Half life of a tumor should not be very long ‏یکتومور مارکر خوبب-ایستییراو ی کب افتاختصاصوی اشد و به رلحتی4‎ به روشهاوايمونولوزيكقابلشناسايىو تمايزاز ساير بافتها باشد سطح غظتپ اشمایییکتومور مارکر خوبب ایستی‌توانایی‌تمایز میزان-5 فعاإيتو سايز تومور را دلشته باشد نيمه عمر يكتتومور ماركر خوبنبايستىخيلىطولانوياشد -6 

صفحه 7:
* 7. Atumor marker should be present in plasma at a detectable level, eventhough tumor size is very small یکتومور مارکر خوبب ایستی‌در شرلیطی‌سایز یک 7 تومور بسیار کوچکو در مرلحل‌اولیه باشد در یک سطح غلظتق ابلشناسايىدر بلاسما قابلشناسايوياشد 

صفحه 8:
Potential uses of tumor Screening in genera bKRIMStion Differential diagnosis of symptomatic patients Clinical staging of cancer Estimating tumor volume As a prognostic indicator for disease progression Evaluating the success of treatment ‏کاربرد های بالقوه تومور مارکر ها‎ 1 ‏غربا لگری‌جامعه-‎ 2 ‏تشخيص افتر لقو يمار ان علامتدار-‎ اندیکاتور تعیین‌پروگنوز و مراحلپ یشرفتب یماروو تومور-5 ارزيابىموفقيتدرمان: 6 

صفحه 9:
* Detecting the recurrence of cancer + Monitoring reponse to therapy + Radioimmunolocalization of tumor masses ‏شناسایی عود کانسر‎ ‏مانیتورینگ و کنترل روند پاسخ به درمان‎ ‏تعیین رادیوایمونولوژیک موضع توده های تومور‎ 

صفحه 10:
+ In order to use a tumor marker for screening in the presence of cancer in asymptomatic individuals in general population, the marker should be produced by tumor cells and not be present in healthy people. * However, most tumor markers are present in normal, benign and cancer tissues and are not spesific enough to be used for screening cancer. به جهت کاربرد یک تومور مارکر با هدف غربالگری خصوصا در افراد بدون علامت و عموم جامعه الزاما اين مارکر نبایستی در افراد سالم حضور داشته باشد و بایستی .صرفا ازسلو های تومورال بایستی ترشح گردد در هر حال واقعیت فعلی این است که اکثر تومور مارکر های فعلی در شرایط نرمال در افراد سالم حضور دارند خصوصا در شرایط بافت های خوش خیم لذا از ویژگی کافی جهت کاربرد به عنوان یک تست غربالگری برخوردار نمی باشند 

صفحه 11:
+ Few markers are specific for a single individual tumor, most are found with different tumors of the same tissue type. * They are present in higher quantities in blood from cancer patients than in blood from both healthy subjects and patients with benign diseases. ندرتا برخی از مارکر ها برای یک تومور منفرد اختصاصی ۰ بوده ولی غالب تومور مارکر ها در تومور های مختلف به طور اشتراکی یافت می شوند و وفاقد ویژگی برای یک نوع تومور می باشند 

صفحه 12:
* Some tumor markers have a plasma level in proportion to the size of tumor while some tumor markers have a plasma level in proportion to the activity of tumor. * The clinical staging of cancer is aidded by quantitiation of the marker. 

صفحه 13:
* Serum level of marker reflects tumor burden. * The level of the marker at the time of diagnosis may be used as a prognostic indicator for disease progression and patient survival. * After successful initial treatment, such as surgery, the marker value should decrease. The rate of the decrease can be predicted by using the half life of the marker. 

صفحه 14:
* The magnitude of marker reduction may reflect the degree of success of the treatment. * In the case of recurrence of cancer, marker increases again. * Most tumor marker values correlate with the effectiveness of treatment. 

صفحه 15:
(ua ‏وت لول‎ wurker © Dhe qudiy shoud be tacked 

صفحه 16:
7 و ی رال ها زور اجه ون ۰ موه توا ‎Cptockewistry,‏ — صجها ول ۰ —‘Wistockhewistry, Oviosul usuys ۰ Te body Pluck —Obod, wice, CGP, ‏الا یه‎ 

صفحه 17:
مر ۱ * Ovwebud watbody (Dob) - ‏سین‎ ‎— wess production ° Gaedwick tevkoique = Dobe + ‏اس سس‎ - 10001929 + ‏م۲۱‎ 

صفحه 18:
۰ ‏وتات هد ارو وی‎ tw Obs ۰ /(۲ Piste boud voto a sold support (tubes or wells...) ۰ The seood, voboudd up toiroduciios toiy the way ‏سور‎ the siqcd (raver? rediocucide, eszpsve, 

صفحه 19:


صفحه 20:
2| warker ia Ourvloyp الل جاه 5 ‎٠١‏ ‏و۳۳ ۰ 

صفحه 21:
Goreeruicry apo, workers a keotted role Por tuccor ‎Phy SUYEPUKT],‏ مسا او ‎"Speke ‏سح‎ ‎— hack oP spec Paty ond reliiog to tucor size seppropricte Por the detection oP ‏یت‎ tsi racer 4a sowe cases, tor warkers cod be equal ty vtker ‏وی و اوه حور‎ ‎- ۳806 & prostie cower ‏این‎ 

صفحه 22:
) مر له امه حول توا ها ام صا و۳ ۰ ال مه رل امه موه راو و ea -®CC & kepuowa جه خم عووى؟ ‎the‏ ارت و با ماو ‎Gowettwes‏ ‎-OGE & GCLO‏ 

صفحه 23:
Grog ٠ Whe tuwoor workers und wediod ‏صصه رمرم‎ vowpleweutary ia the pre-therapeuiic ord post- therapeutic stacey 

صفحه 24:
Prowqusts ٠ The pretherapeuto level oP ‏عصصك! تسوج‎ توا - ‎thot itis todepeudeut or vier‏ جا عاط ]امن دصرو ‎ )1(‏ * ‎the patholo‏ عبوخا جعرواصو"ا جادودو لصم أديجير 

صفحه 25:
۰ ‏و۲ نجل یطاق‎ therupeulic sirup by ‏صن حدس وو ساود‎ wis ek oP Palure respowe fo freaked 9 Ths property ts vw oP the wupr uspevis ve porred use oF the tuwor worker - CE® 8 ‏یی موام‎ - 00919-9 6 ‏سس سم‎ - 0۷۳0۵ 3010 6 ‏عحمم ور رس‎ vel ‏وی‎ 

صفحه 26:
Ouricy treukvedt Wich workers level bePore treeukoedt yeurraly — Oot cdl) correlate very well wits the therapeutic result butane sowetitoes ‏وه‎ to this result ict Dhe assay woot be tobiag ito accu the gorker ‏وم اه له امه بل مار ام‎ ‏وم و۳‎ 

صفحه 27:
كك الاصااد صب واس 12) ۰ ‏ناسون‎ to a udtuable wed ued bead 17 ‏لیوا‎ or wetustasis تاونس — wok ewer ‏تنج رال ناوات وا‎ De protoccl oF the Pollow-up wust be very strict - 000095-92 wesswed every 9 ke Por 0 peor ved theo every © wouthks to brevet له مت ها 

صفحه 28:
Diagnosis or monitoring * Measuring patients’ levels of AFP, CA 19-9, CEA, Free PSA, and Total PSA are clinically useful in the monitoring of cancers 

صفحه 29:
* Carte bru proets - ۰ ‏رنه راون‎ - CEB - C@ICS * Ooch ‏ام موی‎ - 00084 - 0 - 0006-0 - 8 - 6CC — TS ۰ ‏مور‎ ‎— DRO -oPr ٠ COML ٠ ۵۵ 

صفحه 30:
Tumor marker carcino- associated - proteins 

صفحه 31:
Prostate Specific Antigen (PSA) The clinical use of PAP has been replaced by PSA. PSA is much more specific for screening or for detection early cancer. It is found in mainly prostatic tissue. PSA exists in two major forms in blood circulation. The majority of PSA is complexed with some proteins. A minor component of PSA is free. 

صفحه 32:
PSA tumor marker سرطان پروستات رتبه اول در مردان را دارا است و تشخیص ان با تومور مارکر 5/۸ زود هنگام اهمیت ویژه ای دارد با اسکرین و تشخیص اولیه کانسر پروستات با یک درمان رادیکال پروستاتکتومی می توان به یک درمان نسبتا قطعی رسيد و اميد به زندكى در اين كانسر حدود 000 سال مى . باشد 

صفحه 33:
PSA, continued... * Regulation and Physiology: — There are 2 major forms of PSA that are found circulating in the blood: ۰۳۵ ‏هک«‎ ‎— Complexed to a,-antichymotrypsin or a,-macroglobulin. — The detection of total PSA has been used in screening for and in monitoring of prostate cancer —The measurement of free PSA can help to differentiate levels of PSA that are in the rey zone: i.e. not high enough to iagnose cancer prostate, but not low enough to rule out the diagnosis of cancer prostate: Patient with cancer Bate have a lower % of free 

صفحه 34:
* PSA testing itself is not effective in detecting early prostate cancer. * Other prostatic diseases, urinary bladder cateterization and digital rectal examination may lead an increased PSA level in serum. * The ratio between free and total PSA is an reliable marker for differentiation of prostatic cancer from benign prostatic hyperplasia. 

صفحه 35:
* The use of PSA should be together with digital rectal examination and followed by transrectal ultrasonography for an accurate diagnosis of cancer. ٠ Serum level of PSA was found to be correlated with clinical stage, grade and metastasis 

صفحه 36:
* The greatest clinical use of PSA is in the monitoring of treatment. * This treatment includes radical prostatectomy, radiation therapy and antiandrogen therapy. * The PSA level should fall below the detection limit. * This may require 2-3 weeks. If it is still at a high level after 2-3 weeks, it must me assumed that residual tumor is present. 

صفحه 37:
۸ نیمه عمر آنتی ژن اختصاصی پروستات افزايش فیزیولوژیک و کاذب نیمه عمرنسبتا بالا آنتی ژن اختصاصی پروستات ( حدود 000 الی 900 ساعت) منجر به افزايش فيزيولوزيك و كاذب اين ماركر بس از اعمال ت اح لظظيز توشه زكنال و معاينه بروستاك و عل جراحى بروستاتكتومى يا سونوكرافى يا بیوپسی از طریق رکتوم مى كردد لذا به مدت © هفته زمان نياز است تا سطح افزايش يافته آنتی ژن اختصاصی پروستات به سطح واقعی خود بازگردد احتباس ادراری حاد نیز منجر به افزایش کاذب اين تومور مارکر مى خردد معاينه انگشتی پروستات از طریق رکتوم در برخی افراد تا دو برایر افزایش کاذب حاصل می نماید و در گروهی افراد هیچ .تغییری حاصل نمی نماید 

صفحه 38:
کایبرد بلینی۳5۸۵ در غربلاكرىكانسر بروستات آنتی ژن اختصاصی ‎heed‏ ع ه برغربالكرى كانسر پروستات در مرحله بندی( استیجینگ) و پایش درمان و عود سرطان کاربرد جدی دارد : تشخیص زود رس کانسر پروستات با توجه به اينكه بزركى خوش خيم بروستات و كانسر پروستات از مشکلات شایع در مردان بالای 900 سال می باشد اسکرین سالانه یک بار به طور جدی توصیه می گردد. محدوده 6 الی ©0 اين ماركر تا حدود ن تفع بزرگی خوش خیم پروستات مى باشد ولي نفي نمی بآشد ( خصوصا در مراحل ابتدایی) لذا آزمایشات ‎ae nat Sar dae‏ آزاد و توتال و نسبت مربوطه به همراه بیوپسی و اقدامات ب پنی و تصوير برداری تکمیل کننده حلقه تشخیص نهایی می باشد 

صفحه 39:
رفرانس رنج انتی ژن اختصاصی برای بهبود توانایی آنتی ژن اختصاصی پروستات یک رویکرد اصلاح رفرانس رنج( با واحد میکروگرم در لیتر) مطابق سن می باشد بر اساس رفرانس تیتز 9006 سال: 6.000 49-40 سال 6.6.40 59-50 سال 6.0 69-60 سال 6.0.0 79-70 در این رویکرد با پایین اوردن حد فوقانی رفرانس رنج در افراد جوانتر تعداد . کانسر پروستات بیشتری در سنین میانسالی کشف و درمان قطعی می گردد 

صفحه 40:
تقسیم غلظت 5 ‎cP Ay Slory So's,‏ اندازه گیری شده با سونو رکتال کاربرد در بیمارانی است که سطح غلظت ‎coll‏ 0 ( محدوده خاکستری تش تشخیص کانسر ) دارند اگر در اين گروه افراد معاینه فیزیکی رکتال برای پزرگی پروستات منفی باشد و و مارکر تراکم پروستات بالا باشد مجموعا به نفع کانسر اولیه پروستات می باشد و پیگیری مداوم سطح غلظت آنتی .ژن پروستات و بیوپسی ضرورت دارد افزایش جهشی ( متناسب با زمان ) آنتی ژن اختصاصی پروستات نيز مارکر تشخیصی مناسبی برای کانسر اولیه می باشد 

صفحه 41:
آنتی رن ختصاصیب روستاتمترشحه از ملیع نوک بستان ریب تی زوا خن ۱ تاتفا منشا غير این مارکربه عنوآن یک ‎ge ie‏ در ترشحات پستان زنان مبتلا به کانسر پستان بالاتر از زنان نرمال می باشد اين تومور. مارکر در پستان با مثبت بودن گیرنده استروژن و پروژسترون رابطه دارد و به طور قابل توجهی با مقاوت به درمان کانسر پستان ( تاموکسیفن) رابطه دارد 5۸ با منشاغیر پروستاتی عمدتا در بافت های تنظیم کننده هورمونی میباشند که می تواند با اندروژن و پروژستین ها و گلوکورتیکویید ها فعال گردد 

صفحه 42:
در مرحله ب‌ندوهلستیجینگک انسر پرهستات بالا بودن غلظت مارکر و روند افزایش مکرر ماکر نشانه پیشرفته ‎٠‏ ‏بودن بیماری کانسر پروستات می باشد ولی برای استیجینگ مارکر آنتی ژن اختصاصی پروستات نمی تواند کمک کننده باشد و نیاز به تست های تکمیلی بیوپسی و تصوير برداری می باشد آنتی ژن اختصاصی پروستات در کانسر غیر متاستاتیک محدود به پروستات ‎٠‏ ‏حداکثر تا عدد 0200 بالا می رود و ندرتا بالای این عدد مشاهده می گردد لذا اعداد بالای 200 در تشخیص متاستاز کانسر پروستات کمک کننده می باشد ( ولی نه با تطعیت) و یا اعداد کمتر از ‎OD‏ کمتر با متاستاز استخوانی همراه . می باشند این موضوع اهمیت گزاش دهی و خطی بودن و صحه گذاری اعداد بسیار بالای ۰ . این مارکردر آزمایشگاه ها را نشان می دهد 

صفحه 43:
کایبرد بلینی85۸۵ در پلیشدیمانک انسر پروستات در پروستاتکتومی رادیکال تمام بافت پروستات برداشت می گردد لذا سطح انتی ژن ۰ اختصاصی پروستات بایستی غیر قابل تشخیص و زير حد تشخیصی کیت باشد . برای اين اندازه گیری به دلیل نیمه عمر بالای این مارکر حداقا 6 الی 0 هفته برای یک اندازه گیری سرمی بایستی فاصله بدهیم و سپس موفقیت درمان را از طریق این مارکر ارزیابی و پایش نماییم و ترجیحا آزمایشگاه جهت پایش درمان کانسر پروستات از کیت های سنجش فوق حساس ( 00.006 الی 00.0000) آنتی ژن اختصاصی پروستات با سطح حساسيت بسيار بالا استفاده نمايد تا بتوان توسانات جزیی و حداقل را نیزشناسایی و رد یابی نمود . پس از رادیکال پروستاتکتومی 000 درصد مارکر به زیر 0.06 می رسد و 00 درصد موارد به زیر 00.000) می رسد که با روش های رایچ روتین غیر قابل سنجش می باشد و در زمان عود بیماری با روش های رایج تا زمانی که . غلظت به بالای ).0) نرسد متوجه تغییرات در بیمار نمی شویم کیت های فوق حساس جهت اندازه گیری سطح آنتی ژن اختصاصی پروستات در خانم ۰ ها نیز کاربرد دارد چرا که به طور طبیعی غلظت این مارکر در زنان کمتر از 00.06 . می باشد . این مارکر در زنان در طول بارداری و کلسر پستان افزایش می رابد 

صفحه 44:
در پلیشدیمانک انسر پسروستات بالا بودن این مارکر سه هفته پس از رادیکال پروستاتکتومی نشانه این است که بقایای ۰ غده پروستات بدرستی تخلیه نگردیده است مارکر انتی ژن اختصاصی پروستات تا یک سال پس از جراحی هر سه ماه یکبار و در ۰ سال دوم هر چهار ماه یکبار و در سال دوم به بعد هر شش ماه یکبار بایستی چک شود به صلاح پزشک و بیمار می باشد که برای مانیتور دقیق اين مارکر بهتر است در یک ‎٠‏ ‏مرکز آزمایشگاهی معتبر با یک متد معتبر در طول زمان چک شود تا شامل نوسانات .بین آزمایشگاهی و متد ها نگردد 

صفحه 45:
کایبرد بلینی۳5۸ در لشعه (پرتو) دیملنی‌ک انسر پرهستات قاعدتا پس از اشعه دریمانی انتظار کاهش تدریجی مارکر را ۰ داریم ولی نقش و کاربرد آن به اندازه پایش درمان پس از رادیکال پروستاتکتومی نمی باشد 

صفحه 46:
* tumor marker HORMONES * Calcitonin * Calcitonin is a hormone which decreases blood calcium concentration in response to hypercalcimia + Its elevated level is usually associated with medullary thyroid cancer. * Calcitonin levels appear to correlate with tumor volume and metastasis. * Calcitonin is also useful for monitoring treatment and detecting the recurrence of cancer. 

صفحه 47:
* However calcitonin levels are also at a high levels in some patients with cancer of lung, breast, kidney, liver and in nonmalignant conditions such as pulmonary diseases, pancreatitis, Paget’s disease, hyperparathyroidism, myeloproliferative disordes and pregnancy. 

صفحه 48:
BHCG tumor marker. ۱ افزایش تیتر گنادوتروپین جفتی در بارداری و بیماری های تروفوبلاستیک ( مول و کوریوکارسینوما و..) و تومور های جرم سل ( سلول زایا) بیضه دیده می شود و یک شاخص تومور مارکر مفید برای تومور های تروفوبلاستیک و تومور هأی بیضه می باشد گنادوتروپین جفتي یک هورمون گلیگوپروتینی است که از سلول سن سیتوتروفوبلاستیک جفت ترشح می گردد و دارای دو زنجیره الفا مشترک با با سایر هورمون های هیپوفیز قدامی ) و زنجیره اختصاصی بتا می باشد رفرانس رنج در آقا و خانم كمتر از 6 واحد بين المللى در لیتر است در اوایل حاملگی زیرواحد بتا آزاد همراه با ملکول کامل تولید می شود و در آواخر بارداری زیر واحد آلفا آزاد غلبه می یاید و در کانسر های تروفوبلاستیک و سلول زایا زیر واحد بتا آزاد و ملکول .کامل تولید می گردد 

صفحه 49:
BHCG tumor marker هورمون كنادوتروبين توتال در (0(0)تزنند لسر های تروفوبلاستیک ‎oe‏ ‏مقادیر بسیار بالا در حد بالای 0006000000 واحد در لیتر خواهد بود و در 20" درصد تومور های جرم سل غیر سمینوم بیضه مردان ( با فرآوانی کمتر در تومور سمینو اع ل لايق فل مع من دلا[ ۳[ با کاربرد مشترک با هورمون الفا فتو يروتين بيشترين فايده و كاربرد كنادوتروبين جفتى در بايش درمان و بررسى روند بيشرفت تومور ‎Rus. ee aa A‏ .جرا كه غلظت آن با حجم و سايز تومور متناسب است . بیماری که سطح اولیه و قبل از درمان گنادو تروپین جفتی او بالای 0 انت احتمال خطر شکست درمان بالاتر است يس از جراحی تومور های تروفوبلاستیک با نیمه عمر 1 الی 00 ساعته هورمون انتظار می رود گنادو تروپین در هفته های اول افت محسوس نماید و بايدارى غلظت . هورمون نشانه بافی ماندن بقایای جفتی تومور می باشد در طول شیمی درمانی اندازه گیری هفتگی گنادوتروپین توصیه می گردد و پس از بهبوده کامل سالانه یکبار توصیه می گردد 

صفحه 50:
BHCG tumor marker assay method HCG total method دراین روش ایمونومتریک واحد های آزیاد بتا و آلفا اندازه گیری نمی شود و صرفا واحد های کامل ملکول توسط دو آنتی بادی ضد آلفا و بتا سنجیده می شود ‎BHCG method‏ در اين روش ملکول های کامل و دست نخورده بعلاوه زنجیره های آزاد بتا اندازیه گیری می شوند و نوع آنتی بادی از نوع منوکلونال بر علیه بتا ساب یونیت می باشد اين روش به عنوان ارزیابی تومور مارکر ارجحیت دارد و دلیل واضح ان افزایش ترشح زنجیره بتا آزاد در تومور های تروفوبلاستیک می باشد 

صفحه 51:
CARBOHYDRATE MARKERS + These markers either are antigens on the tumor cell surface or are secreted by tumor cells. * They are high-molecular weight mucins or blood group antigens. Monoclonal antibodies have been developed against these antigens. Most reliable markers in this group are CA 15-3, CA 125 and CA19-9. ٠ ‏تومور مارکر های کربوهیدراتی( عمدتا موسین با وزن ملکولی بالا)‎ ‏عمدتا آنتی ژن هایی هستند که بر روی سطح سلول های تومورال‎ ‏دیده می شوند و با توجه به اینکه از خود سلول تومورال ترشح‎ ‏می شوند نسبت به تومور مارکر های پروتئینی و هورمون‎ ‏ها اختصاصی تر جهت تومور ها می باشند‎ 

صفحه 52:
CA 15-3 CA 15-3 is a marker for breast carcinoma. Elevated CA 15-3 levels are also found in patients with pancreatic, lung, ovarian, colorectal and liver cancer and in some benign breast and liver diseases. It is not useful for diagnosis. It is most useful for monitoring therapy. ‏اين تومور مارکر مفید ترین شاخص برای کانسر پستان هست که قطعا برای تشخیص‎ ‏اوليه مفيد نبوده( به دو دليل 0- غير اختصاصی بودن تومور مارکر و مثبت شدن اين‎ ‏تومور مارکر در بسیاری از واکنش های خوش خیم و التهابی کیست و تومور های‎ ‏خوش خیم تخمدان - ضایعات التهابی و فییروکیستیک خوش خیم پستان - هپاتیت مزمن‎ ‏سیروز کبدی - هیپو تیروئیدی و..2.- افزایش بسیار جزئی تومور مارکر در مراحل‎ — ‏تشخیص اولیه کانسر پستان ) و بیشترین کاربرد بالینی آن در مانیتورینگ درمان‎ ‏.کانسر پستان می باشد‎ 

صفحه 53:
CA 15-3 افزایش متناقض این تومور مارکر در شروع درمان کانسر پستان نشانه پاسخ به درمان و لیز تومور و آزاد سازی اين مارکر با غلظت بالا مى باشد افزايش 9۵6 تومور مارکر در بیمار مبتلا به کانسر سینه در حال درمان نشانه خوبی بر عود کانسر ( خصوصا در بافت احشایی و ‎CA 27-29‏ در استیج دوم و سوم کانسر پستان کاربرد دارد و به لحاظ بالینی هم ارزش تومور مارکرپانزده - سه می باشد ‎CA 549‏ از تومور مارکر های مفید در کانسر پستان در فاز درمان 

صفحه 54:
۰06۸۵ 5 * Although CA 125 is a marker for ovarian and endometrial carcinomas, it is not specific. * CA 125 elevates in pancreatic, lung, breast, colorectal and gastrointestinal cancer, and in benign conditions such as cirrhosis, hepatitis, endometriosis, pericarditis and early pregnancy. * It is useful in detecting residual disease in cancer patients following initial therapy. 

صفحه 55:
۰ 08 19-9 * CA 19-9 is a marker for both colorectal and pancreatic carcinoma. * However elevated levels were seen in patients with hepatobiliary, gastric, hepatocellular and breast cancer and in benign conditions such as pancreatitis and benign gastrointestinal diseases. * CA 19-9 levels correlate with pancreatic cancer staging. It is useful in monitoring pancreatic and colorectal cancer. 

صفحه 56:
PROTEIN MARKERS * Most reliable markers in this group are + B,-microglobulin, * ferritin, * thyroglobulin * immunoglobulin. + B,-microglobulin ٠ B,-microglobulin is a marker for multiple myeloma, Hodgkin lymphoma. + It also increases in chronic inflammation and viral hepatitis. 

صفحه 57:
¢ Ferritin * Ferritin is a marker for Hodgkin lymphoma, leukemia, liver, lung and breast cancer. * Thyroglobulin * It is a useful marker for detection of differentiated thyroid cancer. 

صفحه 58:
ه« * Monoclonal immunoglobulin has been used as marker for multiple myeloma for more than 100 years. * Monoclonal paraproteins appear as sharp bands in the globulin area of the serum protein electrophoresis. * Bence-Jones protein is a free monoclonal immunoglobulin light chain in the urine and it is a reliable marker for multiple myeloma. 

صفحه 59:
Monoclonal gammopathy Albumin decreased Sharp peak in gamma region Albumin «a, Oy B y 

صفحه 60:
GENETIC CHANGES Four classes of genes are implicated in development of cancer: 1) protooncogenes which are responsible for normal cell growth and differentiation 2) tumor suppressor genes which are involved in recognition and repair of damaged DNA. 3)apoptosis-related genes are responsible for regulation of apoptosis 4)DNA repair genes Alterations on these genes may lead tumor development. 

صفحه 61:
* Susceptible protooncogenes: *K-ras, N-ras mutations are found to be correlated acute myeloid leukemia, neuroblastoma 

صفحه 62:
Her-2/neu * It isa PrOtO-ONCOGENE that upon: — Mutation (especially point mutation) or — Altered (over) expression will encode an Epidermal Factor Receptor (EGF-R) that mediate tumorigenesis (i.e. It is an activation mutation) + Marker for breast and ovarian cancers * Application: It is now routinely measured in breast cancer to determine the type of therapy: — Breast cancer positive for Her-2/neu is responsive to treatment (Herceptin) — Breast cancer negative for Her-2/neu is NOT responsive to treatment 

صفحه 63:
Susceptible DNA repair ٠ 21 ‏دم برد‎ are specific genes in inherited predisposition for developing breast and over cancer, and mutations on these genes are newly measured in some laboratories. * Mismatch-repair genes are mutated in some colon cancers 

صفحه 64:
Chromosomal translocation * c-myc gene has been found to be translocated from 8.chromosom to 14. chromosom and than become activated in Burkitt’s lymphoma. * myc gene encodes a DNA-binding protein which stimulates cell dividing. 

صفحه 65:
* In chronic myeloid leukemia, there is a translocation between chramnacamec Q and 99 ber- abl 8: 0 Philadelphia ‏ین‎ ae kromozomu Kromozom 9 e-abl Uzamis kromozom 9 

صفحه 66:


صفحه 67:
Pre-analytical quality © Reporacn of RAMEE INGE Souk to ome fel) to couse uodue drew ty potiects thor is the cose Por “he habordtory «vet therePore exercise extra vighrase tr ecurtan trot carrer results are reported, 9 Grr to the pre-codyicd phase reported pour tea tives us Ded us to he ‏عم لین‎ the woprip oP pre-ondyicd errors Por tor workers will be ‏اه‎ spevkors hurdky errors — 2.x. rappropriste ‏اراس له بت‎ متا وی تست امس تست سل او تا لت یزرو ولا لو نت حول روا تمه وا ‎vooerewe should‏ weeess wed too ePPevive audi poke. ۰ 

صفحه 68:
Serum or plasma are usually (but not always) equally appropriate. Gel tubes may not be suitable for some assays. Anti-coagulating agents such as ethylene- diamine tetraacetic acid (EDTA) may interfere in some detection methods. The stability of total and free PSA under different storage conditions is especially critical ith the kit. Requirements should be checked in the product information supplied Itis the laboratory's responsibility to provide clear advice about the appropriate tube type for each test, thereby ensuring that manufacturers’ instructions are always followed. Tumor markers are generally stable, but serum or plasma should be separated from the clot and stored at 4°C (short- ‎AI ne Sea‏ جو سمه رساي ددس صو در ‎ ‎Specimen ‎stability ‎ 

صفحه 69:
۴ ۳ ۵ 6۵ 8 ۲ ۲ ۹ ۵ ۲ 2۷2۵ 6 ri eee ee eee ee ‏ع‎ Requirements ‏راید یتست را‎ Comments / specific eT oy Test selection Ordering of tumor marker NACB recommendations for use of tests should be according to tumor markers in routine cin practice are summarized in Table 1, Ee Ea ١ routinely in females. national and international —_ 125 should never be measured guidelines. routinely in males. Although in certain A15.3 should only be measured circumstances tumor markers _ routinely in males with an may aid in diagnosis, established diagnosis of breast speculative measurement of cancer. panels of tumor markers Interpretation of subsequent results is aided (“fishing”) should be by knowledge of the pre-treatment “baseline” level discouraged Specimen timing No strong evidence of diurnal 2 Variation for most markers, so ic bi Hon for most matters 3° any _ Prostatic biopsy, transurethral occ resection of the prostate, or Blood for PSA should be taken traumatic catheterization may fore any clinical manipulation botore ony siniccl manipulation markedly elevate serum PSA faken too soon should be repeated and/or free PSA .repeat of PSA Blood for CA125 should not be. recommended in sampling taken during menstruation, which ‏و باب مس‎ after these events 

صفحه 70:
Analytical quality * ۳ ‏رس 0۱9۵99۵ باقع سل‎ Luis the thacazetic tachustry, whek oxi weet andy reqirewents def ed by ‎fr. DG Pord ent Drea ckorieiraios (PO)‏ واه رو مس و لس ‎(Buropeus Orunrissira ‘ba Orr Oxnrwstos Directive (OO).‏ لو ‏لجل اموت جا ‎prow tra coders or bet weed oppropridel and‏ سود سا رو یه پا وم و رونت الط ‎Tetercat‏ عم ره موم ‎This ts best achieved by‏ سبط اون ۰ موم لمه (100) ات0 ری ‎Testes [(Extercd Quilty Ossesewed (EQO)]‏ ۳۳ ‎propane (1).‏ ‎۰ 

صفحه 71:
Analytical quality Lower woelortay Olle ted) resuls obtdued ta dPPeredt wethods would be Puy toterchoogeubl, dota ‏مس(‎ ®P sckewes vodPirw that this ts ‏مام اون لاو ویو كلابب روهدت ككل امه‎ oP vortiiog ta excess oP OO% sill vbserved Por sowe tor workers .Dupr cases oP observed betweewwethed vartaiva Por these cowplex unites tachide poor ‏,مهن‎ dPPereuves ta the speoPicty of wotbodes used, oad dPPereuves to wetod xeon. 4 shoud be possible to oheve reasvodby stoodardzed aed acurde vulbruica, bul ody Por those umber Por whick u revoquized ‏موه‎ Gtradard (1G) or RePerewe QReuged (ARR) ts bok wokdble oad vaversdly adopted by dearstc wonPucturers Por ‏وان وم‎ oP thet ‏,ابو( ,تلو‎ os pet here ore w 1S Por cay oF the teoportact O© sertes oP tumor workers, ‏لا مب و و‎ shoud be addressed uray. Long-term PT scheme data can also confirm the effect of successful introduction of a new IS. Data from the UK National External Quality Assessment Scheme (UK NEQAS) for PSA, for example, confirm that mean geometric coefficients of variation (which reflect scatter) decreased from 21.9% in 1995, before the 1 IRR was introduced, to 9.5% in 2004 

صفحه 72:
ا ای ی زر و یا ی = ‏جح‎ ‎Requiremen | Recommendations Comments / specific ts Cech ey It is critically important that methods are properly validated prior to their introduction to avoid misleading reports both in routine clinical practice and in the scientific literature. Failure to have done so accounts for some of the past issues with diagnostic tests, particularly for immunohistochemistry and fluorescence in situ hybridization (FISH) testing. Prior to their introduction in routine clinical practice, both immunoassay and immunohistochemical methods must be validated by defined and well-characterized protocol that meet regulatory guidelines (e.g. FDA approval in the United States, CE marking in Europe). Assay validation Well- characteriz ed methods 

صفحه 73:
NACH recommendations. Quality requirements for Assay Validation, Internal Quality Control and Proficiency Testina Requiremen | Recommendations Comments / specific ts examples Internal Quality Control ‎Intra-assay variability Manual and/or research‏ یسم ‎reproducibilit <5%; inter-assay assays may be less ‎y variability <10%. precise but PT data suggests these targets should be readily achievable for most ‎analytes ‎Establishe Limits for assay ۱۵0 data should be d acceptance should be pre- recorded, inspected and objective defined and preferably acted upon (if necessary) criteria for based on logical criteria prior to release of any assay such as those of Westgard clinical results for the ‎acceptanc ‎a run. 

صفحه 74:
NACH recommendations. Quality requirements for Assay Validation, Internal Quality Control and Proficiency Testina Requiremen | Recommendations Comments / specific ts examples Internal Quality Control Appropriate The number of IQC specimens number of _ included per run should allow 10 identification of an unacceptable run with a specimens. Given probability acceptable for the clinical application. Specimens At least one authentic Kit controls may provide closely serum matrix control from an overly optimistic resembling an independent source authentic should be included in 1 patient sera addition to any QC Remormmance [panisulany, 1 04 if they are prepared by materials provided by the 3 method ‏ل‎ adding standard to an artificial matrix. impression of 

صفحه 75:
NACH recommendations. Quality requirements for Assay Validation, Internal Quality Control and Proficiency Testina Requiremen | Recommendations Comments / specific ts examples Internal Quality Control IQc_ Negative and low Where clinical decision 20 ve controls points are commonly of posi om . 6 ployed (e.g. PSA, 4 concentrati Should be included y1g/L; AFP, 5-8 KU/L; hCG, ‎for all tumor 5 U/L), IQC specimens of‏ اه ‎to the markers. The broad these concentrations‏ ‎clinical concentration range should be included.‏ ‎application, Should also be covered and IQC specimens should ideally include a high control to assess the accuracy of dilution. 

صفحه 76:
NACH recommendations. Quality requirements for Assay Validation, Internal Quality Control and Proficiency Testina ‎atid Comments / specific‏ لیتسا ترا رس ‎examples‏ ‏تسد ‎Testing‏ ‎PT Concentrations Distribution of occasional . should assess specimens of high appropriate Performance over the concentration to check analyte working range linearity on dilution and concentrati of specimens containing ‎on analyte-free serum to ‎check baseline security for certain analytes (e.g. AFP, hCG) is desirable. ‎PT PT specimens should PT specimens prepared by specimens ideally be prepared from spiking purified analyte into closely authentic patient sera, serum base pools provide an resemblin which for tumor markers ‎overly optimistic impression ‏ل ا ‎9 may require dilution of 

صفحه 77:
NACH recommendations. Quality requirements for Assay Validation, Internal Quality Control and Proficiency Testina Requiremen | Recommendations Comments / specific ts examples Proficienc y Testing PT Evidence of the stability of Stability in hot climates is specimens PT specimens in transit particularly relevant for hCG that are should be available. and free PSA, but reliable ann data should be available for all tumor MARKER Accurate The validity of the target Accuracy should be assessed by and stable values (u sually consensus '"ecovery experiments with the relevant International target means) should be values demonstrated by assessing ‏و‎ eee el their accuracy, stability and and linearity by issue of linearity on dilution. different dilutions of the same sera in the same serum base pool. Issue of PT specimens containing the IS can also for some analytes elucidate the tant’ to which diflarant 

صفحه 78:
NACB recommendations: Quality requirements for Assay Validation, Internal Quality Control and Proficiency Testing Requiremen | Recommendations Comments / specific ts examples Proficienc y Testing Assessment Qccasional specimens The volume of sera required may of assay should ideally be issued to Pteclude undertaking this for all interferenc : participants, but by distributing such es check for interference specimens to eg 5 users of a (e.g. from heterophi number of different methods and other antibodies, _ valuable information about method ۳ i robustness can be obtained and high dose hooking, subsequently provided to all etc). participants Evaluation — interpretation of the Since immunohistochemistry of pathologist as well as the reports routine include an interpretati technical aspects of the test interpretive comment, the on aswell must be evaluated. accuracy of these should be Seen ate rigorously and independently required for assessed PT of immunohist 

صفحه 79:
NACH recommendations. Quality requirements for Assay Validation, Internal Quality Control and Proficiency Testina ts examples vesting a ‏با«‎ y Testing Interpretati_ Occasional surveys are PT schemes can make a ve desirable to compare powerful contribution to exercises Se : 9 and surveys Practice in difference national audit by laboratories. highlighting differences in reference intervals, reporting practice and interpretation of clinical results, Provision of Incorporating regular updates Surveys of recent literature educational to participants on new can provide a helpful updates to developments relevant to monthly addition to PT all provision of a tumor marker reports. participants service is desirable and can be conveniently done in 

صفحه 80:
‎recommendations: Quality nequirements for‏ اب۱9۸۸ ‎minimizing risk of method-related errors in tumor‏ ‎marlar racultc ‎ ‎Often helpful (eg when measuring PSA or hCG) but differences in recognition of the cross- reacting isoforms are likely to contribute to numerical differences in results. ‎tumor marker concentrations is critically important where the malignancy is potentially fatal but curable, e.g. hCG in choriocarcinoma. ‎Requiremen | Recommendations Comments / specific ts examples ‎Type of ‎interferenc ‎e ‎Cross- Manufacturers should ‎reaction of provide clear ‎closely information about the ‎specificity of their‏ تست ‎methods.‏ ‎Users should be aware of the characteristics of the methods used. ‎High dose Tumor marker ‎hook effect concentrations range over Laboratori several orders of magnitude es should and may exceed the capacity have in of the solid-phase. ‎place Recognition of extremely defined High 

صفحه 81:
NACB recommendations: Quality Requirements for minimizing isk of method-related errors in tumor marker results Requiremen | Recommendations Comments / specific ts examples Falsely high or low results may be obtained for patient specimens containing anti- IgG antibodies capable of reacting with antibodies used in the assay. Such antibodies may be of particularly high titre in patients. who have undergone treatment with mouse monoclonal antibodies for imaging or therapeutic purposes. Serious clinical errors as a result of failure to recognise such interference have been most frequently reported for hCG. A high dearee of suspicion is Laboratories should be aware of the possibility of interference from heterophilic or human anti-mouse antibodies, particularly when results are not in accord with the clinical picture. Where interference is suspected this should be investigated, e.g. by re- assaying the specimen 1. After treatment with commercially available antibody blocking tubes 2. After addition of further immobilized normal, non- immune serum, Protein A or Protein G 3. After precipitation of immunoglobulins with Type of interferenc e Interferenc e from heterop! c or human anti-mouse antibodies (HAMA) 

صفحه 82:
‎recommendations: Quality requirements in the post-‏ اب۱۸ ‎analvtical nhase‏ ‎Requiremen | Recommendations Comments / specific ts rer ly ‎Factual ‎requirement ‎s ‎ ‎Clinical f clinical Such information is essential if informatio information in: ingthe —_any laboratory interpretation is nfrom the Source of the to be made and may help to requesting SUSPected/diagnosed identify occasional laboratory doctor moallanency and the errors (e.g. mis-sampling on an ‎treatment stage (e.g. post- 3 ‎op) should accompany the analyser) ‎specimen. ‎Availability Reference intervals Reference intervals are usually of most relevant for cancer appropriat should be patients pre-treatment, after e appropriately which the patient’s own reference derived using an “baseline” provides the most intervals important reference point for ‎appropriate 5 interpretation of marker results. ‎healthy population. if this is well-established, increases even within the reference interval may be 

صفحه 83:
‎recommendations: Quality requirements in the post-‏ اب۱۸ ‎analvtical nhase‏ ‎Requiremen | Recommendations Comments / specific ts rer ly ‎ ‎ ‎Factual ‎requireme ‎nt ‎Knowledge percentage increase or A confirmed increase or of what decrease that constitutes a decrease of + 25% is ‎constitutes Significant change shouldbe frequently considered to be defined and should take 9 4 ‎ ‎a of clinical significance aoe account of both analytical ae significant ang biological variation. but more worl required in change Laboratories should be this area, the importance of willing and able to advise on Which has recently been tl issue. illustrated for PSA Defined Laboratories should This may necessitate 1 : ‏ييا‎ have a defined analyzing the ۳ protocol when ١ 7 changing changing tumor previous specimen by Te Os a eee ‏لبي‎ the new method or ‎requesting a further specimen to re- establish the 

صفحه 84:
‎recommendations: Quality requirements in the post-‏ اب۱۸ ‎analvtical nhase‏ ‎ ‎Factual ‎requiremen ‎ts ‎Requirement | Recommendations Comments / specific s examples ‎Knowledge Laboratories should be able Half-lives are defined as ‎of tumor to provide calculated tumor the time to 50% ‎Fantier marker half-lives for the f : 3 markers for which these are ‘duction of circulating ‎half-lives relevant (e.g. AFP, hCG). tumor marker ‎concentration following complete removal of tumor tissue. Objective Laboratories should be This remains a ‎audit of involved in on-going priority and is being ‎puma audit of the clinical 0 ‏نا‎ utility of the results considered by a 0 they provide. number of ‎professional ‎organizations. 

صفحه 85:
Requirement | Recommendations 0 ۱ Trolley 5 examples 

صفحه 86:
‎recommendations: Quality requirements in the post-‏ اب۱۸ ‎analvtical nhase‏ ‎Requirements | Recommendations Comments / specific examples ‎Reporting ‎requirement ‎5 ‎Recommendatio Laboratories should An apparent rise in aed be willing to advise = marker concentration frequency of on the frequency of should always be tumor marker monitoring and the confirmed by repeat measurement need for confirmatory measurement. ‎١ specimens. ‎ ‎ ‎Communicat Laboratories should Good communication ion between always welcome and facilitates ‎laboratory encourage good i communication with ‏ای‎ ‎Clinical users of the | these (and other) service. tests. ‎ 

صفحه 87:
REFERENCES 1 Fleisher M, Dnistrian AM, Sturgeon CM, Lamerz R, Wittliff JL. Practice guidelines and recommendations for use of tumor markers in the clinic. Chapter 5 in: Tumor Markers: Physiology, Pathobiology, Technology, and Clinical Applications, eds Diamandis EP, Fritsche HA, Lilja H, Chan DW, Schwartz MK. AACC Press, Washington DC 2002 pp 33-64 2 Hayes DF, Bast R, Desch CE, etal, A tumor marker utlity grading system (TMUGS): a framework to evaluate clinical Utility of tumor markers. J. Nati Cancer Inst. 1996; 88: 66 3 Sturgeon CM. Limitations of assay techniques for tumor markers. Chapter 6 in: Tumor Markers: Physiology, Pathobiology, Technology, and Clinical Applications, eds Diamandis EP, Fritsche HA, Lia H, Chan DW, Schwartz MK. AACC Press, ‘Washington ۵6 2002 pp 65-81. 4 Hammond EH. Quality control and standardization for tumor markers. Chapter 4 in Chapter 6 in: Tumor Markers: Physiology, Pathobiology, Technology, and Clinical Applications, eds Diamandis EP, Fritsche HA, Lila H, Chan DW, Schwartz MK. ‏هم‎ Press, Washington DC 2002 pp 25-32. 5. Price CP, Allard J, Davies G, Dawnay A, Duffy M), France M, etal. Pre-and post-analytical factors that may influence use ‘of serum prostate specific antigen and its isoforms in a screening programme for prostate cancer. Ann Clin Biochem. 2001;38:188- 216 [Accessed May 30", 2005. Available at http:/Anww.leeds.ac.uk/acb/annalsjannals_paf/May01/188.DF } 6. Sturgeon CM. Practice guidelines for tumor marker use inthe clinic. Clin Chem 2002; 48: 1151-1159 ‘Association of Clinical Biochemists in Ireland: Guidelines forthe use of tumor markers. 3”ed. 2008. (Accessed May 7%, 2006. available at ht. winch fefocortmi btn 8 Nonagaki H, FuliS, Konishi, Nanbu Y, Kobayashi F, Mori. Serlal changes of serum CA12S levels during menstrual ‘cycles. Asla Oceania | Obstet Gynaecol 1994;17:369-378 9 Muyldermans M, Cornlie FJ, Koninckx PR. CA125 and endometriosis. Hum Reprod Update 1995;1:173-187 10. Singh R, Cabill D, Popert R, O'Brien TS... Repeating the measurement of prostate-specific antigen in symptomatic men ‘can avold unnecessary prostatic biopsy. BJU Int 2003,92:932-935, aL ‘Sturgeon CM, McAllister E) Analysis of HCG: clinical applications and assay 

صفحه 88:
CONCLUSION * Optimal use of tumor markers requires care and attention to detail in the pre-analytical, analytical and post-analytical phases of analysis, and should be achievable in laboratories fulfilling the quality requirements described here. 

صفحه 89:
| markers LDH ‏اما‎ LDH LDH ‎recommende‏ تیا ‎d ‎ ‎Prostate PSA, cPSA, PSA, cPSA, PSA,cPSA PSA, cPSA ‏هدص ,هكم‎ ‎cancer 9۵۲۳5۸ 9۵۲۳5۸ Colorectal ie bes No tumor CEA CEA CEA in subjects cancer nsublects markers Genetic ed testing in high risk subjects] Liver AFP AFP AFP AFP AFP ‎cancer [In high 

صفحه 90:
Ovarian CA125 CA125 CA125 CA125 CA125 cancer {Only in [Post- combination with TW5forearly Menopausal detection in women. hereditary only] syndromes Breast No tumor No tumor ER) PR, HERS |Notumor CA 15-3, cancer markers meres 2, uPA, ۴۵۱1 ۶ CEA recommende fecommende recommende ‏وم‎ ‎d 8 9 advanced disease] Gastric No tumor No tumor No tumor Notumor No tumor 2 markers markers markers markers markers recommended recommende recommended —recommende _recommende d d d Bladder —_Notumor No tumor No tumor Notumor No tumor markers markers markers markers markers Giese recommended recommende recommended recommende _recommende d d d 

صفحه 91:
Pancreati No tumor CA19-9 CA19-9 No tumor CA19-9 ccancer = Markers [if used, only markers [During recommend with CT or recommend _ palliative _ ed EUS and in ed therapy with an imaging tests appropriate or after clinical potentially context curative surgery] Cervical No tumor cancer markers. recommend ed Thyroid = Notumor Notumor Notumor — Thyroglobuli_ Thyroglobuli cancer markers markers markers n; n; recommend recommend recommend thyroglobulin thyroglobulin ed ed ed antibodies antibodies 

صفحه 92:
PSA & Free PSA * Total PSA can also be used in the early detection of prostate cancer. + And the use of % Free PSA aids in discriminating between prostate cancer and benign disease, thus helping to eliminate unnecessary biopsies. Therefore,it is imperative for manufacturers to provide reliable tumor marker assays which produce consistent laboratory results over time. ارجاع اسلاید به جدول کنترل شماره سریال و پایداری در فایل ضميمه ‏ * 

صفحه 93:
The consistency of ARCHITECT The consist emo K MAKES. markers was previously reported at the 2001 ISOBM meeting which covered manufactured reagent lots over one to two years. This study is an extension of this previous report and reviewed the consistency of tumor marker serum panel values and control values produced in an artificial matrix as reported by the ARCHITECT assays covering manufactured reagent lots over four to five years. 

صفحه 94:
tumor marker Methods * Methods ° Aetercd qualiy pootrol procedures ut Pbboitt Luborutones require the testy oP bots serucv poses an pour’ ‏حاورا ما وت ون و‎ throughout te wow rane. 

صفحه 95:
Serum control & patient ۰ Whe testay oP sero pose’ tides votes expevied wih poiect saps tested to cisicd kuborubries. ۰ Dhe testay oP codrols vokddes reported putest resuls. odie too huwad sero wuirtx. ۰ Dhese poe un cools were tested wih rack waaPactured rexed bt oF BPP, OW 19-9, CE®, Pree PGO, ud Tord PGO over Pour to Pue pews. Deus voles ad % poe Pited oP vartaion were deterwiced Por euck ‏لها‎ oP 

صفحه 96:
Conclusion ° Cowstted resus betwera wanuPuctured lots were dewowstrued Por BROWITECT CPP, CO 10-9, CGO, Pree PCO, aad Tod PGS wsas. * Cocstted perPorwuue over tee dows boborubrices i hove qeder pooPideue to the resus they provide tv ‏موم‎ resuiicy to better choicd devisives ud ‏كص ودام‎ to the couredirdices oP fucoor wurkers to putiecis” Benny is iicdive oP chogges to the puieus’ ‏وه جح‎ wed oot 0 result oP vortobiiy to assay wanPacturtay 

صفحه 97:
طرح کیفیت پیشنهادی بخش ایمونولوژی وهورمون Dr mehrdad vanaki consultant QMS in medical lab 

صفحه 98:
برنامه اجرائی کنترل کیفی داخلی ایمونولوژی و هورمون ‎(A‏ کاربرد روزانه سرم کنترل صحت و دقت در ردیف های کاری پائل هورمون و ایمونولوژی (نظیر کنترل صحت 810۲301 با 56]80) ( حداقل دو سطح از سه سطح ) و رسم منحني وستگارد مر بوطه جهت تست های کمی واصلی ‏) کنترل روزانه موارد غیر طبيعي ( با همان نمونه اول ) در الایزا با روش تائیدی ایمونو آنالایزر ‎Reconfirm of abnormal result of ElISA* method with ELFA ( Vidas) or ECL ‏) تکرار نتایج غير طبيعي با نمونه جدید در موارد عدم همخواني نتایج با شرح حال بیمار و سوابق نتایج قبلي بیمار ‎Rechecked with new sample‏ ‏<) کنترل و تائید نتایج نمونه های بیماران (با نمونه قبلی) : استفاده از نمونه بیماران با نتایج بالا یا پائین به عنوان کنترل بیمار در ردیف کار بعدي با دو هدف کنترل مجدد نتایج قبلی و شناسائی منایع خطا قبل از آنالیز ‎Rechecked with same sample (1‏ 

صفحه 99:
برنامه اجرائی کنترل کیفی داخلی ایمونولوژی و هورمون : نکته مهم ‎٠‏ ‏برای تست های با کاربری زیاد نظیر پانل تیروئید رسم ۰ منحنی کنترل کیفی و رعایت قوانین وستگارد در دو سطح کنترل ضروری است ولی برای تست هائی با کاربرد محدود در بخش هورمون قرار دادن یک یا دو سرم کنترل به همراه یک نمونه بیمار از ران قبلی کار کفایت می کند در اين شرايط بو‌رسی معذ خوائش شذه با تاركث و.محذوده كنترل كفايت دارد و بهتر است عدد خوانده شده حدود “6.) حدود بالا و يائين سرم كنترل قرار كيرد 

صفحه 100:
برنامه اجرائی کنترل کیفی داخلی ایمونولوژی و هورمون :نكته مهم © ‎٠‏ ‏توجه به رفرانس رنج قبل از ورود هر سری اطلاعات * بسیار الزامی و ضروری است 

صفحه 101:
برنامه اجرائی کنترل کیفی داخلی ایمونولوژی و هورمون 9) محاسبه میانگین نتایج بیماران|60۳0۲۲0 ۲6۵۱ ۳۵۱6۳۴ در هر ردیف کاری و محاسبه ضریب تغییرات ماهانه تست ها در ارتباط با برخی تست های با اهمیت و دارای نوسان ازجمله ‎T3 / TSH / Ferritin‏ جهت شناسايي خطاهاي سيستماتيك قبل از آناليز يا حين آناليز ) دلتا چك نتایج هورمون و ايمونولوژي 60661 . 06۱62 : ( مقایسه نتایج فعلی ‎slay‏ با نتایج قبلی و پرونده بیمار با هدف شناساتی خطا های راندوم) ج) کنترل روزانه ارتباط تست ها با یکدیگر . 60۲۳۵۱۵۱0 ‎Check‏ : بررسي ارتباط و همبستگی سطح فریتین سرم با سطح آهن سرم و مرفولوژي گلبولهاي قرمز یا رابطه ۵۱۸ و ۴ و... 

صفحه 102:
برنامه اجرائی کنترل کیفی داخلی ایمونولوژی و هورمون ) نگاهداری پیشگیرانه تجهیزات بخش هورمون و ایمونواسی ‎(Daily & weekly & monthly PM)‏ preventive maintenance ‏نکات کیفی و نگاهداری روزانه الایزا ریدر یا ایمونو آنالایزر یا سایر تجهیزات‎ وابسته به بخش هورمون مطابق جدول نگاه دارنده پیشگیرانه دستگاه ها : تصدیقو صحه گذاری> یت‌ی‌جدید یا روش‌های‌جدید با تجهیزات‌جدید (9 ‎Verification & validation of new method &‏ ‎equipment‏ ‏مقایسه دقت و صحت دو روش آزمایشگاهی برای یک نوع آزمایش یا دو کیت از یک نوع آزمایش به شکلی یک شرکت الزاما معتبر و داری تائیدیه کیفی باشد . انجام يك یا چند تست با نتیجه غیر طبيعي با دو کیت الایزا متفاوت جهت مقایسه میزان خطی بودن وهمبستگی نتایج در اعداد بالا و پائین و بررسی مقایسه ای تکرار پذیری و صحت و حساسیت و ويژگي کیت جدید الایزا با کیت معتبر و مرجع الايزا 

صفحه 103:
چک لیست خود ارزیابی و کنترل بخش هورمون و ایمونولوژی On Bente em ROO a1. Biel sme yn eerie eet rag Sten. eT a) ‏شوند‎ آیا روش های مورد نظرء بر اساس دستورات سازنده کیت ها (تهیه کننده کیتها) تعیین اعتبار (۳8()) می شوند؟ آیا روش های مورد نظرء به وسیله مقایسه با آزمایشگاه رفرانس یا آزمایشگاه مورد اعتماد (طدا عت()) تعیین اعتبار ) می شوند؟ آیا روش های مورد نظر. به وسیله سایر روش ها هم تعیین اعتبار (04()) میشوند؟ آیا تایید اعتبار شامل تعیین حساسیت آنالیتیکال (آزمایش) و اختصاصی بودن روش کار می باشد؟ ‎LT‏ تایید اعتبار شامل تداخل ها میباشد؟ ‏آيا تابيد اعتبار شامل واکنش متقاطع میباشد؟ ‏آيا تاييد اعتبار شامل محدوده تشخيصى مى باشد؟ ‏آيا روش كار با استفاده از مواد قابل رديابى به مواد رفرانس ملى ى بين المللى: كاليبره مى شود؟ (اگر موجود باشند). ‏آيا آزمايشكاه در برنامه هاى ملى يا بين المللى تبادل سرم شركت دارد؟ (نمونه هاى بيماران) 

صفحه 104:
چک لیست خود ارزیابی و کنترل بخش هورمون و ایمونولوژی اه قابل اعتمادی برای همکار شناسایی و تعیین شده است: آيا نتايج بيجيده و یا مبهم. به آزمایشگاه قابل اعتماد دیگری ارسال میشود؟ آیا کنترل داخلی. برای بررسی دقت و صحت (درست بودن) نتایج انجام می شود؟ آیا مواد کنترل. در تمام سری های کاری (000)) گذاشته می شود؟ آیا کنترلهای مثبت و منفی. برای تستهای کیفی. (که نیاز به تعیین غلظت یا تیتر ندارند) به کار می روند؟ آیا غلظت یا تیتر کنترل مثبت به کار رفته. در حد قابل قبول برای روش کار مورد نظر می باشد؟ آيا نمونه ها يس از دريافت. فوراً آزمايش مى شوند؟ يا در -2000*0*70 , «نگهداری می شوند؟ ‎LT‏ حل كردن. نكهدارى و استفاده از مواد ليوفيليزه. شرح داده شده است؟ ‏آيا روش كار. احتياج به غير فعال كردن كميلمان در نمونه بيمار دارد؟ 

صفحه 105:
چک لیست خود ارزیابی و کنترل بخش هورمون و ایمونولوژی جه حرارت. تابت نگه داشته میشودا اكر آزمايش به روش نفلومترى انجام ميكيرد آيا تمامی محلول هاى رقيق کننده برای خارج کردن ذرات اضافی موجود. صاف می شوند؟ اکر آزمایش به روش نفلومتری انجام می گیرد آابرای تمامی تست ها و سرم های وفرانس. بلانک گذاشته میشود؟ ايش به روش هماكلو تيناسيون انجام مى كيرد آبا احتياطهاى لازم. براى جلو كيرى از تداخل آنتى بادی های هتروفیل نجام میشود؟ اكر آزمايش به روش هماكلوتيناسيون انجام مى كيرد آيا سوسيانسيون كلبول هاى قرمز. استاندارد شده است؟ 

صفحه 106:
۰ 4 ۰ 2 + > ۰ برنامه اجرائی تضمین کیفیت ایمونولوژی و هورمون - آموزش مستمر کارکنان هورمون و ایمرنولوژی در حوزه های کاربردی و بر اساس نیاز سنجی آموزشی 2- ارزیابی صلاحیت کارکنان هورمون و ایمونولوژی متتاسب با نوع و حجم کار ( بدو خدمت و حین خدمت) در فركائس زمانی تعریف شده (حداقل سالانه یک بار در حين خدمت ) توسط مسئول فنی و سوپر وایزر آزمایشگاه مبتنی بر شواهد عینی حین کار و سوابق کیفی ارائه شده توسط کارکنان 0 پيگيري و ثبت روزانه عدم انطباق های بخش هورمون و ایمونولوژی در هر سه حوزه مرتبط با بخش میکرب شناسی شامل قیل از آنالیز(ارسال نمونه معیوب از نمونه برداری نظیر ظرف آلوده به دترژان و حجم ناکافی و...) حین آذلیز (استفاده از ملحنی ذخیره الایزا و عدم استفاده از کالیبراتور ها در هر ردیف کاری ...) بس از آناليز( ثبت جابجا نتايج تست ها در ليست كار / نداشتن كامنت هاى مناسب جهت تفسير نتايج و ...) الف) ثبت عدم انطباق ها ( خطاهاي ) ماژور در فرم عدم انطباق بخش همراه با ثبت الزامي اقدام اصلاحي و بيشكيرانه ب) ثبت خطاي مینور در فرم عدم انطباق بخش بدون ضرورت ثبت اقدام اصلاحي و پیشگیرانه ‎P‏ برنامه اجرائی کنترل کیفی خارجی هورمون و ایمونولوژی ‏الف) دریاقت 0 نمونه سرم مجهول از موسسات کنترل کیفی خارجی ( موسسات مورد تائید آزمایشگاه رفرانس) در فواصل 6 ماهه ‏ب) دریافت و ارسال نمونه های مشکوک یا مجهول از آزمایشگاه های ریفرال و معتبر تظیر ارسال نمونه با جواب مثیت ضیف ( ارزیابی مقایسه ای نتایج مشکوک در بخش هورمون و ایمونولوژی) ‎ 

صفحه 107:
9 امعان اد تقید آنممن کیینده تقید مستول فنی و مدير آيمايشعاه. أكسب 60-70 لمتياق مجموع (معائل 180-210 لممتاي) حغصاب و معياي قال قبول ‏ تلقيد صلاحيت فنى ). سین ۰۰:۷0 22:0 معا 230 20 دلمتان) معي ‎Caetano‏ یبش هت هرس مج فد تسنیا ید لت اه با ترس 2111010 ا م ‎a‏ 0 

صفحه 108:
Principle of immunoassay 

صفحه 109:
labeled material ٠ All immunoassays require the use of labeled material in order to measure the amount of antigen or antibody present. * A label is a molecule that will react as part of the assay, so a change in signal can be measured in the blood:reagent solution. 

صفحه 110:
Examples of a label + Examples of a label include a radioactive compound, an enzyme that causes a change of color in a solution, or a substance that produces light. The label can be applied during the manufacture of the reagent to either the antibody (Ab*, see Figure 1-5) or antigen (Ag*, see Figure 1-6). Immunoassay technologies utilize different formats to distinguish the bound antigen- antibody complex from the free unbound label. 

صفحه 111:
‎‘Ag-Ab*‏ *مم ‏و , ون ب جح ‎Labeled Antibody Analyte in Antibody-Analyte Reagent Specimen Complex ‎ ‎FIGURE 1-5 Labeled antibodies allow detection of antigen antibody complexes in immunoassays ‎Ab ‏وه‎ Ag Ag*-Ab + Ag-Ab ‏س<2*:-60+00+ سب ‎Antibody Analyte Analyte in Antibody-Analyte Reagent Reagent Specimen Complex ‎FauREa-6 Labeled antigen alse allows detection of antigen/antibody complexes In immunoassays ‎ ‎ ‎ ‎ ‎ 

صفحه 112:
* The measurement of analyte in an immunoassay is achieved by using either a competitive or a noncompetitive format. 

صفحه 113:
Competitive Format In competitive formats, unlabelled analyte (usually antigen) in the test sample is measured by its ability to compete with labeled antigen in the immunoassay. The unlabeled antigen blocks the ability of the labeled antigen to bind because that binding site on the antibody is already occupied. 

صفحه 114:
Con’ted « Thus, in a competitive immunoassay, less label measured in the assay means more of the unlabeled (test sample) antigen is present. The amount of antigen in the test sample is inversely related to the amount of label measured ‎hes‏ ماك ‎Indirect Relationship ‎ ‎Signal ‎ 

صفحه 115:
One step competitive format + In the one step competitive format (see Figure 1-8), both the labeled antigen reagent (Ag*) and the unlabeled specimen (or test sample analyte) eamnata far a limitad amaunt of Agt ‏ور‎ Ab-Ag* 30-8 FigurE4-8 One step competitive immunoassay 

صفحه 116:
Two step competitive format * In the two step competitive format, the antibody concentration of the reaction solution is present in excess in comparison to the concentration of antigen. Antibody reagent is first incubated with specimen containing antigens of interest; then in the second step, labeled antigen is added. Remember that in the competitive format, less bound labeled antigen indicates more antigen present in the test sample. assay formats provide several fold improved assay sensitivity compared to one step assay formats. 

صفحه 117:
Step 1: Ab (excess) Ag Ab == +O ‏و۵«‎ ‎Step 2: ‎AbsAg*‏ و۳ ‎Mb Ast‏ و ‎Dy 44D > pK‏ ‎FIGURE{-9 Two step competitive immunoassay ‎ ‎ ‎ 

صفحه 118:
Noncompetitive (Sandwich) Method * Noncompetitive assay formats generally provide the highest level of assay sensitivity and specificity and are applied to the measurement of critical analytes such as cardiac and hepatitis markers. This format is referred to as a “sandwich” assay because analyte is bound (sandwiched) between two highly specific antibody reagents (Figure 1- 10). 

صفحه 119:
Sandwich Assays; Antibodies bind to two sites on analyte Solid suppor: microparticles beads microtiter plates FicuRe 1-10 Noncompetitive sandwich method of immunoassay 

صفحه 120:
Noncompetitive assay * Noncompetitive assay formats can also utilize either one step or two step methods, as with the competitive assay. + The two step assay format employs wash steps in which the sandwich binding complex is isolated and washed to remove excess unbound labeled reagent and any other interfering substances. * The two step noncompetitive format usually offers the highest specificity and sensitivity of all the assay formats discussed here. 

صفحه 121:
۱ noncompetitive assays, the measurement of labeled analyte, usually antibody, is directly proportional to the amount of antigen present in the sample, This can be represented by a dose response curve (Figure 1-11). The X-axis plots concentration of an antigen, The Y-axis plots response, which in this case is signal. Thus, the more antigen that is present, the more labeled antibody that will bind, This direct proportionality is in contrast with the indirect proportionality of competitive immunoassays discussed earlier, Direct Relationship Signal Concentration Figure 1-41 Amount of antigen is directly related to the amount of label (signal) in competitive formats 

صفحه 122:
Reaction Cuvette Antibody Solid Phase Homogeneous Reagent ۳» ‏نس‎ Measure Bound ‘Ab) ‘Ab-Ag Complex ۳ 0 Ag Com + Specimen Heterogeneous (Ag) Ag Method Isolate and Wash > }Ab-Ag-Ab* complex + 01 Labeled Antibody ‏مم‎ ‎Reagent FicuRE 4-42 Homogeneous and heterogeneous immunoassays, 

صفحه 123:
Chemiluminesence Immuno Assay CIA Dr mehrdad vanaki Consultant of QMS & QA in medical lab 

صفحه 124:
ديه تکنولوژی که به تازگی طراحی گردیده و به نام کمی لومینسانس می باشد . و بر اساس اندازه گیری محصول نهائی ( نور) می باشد در واکنش کمی لومینسانس تحت اثر اکسیژن یا پراکسید ها بر روی برخی مواد معدنی منجر به برگشت الکترون به مدار پایه می گردد که اين برگشت الکترون با آزاد سازی انرژی نوری بوده یا به عبارتی انرژی آزاد شده از ملکول ها به صورت تولید نور یا فوتون افشانی خواهد بود . میزان فوتون افشانی در واکنش های بیولومینسانس چندین برابر واکنش های کمی . لومینسانس می باشد میزان حساسیت روش کمی لومینسانس از روش رادیوایمونواسی و فلوئوروایمونواسی بیشتر است و حساسیت روش فلوئوروایمونواسی نیز از روش انزیم ایمونواسی بیشتر .می باشد 21-10 -109 

صفحه 125:
مقایسه حساسیت سنجش در انواع روش های ایمونواسی رادیو ایمونو اسی 18-10 فلوئورو ایمونو اسی 12-10 انزیم ایمونو اسی نسل سوم 9-10 اگلوتیناسیون لاتکس 5-0 

صفحه 126:
مت رس رس 9 ‎eter le‏ :تاریخچه اولین بار انسان نور کمی لومینسانس را در کرم شب تاب پیدا نمود که شامل انرژی نورانی حاصل از فوتون های آزاد شده بدون دخالت حرارت می باشد : مفاهیم اولیه روش کمی لومینسانس ایمونواسی اصول کمی لومینسانس مشابه سایر روش های ایمونو اسی است (نظیر رادیو ایمونو اسی / آنزیم ایمونواسی / فلوئوروایمونو اسی و...) با این تفاوت که لیبل بکار گرفته شده به عنوان اندیکاتور ایمونو اسی شامل لومینول و آکریدینیوم یا ایزولومینول می باشد لومینول با تاثیر بر روی ملکول ها منجر به تولید فوتون و مجموعه فوتون های نوری توسط دستگاه لومینومتر( فوتون سنج) و توسط یک سیستم فتومولتی پلایر دتکتور تبدیل به انرژی الکتریکی شده و به صورت دیژیتال و کمی نشان داده می شوند 

صفحه 127:
مت رس رس 9 کسمی لومیلسانس گرچه لومینول اولین نشانگری است که مورد استفاده واقع شده ولی ایزو لومینول کارآئی بهتری دارد اين واکنش با افزودن مخلوطی از پراکسید هیدروژین و یک کاتالیست اجرا می شود 

صفحه 128:
یمن0 مزایای روشک میل ومینسانسن سبتبه سایر روش‌هایلیمونولسی : حساسیتب سیار با-لاروشک میلومینسانس-1 مزیت غالب روش کمی لومینسانس به سایر روش های ایمونو اسی حساسیت بالا روش می باشد و در برخی متدها تا حد زيتامول (0©- 00) مى باشد / حساسیت کمی لومینسانس هزاران برابر بيشتر از روش الایزا و رادیو ایمونو اسی می يلد أبن ‎A ASCH a peg ae‏ مورد مت ها و مقرون به صرفه شدن این گروه از آزمایشات ( گردیده است دقتو تكراريذيرىمناسبووشكمم ل ومينسانسنسبتبه ساير روش به دليلتاثير بذيرىكمتر لين - 2 روشاز عولملمحيطىو يايداروييشتر معرقفظ ویژگیو لختصاصیتبا-لاروشک می‌لومینساس -3 نیمه عمر طولائیو پایداری> یتیک می‌دومینسانس‌نسبتبا رادیو ایمونو اسیو ‎Am NB‏ كستردكىة_ستهاوق ابل لنجام. با روشک سمل ومینسانسبه دلیل‌حساسیتو ویژگی‌ناسبو بادلاروشو -5 لمکانلندازم گیریغظت‌هوی سیار پائینآنالیت کم. خطر و لیمنبسودن‌روشک می ومینسانسنسبتبه سایر روشهلوايمونواسى - 6 لستفاده از روشک می! ومینسانسب4 عنوان‌روش‌مرجم. از جمله کاربرد از - 7 گازی کمی لومینسانس به عنوان ردیاب در روش مرجع کروماتوگرافی گازی عدم. نیاز به منبع. نوریو فیلتر خاصو نداشتنمحدودیت‌وروشرنگسنجی لازا -8 

صفحه 129:
تفاوت کمی لومینسانس و الکترو کمی لومینسانس ‎OL & GCL‏ در يوش كمى لومينسائس انرژی اولیه جهت تهییج اتم ها به واسط يى واكنش شيميائى تامين مى كردد در حالى كه در روش الکترو کمی لومیتسانس انرزى اوليه جهت تهييج اتم ها به کمک انرژی الکتریکی حاصل از یک واکتش الکتروشیمیائی تامین می گردد در هردو حالت پس از. تهییج اتم ها و در برگشت به حالت پایه فوتون ساطع می گردد و فوتون های ساطع شده توسط فوتون سنج یا لومینومتر, اندازیه گیری کمی یا دیژیتال می شوند 

صفحه 130:
الکترو کمی لومینسانس ‎GCL‏ در روش الکترو کمی لومینسانس اکسیداسیون الکترو شیمیائی استر آکریدین در حضور آب اکسیژنه منجر به تولید کمی لومینسانس آبی رنگ می گردد که در طول موج 660 خوانش می گریدد الکترود های دستگاه الکترو کمی لومینسانس معمولا در مجاورت محلول قرار گرفته و نور منتشره بين سطح الكترود و محلول توسط دتكتور اندازه كيرى مى كردد 

صفحه 131:
مومع ‎ChsssPicaiog vP‏ 5 سرعتولکنش ک میلومینسانس #واکتش کمی لومیتسانس به لحاظ سرعت واکنش به دو گروه زير تقسیم می شوند ‎method‏ ۳۱25 واکنش فلاش خر ‎SNE SAS ho serie 4 BE OS NO Sad‏ ين رقة و حاف م دد ویژگی مثبت واکنش فلاش حساسیت بسیار بالا روش (در حد اتو مول) است که کاربرد آن را محدود به آزمایشگاه های مرجع و تحقیقاتی می نماید ویژگی های منفی روش فلاش گرانی روش و کوتاه بودن زمان واکنش است که جهت خوانش فوتون ها الزاما دتکتور باستی در مجاورت نزدیک با سیستم واکنش باشد که به محض آزاد شدن فوتون ها خوانش با دتکتور انجام گردد ‎(us|, GLOW method‏ گلاو ‏در طول © الى © دقيقه به اوج رسيده و به مدت 000 الی 060 دقیقه پایدار و ثابت باقی می ماند ویژگی مثبت روش گلاو کاربرد آن در آزمایشگاه های بالینی روتین است که به دلیل ثبات و پایداری سیگنال های نهاتی و امکان بازخوانی مجدد تست ها در اين روش می باشد ‏ریژگی منفی روش گلاو حساسیت آن است که کمی کمتر از روش فلاش می باشد 

صفحه 132:
عصمسوعه ارون اجو 0 معيار هاومناسبدر خريد سيستم كمىلومينسانس خريد لومينومتر لستاندارد و دارلئىتائيد يه بينا لللىو تائيديه -1 صحتر دقت(صحه گذاری) در شرکتپ شتیبان‌و آزمایشگام ظ پشتیبانیو خدماتپس‌از فروش‌با سطح با-لا( تحقیقو لستعلم -2 لحتبار شرکت (پشتیبان از مراکز نصب شده / ترجیحا نماینده انحصاری یا اصلی دارا بودن‌سیستم باز کیک میلومینسانسی | سیستم بسته با -3 لعتبار با-لاو تسنوع گسستردم در تست‌هایق ابل‌لنجام قیمثمناسبکیت ی سیستم متتاسببا تعرفه هیآ زمایشگاهی‌لیران -4 ترجيحا لستفادم از سيستم هاوفوللتوميشنك مل ومينسانسبه دليل- 5 كا شقابلملاحظه خطا هوي رسنلى دارا بسودن‌حداقل‌حساسیتدر روشهاىكمىلومينسانس( فمتو م -6 ‎Co)‏ 

صفحه 133:
ELISA TROUBLESHOOTING ۰ Or. wehrded vacdht * CENON? 

صفحه 134:
تعریف و طبقه بندی روش الایزا ‎ELISA‏ Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay سنجش ایمونومتریک واکنش آنتی ژن و آنتی بادی با هدف جستجوی انتی ژن يا آنتی ۰ بادی بواسطه آنزیم های لیبل شده : طبقه بندی انزیم ایمونواسی هموژنوس نزيم. لیمونولسی: ولکنشف‌اقد مرحله شستشو و جدلسازویوده -1 و لندازه گیرویر لساست غبیر اتف عا لآنزيم می‌ب‌اشد (کاربرد در لندازم گیری‌سطح داروها ) هتروزنوس لنزيم ليمونواسئ روشمبتنوير فاز جامد بوده و دارلی-2 |مرحله شستشو و جدلسازی‌میب اشد و لنزیم در این‌روش‌صرفا یک لندیکاتور جهن ایید حضور ک مپلکس لنتیژنو انتییادیمیباشد (عمدم روشها از لین‌گ روم مییاشد) روش‌هتروژن‌لنزيم لیمونو لسی‌دو نوع . رقابتی‌و غیر رقابتیت قسیم می‌گردد 

صفحه 135:
Ab igh or Ag Capture ‏باوي اختصاصی قرار می‎ eth cs 25 ‏روش يك آنتى‎ #2 a و ساندویچ می گردد و شایترین روش الایزا محسوب می گردد مثل ۳۱/۲۳/۵۰ تست در روش آنتی ژن کپچر یا آنتی بادی ساندویچ ملکول آنتی ژن حداقل بایستی دارای دو سایت یا ناحیه آنتی ژنیک متفاوت باشد ‎Ag Sandwich or Ab Capture‏ این روش که برای جستجوی آنتی بادی به کار می رود یک ملکول آنتی بادای ‎٠‏ بين دو ملكول انتى زن ساندويج و کاپچر می گردد 

صفحه 136:
Quibody vupture ب) روش 6901۲6 ۸۵0۵00۷ Ag sandwich or direct Ab capture-d این روش براي تعیین سنجش آنتي بادي مورد استفاده قرار مي كيرد بدين صورت که از يك آنتي ژن کوت شده بر روي فاز جامد براي به دام انداختن آنتي بادي اختصاصي آن استفاده مي شود و همان آنتي بادي از طریق بازوي دیگر خود (۲۵0) پذيراي همان آنتي ژن اما به صورت نشان دار مي باشد در نتیجه آنتي بادي اختصاصي در بین 6 آنتي ژن ساندویچ مي گردد ,در اين روش آنتي بادي توتال از هر کلاس ایمونوگلوبولین میسر است و يكي از اختصاصي ترین و حساس ترین روش ها براي تشخیص آنتي بادي در نمونه است مثال بارز این روش کیت اندازه گيري آنتي بادي بر علیه پلاسمودیوم ویواکس و ترپونماپالیدوم و ۸۵0 ۲۱85 مي باشد. Indirect Ag Sandwich or Indirect Ab capture-C در این روش پس از به دام انداختن آنتي بادي توسط آنتي هیومن گلوبولین کوت شده در کف چاهك ها با اضافه کردن آنتي ژن اختصاصي و تشکیل کمپلکس از يك آنتي بادي اختصاصي نشان دار بر علیه آنتي ژن به عنوان سیستم شناساگر استفاده مي شود. 

صفحه 137:
عدصت دنه : ‎١‏ : اللوزيا متيس و مهاری ‎fl‏ هی آنلیت ,یل یبا وال درج نشانهاهبا هم (همزمان) ‎ia‏ شوند روش الایزا رقابتی نامیده می شود ‏بلس مسا : الایزا مهاری ‏ابتدا آناليت يا آنتى بادى غير نشاندار ( نمونه بیمار) اضافه شده و پس از یک دوره انکوباسیون ( با شستشو یا بدون شستشو) در مرحله بعدی آنالیت یا آنتی بادی نشاندار اضافه می گردد 

صفحه 138:
الایزای رقابتی یا مهاری ‎٠‏ در روشهاي رقابتي اساس سنجش بر رقابت دو آنتي ژن یا دو آنتي بادي ( که يكي از آن دو نشاندار است) براي اتصال به لیگاند با مقدار محدود استوار است. اگر هر دو آنالیت نشاندار و غير نشاندار با هم به سیستم اضافه شوند ربوش را رقابتي مي نامند ولي چنانچه ابتدا آنالیت اضافه شده و پس از يك دوره انکوباسیون آنالیت نشاندار اضافه گردد روش را مهاري یا بلاکینگ مي نامند. در روش مهاري ممكن است در بين 6 مرحله و قبل از اضافه نمودن آنالیت بعدي شستشو انجام شود یا انجام نشود مثال بارز روشهاي رقابثي و مهاري سنجش 43,۲ مي باشد. * انواع روشهاي رقابتي عبارتند از: 

صفحه 139:
الایزای رقابتی یا مهاری الف) روش رقابتي یا مهاري براي انتي ژا اساس اين روش بر رقابت بين آنتي ژن نشاندار و آنتي ژن موجود در نمونه براي اتصال به يك آنتي بادي اختصاصي کوت شده در چاهك استوار است. در اين روش مقدار آنتي بادي کوت شده باید محدود باشد و ملکول سیگنال دهنده همان آنتي ژن نشاندار است, اساس ‎]٩۱۸‏ و 21۸ كلاسيك به همین روش استوار است. در این روش منحني پاسخ- دوز به صورت معکوس خواهد بود, بدین معني که آنالیت نشاندار در حضور مقادیر زيادي از آنالیت غیر نشاتندار موجود در نمونه به مقدار كمتري به آنتي بادي متصل مي شود و در نتیجه سیگنال هم بوجود خوههد آمد. محدوده تعیین آنالیت با این روش ممکن است بوسیله استفاده از مولکول ت اندار با فعالیت اختصاصي زیاد تقویت شود اما حداقل مقدار قابل تشخیص (کمترین مقدار از آنالیت که قابل تشخیص خواهد بود) توسط تمایل آنتي بادي مورد استفاده تعیین مي شود, با این وجود غلظتهاي خيلي کم از هاپتن ها عموما توسط همین روش قابل تعيين اند و حساس ترین روشي است که مي تواند مقدار کمتر |6۳00 را هم تشخیص دهد. در برخي از موارد نشاندار کردن روي خصوصیات هاپتن اثر مي گذارد در نتیجه در روش رقابتي براي ن آنتي ژن از يك آنتي بادي نشاندار استفاد مي شود, در اين نوع از سنجش ها این مطلب ضروري است که فاز جامد توسط آنتي ژن با مقدار کم و ثابت پوشیده مي شود, در اين روش آنالیت موجود در نمونه با آناليت كوث شده در جاهك براي اتصال به ی بادي نشندار رقلبت مي كند . در اینجا هم منحني استاندار معكوش است, از اين روش بيشتر براي سنجش به روش كمي لومينسانس استفاده مي شود. 

صفحه 140:
الایزای رقابتی یا مهاری ۰ ب)روش رقابتي براي آنتي بلاي: * دراین روش رقابت بین دو آنتي بادي يكي در نمونه به صورت غیر نشاندار و يكي به صورت نشاندار شده با آنزیم برا اتصال به يكي آنتي ژن کوت شده در چاهك صورت مي پذیرد, بديهي است که هر چه مقدار آنتي بادي نمونه بیشتر باشد انتی بادي نشاندار كمتري به چاهکها متصل شده و سیگنال نیز کمتر خواهد بود و در نتیجه منحني استاندارد نیز معکوس مي باشد, شاخص ترین مثال این روش اندازه گيري آنتی بادی بر ضد 6۳۱8۸0 ۳/8 است 

صفحه 141:


صفحه 142:
estine | F-IOIREOT ELIGOC) ۱ در اين روش آنتي ژن یا آنتي بادي موجود در نمونه ي که بايد تشخیص داده شود به طور. مستقیم بر سطح فاز جامد كوت مي شود و سپس آنتي بادي یا آنتي ژن مکمل آن که نشان دار شده است به سیستم اضافه میشود. در صورت وجود آنتي ژن یا آنتي بادي مورد نظر در نمونه ي سیگنال مناسب ایجاد مي شود. این روش مشابه ایمونوفلورسانس مستقیم است اما کاربرید چنداني در کیت هاي تشخيصي ندارد و بیشتر در كارهاي تحقيقاتي استفاده مي شود 

صفحه 143:
(1900,ا() بسسطب!- از ايغر مستقيم ( این روش براي تعیین آنتي بادي اختصاصي و با تیتراسیون آنتي بادي در .نمونه هاي سرم مورد استفاده قرار مي گیرد اساس آزمایش بدین نحو است که معمولا سرم رقیق شده به آنتي ژن هاي كوت شده در فاز جامد (ميكرو ول یا چاهك) اضافه مي شود. آنتي ژن کوت شده آنتي ژت اختصاصي مربوط به آنتي بادي است که قرار است در نمونه رديابي شود پس از افزودن نمونه و طي زمان انکوباسیون و يك مرحله ي شستشو آنتي هیومن گلوبولین نشان دار شده با آنزیم به چاهك اضافه مي شود بر حسب اينکه چه كلاسي از انتي بادي براي مورد استفاده نیز متفاوت است مثلا و19 رديابي اهمیت دارد نوع آنتي و براي 903 از انتي هیومن 195 براي رديابي آنتي بادي كلاس .استفاده مي شود 19۸ از آنتي هیومن 19۸ رديابي کلاس 

صفحه 144:
Antibody capture @L16® * اختصاصیت سنجش مستقیما توسط آنتي ژن کوت شده در فاز جامد تعيين مي شود که ممکن است کاملا خالص و اختصاصي باشد و یا نسبتا خام و غیر اختصاصي باشد . سرم حاوي انتي بادي اختصاصي مي تواند در يك بافر براي جلوگيري از جذب غير اختصاصي پروتنین ها و جلوگيري از اشغال نقاط اتصال آنتي ژن رقیق شود. به چنین بافري محلول رقیق کننده نمونه 011/6۳1 53۳0016 گفته مي شود. حساسیت و ويژگي چنین روشهايي مي تواند با به کار گيري روش ‎Antibody‏ ‏!نمق با کاهش تداخل اثر آنتي بادي غیر اختصاصي بهتر شود. * بهترین مثالها در مورد این روش تعیین آنتي بادي بر علیه توکسوپلاسما,روبلا ,ویروس سیتومگال و هلیکوباکترپيلوري از كلاسهاي ‎SIM‏ ‏ارت وا در سرم مي باشد.البته امروزه براي تعیین ‎IGM‏ بر عليه اين عوامل عموما از روش 62001۳6 استفاده مي شود در روش 6۵0101۳6 آنتي بادي هاي موجود در نمونه از کلاس/9| به روي چاهك هاي کد شده با آنتي هیومن 1917 جذب شده و سپس براي تشخیص , از آنتي ژن اختصاصي مربوطه که آنزیم نشان دار شده اسنت و یا آنتي بادي نشان دار ضد آن به صورت مزدوج استفاده مي شود. 

صفحه 145:
ELISA TROUBLESHOOTING " No Signal or Weak Signal * High Background "Poor Duplicate "Poor Standard Curve * Poor Linearity * Poor Assay Sensitivity * Poor Correlation * Unexpected Clinical Classification * Apparent Shift in Reference Interval 

صفحه 146:
ELISA Antibody Labeling Reagents Eneyme مه و ‎Bining‏ ‏و ۹ Seeend Anibooy 7, ‎Qa‏ ی سس ‎Are, 3‏ 6ه سه > > ‎Label‏ ‎No Produ ‎Taiget Anat ۳ ‎We ‎eye” ‏لي يل * ‎Bind Vlash ‎ 

صفحه 147:


صفحه 148:
حذفيكواز معرفهاوك ليدونظير كنزوكه در روشاجرلئىكار منجر به -1 سيكنال منفى ( عدم واكنش ) مى كردد افت تيتر كنزوكه غير فعال شدن كنزوكه ) يا كاهش اثر تركيب سوبسترا و کروموژن که معمولا به دليل آلودكى معرف هايا در انتهاى مصر ف هر كيت ( در مراكزى كه تعداد نمونه كم بوده و كيت مكررا و در جندين نوبت مورد استفاده قرار مى كيرد ) خروج از کالیر لبزار های‌حجمیی رداشتفمونه و لستاندارد منجر به كاهش -2 سیگنا لذ هائی‌می‌گردد به عنوانمثا گر از منحنی‌استاندارد ذخیرم شده در حافظه دستكام لستفادم نمائیم و لبزار حجمی‌در حین‌کار از کاللیر خارج گردد به دلیل لینکه تستو لستاندارد در هر ردینک اری‌همزمان‌گ ذاشته نمی‌شوند در صورتک‌اهش برداشت‌عجم نمونه درسیگنا [مربوط به تست کاهشو ضیف ایجاد می‌گردد و نتایج منفوك اذبيا مثبتكاذببسته بسه نوع منحنی‌حاصل‌می ن ماید خراش‌در 5 فپ لیت‌ می‌تولند منجر به کاهش‌سیگنا لشود -3 كاهشزمانلنكوباسيوزيا دماىإنكوباسيونبر خلاقهستور اهملك يتمنجر به كاهش-4 سيكنالمىكردد كه به دليلكاهشتعداد تركيبهاواتصالىنهائىمىي اشد 

صفحه 149:
ا ‎OP‏ ‏شستشو بیش‌از تعداد دفعاتقعریفشده و یا لستفادم از بافر با -5 پ هشن امناسبها دچار آنودگیب اکتریال. و قارچیمنجر به دفع ولکنش‌های!ختصاصیلیمن‌ک مپلکسو نهایتا لفتو کاهش‌سیگنا لیا رنگنهاتی‌می‌گردد کاربرد فیلتر نامناسبدر ا-لزا منجر بسه کاهش‌سیگنا (می‌گردد -6 شروع لنجام تستاایزا ببدون‌لنتظار جهتبه دمایلطاق رساندنمعرفه 7 ها و پلیتایک یتا_لیزا از جمله عولمل‌شايم. لفتسیگنا لو کاهش‌رنگ ‎alia‏ حرارتپ انینمحیط کار بخش زا ( خرابب ودن‌سیستم گرمایش-8 آزمایشگام) منجر بسه لفتسیگنا لو رنگه‌هی‌ولکنشو بسته به ولکنش غیر رقابتیی | رقابتی‌منجر به لفتیا لفزایشک اذب‌مقادیر تست‌ها مى گردد ( خصوصا در شرلیط که تست بدون‌لستاندارد همزمان خولندم شوند ) 

صفحه 150:
ELISA ] ‏سا میج يجنسف اعرد‎ kids یه بانب مه و 

صفحه 151:
آلردگی‌چاهکبسه چاهکنمونه بيمارانبه دليلمجاورتبا كنترلمثبتها لستاندارد يا -) نمونه مثببتمجاور لفزايش زمانانكوباسيوزيا دماىإنكوباسيونبر خلانهستور ا هملك يتمنجر به لفزليشسيكنا لمى © كردد كه به دليلافزليشعداد تركيبغواتصا لون هائىمري اشد شستشو كمتر از تعداد دفعاتقعريفشده و يا استفادم از بافر باب هشنامناسب.© يا دجار ا-ودكئياكترياله و قارجىمنجر به عدم دفع. ولكنشهاىغير اختصاصىو نهايتا لفزليشسيكنا-لها رنكفهائىممك ردد كاربرد فيلتر نامناسبدر ا-لإزا منجر به لفزليشسيكنا-لمىكردد ‎Pe‏ حرارتبا لامحيط كار بخشالإزا ( خراببودزنسيستم سرمايشآزمايشكام -.© خصوصا در مناطق‌گرم و مرطوب‌شما لها جنوب‌ک شور) منجر به تغییر سیگنالو رنكههوولكنشو بسته به ولكنشغير رقابتويا رقابتومنجر به لفتها لفزليشك اذب مقادیر تست می‌گردد ( خصوصا در شرليط كه تستط بدوناستاندارد همزمان خولندم شوند ) 

صفحه 152:
لفزليشغلظتو تيتر كنزوكه كينا لإزا به دليلة بخير يا تغليظ -© ( باز ماندزندربظرفكنزوكه به مدتطولانىدر حرارتاطاقدر جند نوبتمكرر) يا اشتباه كارخانه سازنده در تعيين تيتر مناسب تبخیر و تفایظ نمونه هواستاندارد ک یب ه دلیلب از ماندن‌طواهی‌دربج» ویا لستاندارد ها در چند نوبت‌مکرر آردگیپیپتو دیسپنسر مورد لستفاده برلی‌سویسترا با معرف6 کنژوکه / عدتا به دلیل‌اشتباه يرسنلىو استفادم مشتركاز ی کپ بپتاست آنزدگی‌سویسترا به یون‌هیف ازیو لکسیدان‌ه یا مجاورتبا نور -0 که منجر به تشکیلرنگزمینه لوآبی‌پر رنگ( پساز اختلاط سوبسترا و کروموژ) قبل از مجاورت با پلیت می گردد (جهت سوبسترا و کروموژن تیمیدین متیلن بلو) 

صفحه 153:
ELISA 

صفحه 154:
نمونه خوب‌میکسن شده ( نمونهه خارج شدم از -1 فریزر و دارلی‌شیب‌ظظتیو رسوب) خراش‌زیر پلیت-2 دیسپتسینگشادرست: مونه یا معرفه در پلیت-3 لثر لبه لی-4 چاهکآلده یا بی‌لژ -5 آودگی‌چاهکبه چاهک.6 

صفحه 155:


صفحه 156:
لستفادم از معرفیا لستاندارد یکک یندیگر خصوصا -1 باسروساختمتفاوت خطا در حينآمادم سازوإستاندارد ها ناشىاز بييتينك. 2 ... نامناسبو لختلاط نامناسباستاندارد ها -3 خراشو كدورتكفهليشط در ناحيه لستاندارد ها -.4 كفهايتكثيفو تميز نشده -5 شستشوون درستیا ناکافی-6 

صفحه 157:
ویژگی های منحنی استاندارد یا کالیبراسیون Calibration curve or Dose Response Curve ‏منحنی استاندارد چون رابطه بین دوز آنالیت و پاسخ ( جذب نوری یا‎ ‏سیگنال حاصل) را بیان می نماید به عنوان منحنی دوز - پاسخ نیز‎ نامیده می شود در شرايط ايده آل منحنى كاليبراسيون يا استاندارد بليستى يكنواخت ( منو تونيك ) باشد يا به عبارتى منحنى تغيير جهت نداشته باشد ( فاقد قله يا دره در ميانه منحنى باشد) خی ای سارک ذو نوع كل طبقة کی ی گز نا منحنی‌شیببمثبت: رلبطه دوز و پاسخ ( سیگنا مستقيم اس منحنىشيبمنفى: رلبطه دوز و ياسخ ( سيكنا-4 غيرمستقيم لست 2 افزايش تعداد استاندارد ها يا كاليبراتور هل منجر به افزايش صحت و کاهش باياس منحنى كاليبراسيون مى كردد 

صفحه 158:
ELISA 2-7 Cabra Pad 5 Labeling Reagents tay So ra See | Poor ht deve or a = 7 0 ۳ ‏وص هط ی‎ ‏رید واه مرول اد اج خی بیع‎ oho 

صفحه 159:
میکسینگف اقص راژنت و نمونه ه -) به حرارتلطاقنرساندنكيتهاىا_لإزا قبلاز مصرف. © عدم استفاده از کا لیرلتور صفر در ستیا لختلظط ناقص-0 کالیرلتور صفر تفاوتو تنوع در جاهكها :© ..الإدكىلوله ها به دترزانو 6۰ فساد معرفط و يليتكينا-لإزا قبلاز تاريخ انقضا به دليل. © حرارتفامناسبمحيطىو لستفادد مكور شيبفاكافومنحنىلستاندارد در غلظتعاوبائين-م” نقصدر سرىساختكيت .© 

صفحه 160:


صفحه 161:
لستفادم از کیت‌غیر لستاندارد -6 ناپایداریاستاندارد هاومرجع. -6 رنج محدود لستاندارد ها در كيتالإزا -© لستفاده از تجهیزات‌تفاوتو غر کالیر -6 تعداد محدود نمونه بیماران‌در مطاعه مقایسه لودو روش‌به نوان‌مثالهر 6۰ بررسی‌بقایسه لوبو کیتیا دو روش‌ب راو یکت ستب ایستی‌حدلقل(00) نمونه در سه سطح غظتیمتفاوت‌مورد ارزیابی‌قرار گیرد تا لختلاقمعنی‌دار حاص قابل ارزیابی باشد لنجام یکبا رتستووی‌هو نمونه بیمار / بهتر است‌هر نمونه حدلقل‌دو تا -6 سه بار انجام شود و میانگین آن مورد استناد قرار گیرد لستفادم از دو نوع ولحد استاندارد بينامللودر كزارشنتايج -م” نقصدرسرى ساختكيت.© 

صفحه 162:
۱2 Unexpected or Inconsisten 

صفحه 163:
)- ‏نمونهه نادرسثو غير معمولبيمار ( غير ناشتا / هموليز ا-قائى/ لیپمیکو‎ a 5 © ‏لثر قلابیبا دوز بالامثلیتا سابیونیت فريتين/ برولاكتين-‎ ‏تداخلت ستا-لیزا با متابولیت‌هاوداروئیو غیر داروئی/ ویژگی‌پ نینک یت‎ ‏لختلاط ناکافیننمونه و راژنتا / گرم کردن‌ن امناسبکیت6‎ 6- ‏ذخیره سازین امناسبنمونه بیمار‎ 6 ‏خطا در تجهیزات‎ ‏ولحد نادرستقست.2»‎ 6 ‏ناپایداریمنحنی‌لستاندارد ذخیرم‎ 9 ‏نقص‌در سری‌ساختکیت‎ 00 ‏اشتباهاتو خطا هاويرسنلى( رلندوم. مثل‌جابجا ریختنننمونه دو بیمار یا کم وزیاد‎ ‏ريختننمونه يا معرفهر يكجاهك/ سيستماتيكمثلكم يا زياد شستزبليتها / علاتبه‎ ‏خولندنتوام با تاخير بليتها / سرعته ائيندسته رسنلدر زمانريختزيا برداشتن‎ ‏نمونه و معرقفظط‎ 

صفحه 164:
| ‏و0‎ protocol a ee, Be seg ll tot el ۱ ۳ : ۱ ‏سمحي يا سدم سا0 | اكه 1 | بسحا م يجان‎ ١ 

صفحه 165:
تعویضتکنسین-6 تسغییر عمدم در روش‌جمع. آورونمونه 60۰ تغيير عمده در حرارتو ميزانرطوبتآزمايشكام .© كا إبرلتور نايايدار -6 عدم لطلاع تكنسينان تغيير روشكار متد ا-لإزا -. © كاربرد منحنىكا إبراسيوزذخيره -.© نقص‌در تجهیزاتن ظیر. الزا ‎Po iy‏ كيتقاريخ گذشته -6 

صفحه 166:
* Contaminated substrate * Contaminated stop solution * Incorrect dilution ٠ Inefficient washing 

صفحه 167:
ALL WELL CLEAR * ELISA not performed correctly * Contaminated conjugate * Incorrect storage of kit * Over washing of plate 

صفحه 168:
منابع خطا شايع در روش انزیم ایمونو اسی 2 گام داری‌خونک امل جدا نشده در 02 درجه 0 دقيقه می-1 باشد ( ‎eas‏ علاوم بر تخریب‌ساختار پروتئینیی رخی‌هورمون‌ه و ‎CH‏ ‏هایحساس‌متجر به ازاد سازوی رخیف اکتور های‌سرمی‌در محیط شده که منجر به افزایشک انبجذب‌می‌گردد نمونه حتی|-لکان: بایست‌مولیز / لبپمیکیا لیکتریکبساشد دلیل‌ان‌تداخل‌رنگلضافی-2 در ولکنش‌رنگسنجی|- زا ریدر لست نمونه های‌هورمونی | سایر لنالت حدلکثر تا 6۳0 ساعتب دون‌شرلیط لنجماد در -3 یخچاله الی0 درجه قابلنگاه داریلستو در زمان‌هاوب 60۵ ساعتبهتر لست در 00 - فریز و نگاه داری‌گردد ذوبو فریز مکرر نمونه منجر به کاهش‌سطح هورمون‌های‌سرم خصوصا هورمون-4 هایتیروئیدی‌می‌گردد لذا بسهتر لستلگر نمونه سرم در چند ردیفک اری‌نیاز به ذوب دارد در چند ویالفریز و در هو نوبتیکویا لهفریز دد در ضمن‌نمونه سرم. كداز فريزر خارج ممكردد به دليلشيبظظتىكه در تسه لوله حاصلشده لست . بایستییه خوبی‌قبلاز لستفادم ميكسكردد و به حرارتلطاقرساندم شود 

صفحه 169:
منابع خطا شایع در روش انزیم ایمونو اسی لجزا کیپ س از خروج از ی خچال الما بایستییه حرارتلطاقو -5 ‎i ee‏ محيط برسد. دماويايينيا 5 دد رطوبت‌محیط کار لیمونولسیب_ایستیک متر از 967200 درصد ب‌اشد = لسیدویا ق لیانی‌ش دنب افر (به دلیلا لودگی‌قارچییا باکتریال) منجر به لفزایش‌یا کاهشک اذب جذب‌می‌گردد و پ هش‌اپتیما لهروسه سس لنزيمىرا از بينمىي رد لذا تهيه تازه به تازه بافر مورد نیاز در . هو رديفكارىقابلتوصيه مىياشد دماومحيط آزمايشكام بايستى)© تا ©© درجه باشد و با دماسنج -8 دقيقروزانه كنترلو ثشبتكردد . دماويا لامحيط افزليشك اذبجذبو با أمکس‌حاصل‌مینماید 

صفحه 170:
منابع خطا شایع در روش انزیم ایمونو اسی . تغییران‌دمائی‌مجاز لنکوباتور 0*7 درجه 0+- درجه میب اشد- و9 6096 اثر لبه ای خطای ناشی از شوک حرارتی به پلیت در انزیم ایمونو اسی می باشد که در قسمت مجاور درب انکوباتور 0*2 و در مجاورت پنجره ها بر روی میز کار هورمون شناسی ممکن است بر روی پلیت رخ داده و منجر به ایجاد جذب های غیر یکنواخت در استریپ های شوک خورده و سایر استریپ می گردد(شرک سرمائی یا گرمائی) لذا قابل توصیه می باشد پلیت ها در عمق انکوباتور قرار داده شود و میز کار هورمون در مجاور پنجره یا سیستم . های سرمایش و گرمایش نباشد لیجاد حبابهوا در جاهكهاىي ليتمانع تماسک املک نژوکه و سرم یا -10 بروز جذبعاىغير يكنولختمىك ردد 

صفحه 171:
منابع خطا شایع در روش انزیم ایمونو اسی ل ل د ‎ny‏ ‏اسيون اولمىويودم تبخير و حضور كرد در محيط ‎Sy Sag lg‏ کرخور معرفط مجر بهبروز لهرا ی ‏قرار دادنپ لیتدر ‎Paes‏ لضافه ‎eee‏ و کروموژن| لمیاسته 2 1 ‏و مانع بروز وا كاذبمىكردد ‏لو ماد و 5 جويا باكترباله و يا حضو ‎pas JS pet‏ المىلستج ‎sd 9 Pa <2 7‏ ‏در محلولكروموزنبىرنكقبلاز ولكد ‎ane‏ غير قابلمصرفبودنانمىياشد ‎i} [1 ۱‏ اد -14 ‎yi) ‘et‏ مول مرف با دورق فرك ل ‎nS‏ وج دد كار 0 ایستی‌حدلکثر یکساعتقبل‌از مصرفتهیه و در ‏وموژنبه مواد ‎ 

صفحه 172:
منابع خطا شایع در روش انزیم ایمونو اسی ممانعتاز تماس‌مستقيم دستبا محلولک روموژن‌ک 4 حاویحلا[متانول‌و دیمتیل-5 1 سولفوکساید می‌باشد که سمینداشته و دارای‌جذبپ وستی‌میی اشد میکس‌کردن‌ارلم و زماندار کالیرلتور ها و نمونه ه قبلاز شروع کار الولمی-16 57 ليط محيطوو برسنلودر هر ردیفک اریاستفاده از 17 Haz ‏کر روش هاوايموتو لسىمىياشد‎ ‏در م مونتاژ کیت لمکان‌پ ذیر بوده و از عل-18‎ ee ‏در‎ ee در بسوروشور ‎ee Bo‏ در اوا ا ی -19 ‎CSREES Bas a tales)‏ ضریبنقتو صحتهتحلی‌حاصل همخوانیک انا لهاوسمبار مولتیک انلل( © كاناه) يا رسوبنمك 20 های‌سملرمولتیک انا ها ولشر لحتما لب روز جدب‌ی‌غر یکنولخت ‎Ret pease‏ هایمضافوجود دارد 

صفحه 173:
منابع خطا شايع در روش انزیم ایمونواسی soaking Time زمان‌خیس‌خوردن: زمان‌خیس‌خوردن‌در ف ولصل‌شستشو بایستعدلقل60 و -21 ‎aad eR SEG‏ الختصاصواز مجاور اتصاالت ‎i‏ لقل60 از لضافه قفه عم ترس ‎٠ aes‏ نمودنمحلوللسیدیت وقف» 22 ‏با توجه به لینکه مسیر خولنشو عبور نور در میکرو پلیتا زا از بالابه -23 ‏بايين استه اكنكردنكفه ليتق بلاز 0 -لإزاريدر منجر به ظهور جذب‌ای‌غیز یکنولختمی‌گردد ‎US,‏ چریی‌سطهی‌پسوستدست ‎Perce ene‏ کر ‏فاکتور روماتوئیدیمثبتدر بیمار منجر وز نتیجه مثبتک انبدر تستهای-24 ‎parte‏ فتن‌شرح حآلو لنجا ‎y lt gl‏ سس و و ماود اک تور در که ‎ 

صفحه 174:
منابع خطا شايع در روش انزیم ایمونواسی آردگی‌چاهکبه چاهک ناشیاز سرعتبا وت خایه یا تخلیه عودیمحلولبه -25 دلخلميكرو پایتم اند یا به دلیلپ رکردنب یشاز حد بافر داخل‌چاهکه می‌ب‌اشد . 100 به طور مايلو جسبيدم به جدار جانبی‌و فوقانی‌چاهکمی گیری (دگی‌چاهکبه چاهکدر هکهر تستهاوک یفییا کمی‌ترصیه می گردد کنترلنفیابتدا ريخته شود و سپشک نترلثبتويخته شود در ضمن‌تست . مجاور کنترلمثبتب» طور مضاعنو در لنتهایپ ایتمجددا ريخته شود Hook effect 26- ‏لثر قلابويا تله لئ: همانيديدم پروزون‌در ولکنش‌هایایمونولسی‌میی اشد که به‎ ‏دليل. بطاومنفىك اذب‎ بالالنتی‌ژنب روز کرده و منجر به بروز جوا ( بینابینی) میک رد د خصوصا در تستهاوک مییتا ساب ولیت/ فسریتین/ لفا پروتئین 125 ‎s-4/TSH - PSA/-CA‏ اثر قلابی پا تله ای به دلیل پرشدن کلیه انتی ژن بایندینگ سایت ها ی کتژوکه توسط انتی ژن های فراوان موجود در محیط می باشد که به عبارتی با نوترالیزه کردن انتی ژن .مانع تماس انتی ژن با انتی بادی کف پلیت می گردد :ره پیشگیری از ار قابی در کیت هلى الايزا لضافهه نمودنیکسر_حله شستشو قبلاز لفزودن‌آنتییادین هائی( ثانویه) -1 لستفادم اولیه از رقته‌ناسبب رلونمونه هایسرم با لستفاده از رقیقک نندم خود کینو -2 در صورتعدم دسترسىإستفاده از لو نرمال 

صفحه 175:
منابع خطا شایع در روش انزیم ایمونواسی igh back ground ‏مین لوب ا-لاپایت: زمانیکه جذببافر ف سفاتدر چاهکل به تنهائم) بیش-26‎ ‏ا ی‎ ‏لضافی‌لین‌اثر زمینه لعرا ازبینبرد / در‎ ‏باشد با مجاورتان‌باسرم نرمالل‎ 0.0% Ee a ai et ed کنر یال مق فوسد 6 گروف یلتر ‎eae‏ - 27 پایینو متوسط و بالات وسط شرکتپ شتییان[ شش‌ماهه با سا لاه ) أفزليش اماد به صحتطول‌موج هواندازد گ پر ویر ۱۱ و جهتک نترلت کار پ ذیریف تومتر می‌توان‌از بکمحلول‌رنگیی کنولختو پایدار -28 مثلدىكروماتهتاسدر ميكرويليتاستفادم نمود و دریافت‌جذب وی کنواخت‌نشانه سلامت سيستم نورىفتومتر لست(در غير لينصورتجذبهاىغير يكنواختبدست ( مى ايد 

صفحه 176:
منابع خطا شایع در روش انزیم ایمونواسی ‎DRIFT 29-‏ رانش در سنجش ‏رانش عبارت است از اختلاف غلظت حاصل از یک نمونه واحد در موقعیت های مختلف / یک پلیت در یک نوبت کاری / بهترین راه شناساتی رانش استفاده دوپلیکیت کنترل یا نمونه از قبل تعیین شده در ابتدا و انتهای پلیت در یک ردیف کاری می باشد ‏: دلایل اصلی رانش در سنجش شایهترین ند ریفتی | رانش‌سنجش‌تعداد آزمایش‌با-لادر یسکوانیا ردیفک اریمی 1 ‏. باشد به نحووکه بین‌لفزودنمحلول‌ها ف اصله زمانی‌طولائیوجود داشته باشد ناهمكونىيينجاهكط -2 ‏عدم. رعایتق رتیب‌در ریختن‌راژنتا از لبتدا تا لنتها پلیت-3 ‏د بودزمعرفط در هنكم شروع بكار منجر به اختلاقهما اوین‌چاهکبا -4 ال جات رلا و ۳ 7 ‏مخلوط ننشدن‌معرفها در زمان‌ریختنبه چاهکه -5 ولكنشكند و سريع محلولمتوقفك نندم نهائی‌جهتت وقنفهاثیولکنش-6 ‎ 

صفحه 177:
نحوه کاربرد صحیح نوک سمپلر و سمپلردر. انزیم ایمونواسی دسر و وس مرس سس ‎a a‏ تک کنوکسمپار ها چکشده باشد در ضمن‌نوکمصرفشده فساقد ماهیتنچسببودن‌مییاشد و در لثر لتوکلاو تغيير شكلو حجم می‌دهد. محکم نشدن‌نوکرووی دنه سمپار منجر به ریزش‌نمونه یا معرفو بروز خطا می‌گردد -2 3- ‏هنگلم نظافتو سرویس‌سمپار منجر به ریزش‌مايم. از نوکسمپلر وبروز‎ ae ents 4- ‏هی بر ةا‎ co ee ‏تماس‌ستبانو‎ ‏خششدنممرفک نژوکه گرند. ستانواسترپتوکوکب واسطه رسيتور لفعسيقادر يه‎ لیمونوگلوینچی در محیط وده و منجر با جذبائتري ادوك لكام ر تسضسيفق يئر كازركة موكردد چسبندگی‌تر: کییاپروتینی‌سرم و پاشما بسه مر نوکسمپار ( خصوصا ابلومین) خصوصا زمانیکه -5 توکرا تلع وله حوطه ور می‌لمايم منجر به داشتفمونه از سطح خار. ‎Seeley OS Sisto a‏ ‎Re‏ جورم و عدم ور سرم کنترل‌روزانه با هفتگی‌مخروط سمپار به لحاظ اودگییه سرم یا معرفیا سید -6 اشنائوبه تكنيكب رداشتمعکوس نمونه در حجم هاوپ ایین‌سرم -7 کنترلک بفی‌وزنی‌سمپلر هلوک متر از 000 لاندا ( سه تا شش‌ماه یکبار به طور منظم) و کنترل-8 و دقت مجاز هر سمپلر ( بایاس کمتر از 969 و ضریب تغییرات کمتر از 966) ا مکی مره ارب ( 9 9۱ وین ورس از سقم نس 9 (در ‎als!‏ نوک سمپار نبایستیبا ته چاهکت ماسیابد و نبایستی‌از بالابه داخل‌چاهکچکانده شود -10 

صفحه 178:
نکات مهم در آماده سازی نمونه های ایموئو اسی سرم. هاوبیمارانیکه غظتب.لای‌از لیمونوگلوبولین‌و پروتئین‌هایاختصاصیو آنزیم ها را دارا میباشد دچار -) ۰ تغییر ماتریکس‌شده و نتایج نادرستنشان‌خولهد داد لذا رقبق‌نمودن‌این‌نمونه ها با یسکوقیقک نندد مناسب‌منجر به تعديلماتريكسو ارائه جولبعاوصحيح می‌گردد. از بسرخورقیقک نندم هاومناسبمیتوان‌نام برد : لستاندارد صفر / محلولب اف رسنجش‌حاویپروتنین/ سرم. عاریاز هورمونو آنالیت/ پولد سرم با ظتپ‌انین تقریبا در تمام سنجش‌هوایمنینمونه اصلی‌سرم مییاشد و درصورتاستفاده از پاهما بایستیالما با - © ‎٠‏ ‏دقتبروشور كيتغولندم شود و در صورتباامانم ودنک اربرد پاهما از نمونه پاهما استفلدم گردد در ضمن‌نوع ضد انعقاد نیز مهم لستب 4 عنوانمثا (هر روش‌ها‌انزيم لیمونو لسیک» آنزیم آ اف سفاتاز به عنوان‌آنزيم نشاندار كاربرد دارد استفاده از ضد انعقاد سیتراتو لتيلندىآمينك ترا استیکاسید معنوح استکه هو / دوشائور قوییون‌هیف ازیو مهار کنندم آنزیم آ-لكلنفسفاتاز / ممياشد پارلپروتئینمی‌منجر به افزایش‌ویسکوزیته سرم و کاهش‌برداشتسرم و نهایتا جولب‌های.ن ۰ با کاشک انبمی‌گردد در سنجش‌هوانزيم ایمونو سیک ه نشانگر آنزیمی‌آزپراکسیداز استمطلقا نبایستیاز - + نمونه حاوی‌سدیم آزلید لستفاده نمود همولیز نمونه منجر به لفزلیشک انب‌جذب‌فورءدر روش‌لیموتو سی‌می‌گردد ( خصوصا در 6۰ ۰ اندازم یروت پروکسین‌آزاد که منجر به ک اهشک اذب‌می‌گردد) 

صفحه 179:
نکات در مراحل شستشو چاهک ها با بافر محلول‌های‌شستشو عدتا حاوودترژنتمیی اشند که منجر به تولید حبابیا کفهر -6 حین‌ساخت محلولک ار بافر می‌گردد لذا ببایستی‌مراقب بود در زمانشستشو لين حبابیا کفه وارد چاهکه نشوند که منجر به ک‌اهش‌سطح تماس‌بافر با چاهمک هاو كاهشاثر شستشو می‌گردند لندازم كيروب هشربافر شستشو نهائى( محلولكار بافر ) از كارهاواصولىاست © كه بهتر استانجام كردد . به عنانمثا-لدر بافر فسفاتب هشليدم آ-ل©. م7 لستو شرليط اسيدويا قليائىمنجر به ظهور جذبنورىكاذببالايا بائينمىك ردد . جهت لينكار تحتكنترلببودزب هش لبمقطر مورد نياز جهتقهيه بافر الولمياست تاريخ تهيه بافر روىظرفهافر قيد شود و محلولبافر تازه بسه تازه و به 6 ميزاننياز تهيه كردد در ولشر هایاتوماتیکب ایستی‌سر عتویختنبافر و آسپیراسیون‌ب افر به شکلیتنظیم 6 . گردد تا زمان‌خیس‌خوردنپ ایتب»ه طور کاملرعایتگردد تهيه بافر غليظ يا رقيقخارج از رنج رقتب روشور منجر به کاهشیا لفزلیش‌قدرت 9 بافر و نهايتا سيكنا لمثبتها منفوك اذبدر روشمىكردد به عنوا لمثا لهافر كاه بیش‌از حد رقیق‌ش نم باشد قفر ب ۸ ‎BATS full‏ لختصاصواز محیط چاهمک نبوده و سیگنا لمثبتک انب حاصل‌می‌نماید و براوبافر ظیظ عکس‌لین‌موضوع صدق‌می‌نماید 

صفحه 180:
نقش تکان دادن (شیکینگ ) پلیت دررسرعت واکنش ایمونو اسی زمانی که پلیت الیزا شیک می گرد انرژی کافی برای انتقال ملکول آنالیت به فاز, جامد فراهم می شود و انتشار کمتر اهمیت مى يابد به طور کلی شیک 96060 دور در دقیقه به مدت یک ساعت واکنش را به تعادل می رساند که همین سیستم در مدت زمان 49 الی 00 ساعت بدون شیک به تعادل خواهد رسید مخلوط کردن کافی و مناسب معرف ها زمان انکوباسیون را کوتاهتر مى نمايد ( انکوباسیون طولانی هم حساسیت و هم ویژگی سنجش را در روش های غیر رقابتی ایمونو اسی افزایش می دهد خصوصا در تست هائی که حساسیت یک جز ضروری است رعایت دقیق زمان انکوباسیون الزامی است نظیر ‎PEWEWbs Oy‏ 

صفحه 181:
شاخص های پایداری معرف های الایزا موارد نقص پایداری فیزیکی معرف شامل : تغییر رنگ یا بیرنگ شدن معرف و رسوب گذاری معرف موارد نقص پایداری باکتریواستاتیک معرف : غلظت نامناسب و نوع نامناسب مواد ضد باکتری در. معرف ها منجر به رشد باکتری در معرف ها و آلودگی معرف می گردد موارد نقص پایداری شیمیائی معرف ها : کاهش تمایل اتصال به دلیل تخریب آنتی بادی یا آنزیم موجود در کنژوکه یا تغییر رنگ معرف کروموژن به دلیل هیدرولیز یا اکسیداسیون يا احیا 

صفحه 182:
تعیین شاخص های عملکردی کیت های الایزا حمامیت تشخیصی /ریژگی تشخیصی ‎Orguostc seveivip | Orxposic GpeviPipy‏ حساسیثق شخیصی ردو عوسم00) ۰ شامل تعداد افراد دارای بیماری است که دارای آزمایش مثبت می باشند و ۰ و ارزش اصلی حساسیت تشخیصی شناساندن افراد بیمار که آزمایش منفی دارند (گروه منفی کاذب ) می باشد ‎sna th,‏ چیه 0 ۰ ویژگی تشخیصی شامل تعدادافراد غبر بیمار است که آزمایش منفی دارند و و ارزش اصلی ۰ ویژگی تشخیصی تعبین افراد غیر بیمار که نتیجه آزمایش مثبت دارند مرياشد (كروهمتبتكائيع ‎٠‏ ‏: روش اندازه كيرى ويزكى تشخيصى و حساسيت تشخيصى در كيت هلى الايزا ‎٠‏ ‏لندازه كيروير روىتعداد زيادئونمونه سرم كنترلمثبتو منفی( یا سرم رفرلس) -0 ۰ جدلسازیلفراد بیمار از غیر بیمار با روش‌های‌لستاندارد و مرجم. -© مقایسه دو روش‌لندازم گیریمعمولو روش‌مرجع. و محاسبهه آماری‌شاخص‌ظ 9 

صفحه 183:
تعیین شاخص های عملکردی کیت های الایزا حساسیت آنالیتیکال / ویژگی آنالیتیکال رو م5 سشلده؟ | راصح لرله) حساسیتآنا لتیکلل وروی ‎(Ounied‏ ‏حساسیت آنالیتیکال یا سنجش شامل کمترین مقدار قابل اندازه گیری یک آنالیت با تکرار پذیری قابل قبول و قابل گزارش می باشد روش تعیین حساسیت آنالییکال استفده از طریق ریوش آنالیز. آخرین تیتر رقت قابل شناساتی می باشد در اين روش یک کالیبراتور با غلظت پائین را به شکل سریال دایلوشن رقیق نموده و آخرین تیتر که در آن آنالیت قابل شناساتی باشد تحت عنوان حساسیت آنالیتیکال نامیده می شود ویژگیآنا تیک لوح لب : ویژگی آنالیتیکال به معنای عدم ایجاد واکنش متقاطع با سایر آنالیت های مرتبط را شامل می شود. روش اندازه گیری ویژگی آنالیتیکال : کاربرد پانل سرم هائی حاوی آنالیت های مشابه یا آنتی بادی های مشابه که احتمال واکنش متقاطع در آن وجود دارد 

صفحه 184:
Affinity قدرت اتصال بین یک اپی توپ یک آنتی ژن با یک جایگاه اتصال انتی بادی را گویند افينيتى يك ثابت تعادلی است که قدرت واکنش بین یک سایت اپی توب آنتی ژن ویک سایت گيرنده انتی بادی را توصیف می نماید ‎Avidity‏ اویدیتی یه طور کلی و مجموع قدرت سایت های آنتی ژنیک یک آنتی ژن را در اتصال به مجموع سایت های یک آنتی بادی را بیان می کند قدرت و نماد عددی اویدیتی همواره از مجموع عددی افینیتی بالاتر است 

صفحه 185:
64 ۶ ۲ له ؟ ف مه 4 وت 2 ۸ ۶ ‎٩‏ 6۵ ۰ سا #۵ 1 ۰ ۱۵۵11۷6 56۲۲۲۸ 561۴۱۴۱65 ۲۱۵۷ 60۳۵ specific pathogenfree (SPF) animals, if they exist, or from animals that have repeatedly tested negative by other tests or laboratories. Positive serum samples are frequently the most difficult to accumulate in large enough numbers for assay development. Ideally, they should come from natural infections that are confirmed by other diagnostic techniques and should represent a wide range of time points after infection 

صفحه 186:
64 ۶ ۲ له ؟ ف مه 4 وت 2 ۸ ۶ ‎٩‏ 6۵ ۰ سا #۵ + For assay de SAatiKe, 7 elRnoutd be accumulated and pooled, when necessary, to achieve volumes of several milliliters for each sample, which should then be placed in single-use aliquots (e.g., 0.1 ml) and frozen at -70°C until use. * Representative aliquots of frozen sera should be qualified by comparison to existing assays or by outside laboratories, where appropriate, and the results recorded in the serum lot documentation records. * Known positive and negative serum samples for assay prevalidation and validation must also be accumulated and aliquoted in a similar manner. 

صفحه 187:
نکات تهیه رقت در سرولوژی رقت های مختلف سرم با با ترکیب یک نسبت معین سرم با ماده رقیق کننده بدست می آید که ساده ترین مسیر آن تهیه رقت سریالی است در تهیه رقت سریالی تهیه رقت اول مناسب و اوت کردن حجم ثابت از مخلوط در رقت اخر نکات کلیدی کار می باشد که در تهیه رقت سرم در تست رایت و ویدال و سی آر پی و روماتوئید فاکتور و.. کاربرد روتین .دارد بهترين ماده رقيق كننده در سرولوزى نرمال سالين است به عنوان مثال جهت تهبه یک رقت ) به 0 بایستی یک بخش سرم را با م" بخش نرمال سالين مخلوط نمائیم 

صفحه 188:
Gervopwersiva ‏سرو کانورشن‎ ٠ ‏ایجاد و توسعه آنتی بادی اختصاصی قابل تشخیص بر عليه‎ ‏یک میکرو ارگانیسم در سرم خون را سرو کانورشن گویند‎ ‏كه به دليل ايمونيزه شدن ان فرد بر عليه ان ميكرو‎ ‏ارگانیسم می باشد‎ 

صفحه 189:
Testing paired Samples * Testing paired Samples Testing for infectious diseases is performed on acute and convalescent specimens (about 2 weeks apart) Paired sample. * Must see 4-fold or 2-tube rise in titre to be clinically significant ۰ 

صفحه 190:
Sero reversion * Sero reversion is the opposite of seroconversion. * This is when the tests can no longer detect antibodies or antigens in a patient’s serum 

صفحه 191:
* Antigen and Antibody reactions can be identified by different methods 

صفحه 192:
Precipitation * Precipitation Principle Soluble antigen + antibody (in proper proportions) -> visible precipitate Lattice formation (antigen binds with Fab sites of 2 antibodies) * Examples Double diffusion (Ouchterlony) * Single diffusion (radial immunodiffusion) * Imunoelectrphoresis Immunofixation 

صفحه 193:
Neutralization reactions + Neutralization reactions Similar in principle and interpretation of results Antibody-binding Hemagglutination inhibition (serum antibody reacts with known nonparticulate antigen -> binding occurs) Neutralization (antibody neutralizes toxin) After binding, antibody is not available to react in indicator system Results: NO agglutination or NO hemolysis = positive reaction Agglutination or hemolysis = negative reaction (antibody not bound in origin 

صفحه 194:
٠ Neutralization reactions : * Generally, positive control samples used in inhibition or neutralization tests show no reaction and negative control samples show a reaction (opposite of results in direct agglutination testing) + Example of inhibition: Hemagglutination inhibition test for rubella * Example of neutralization: antistreptolysin O test (ASO) Neutralization reactions 

صفحه 195:
Complement fixation (CF) * Complement fixation (CF) Antibody and antigen allowed to combine in presence of complement If complement is fixed by specific antigen-antibody reaction, it will be unable to combine with indicator system Precautions Serum must be heat- activated Stored serum becomes anti- complementary Extensive QC/standardization required Only use for IgM antibodies 

صفحه 196:
Imunoelectrphoresis (IEP) Qualitative * Imunoelectrphoresis (IEP)Qualitative A serum sample is electrophoresed through an agar medium ۰ A trough is cut in the agar and filled with Ab. ۰ A precipitin arc is then formed. Because Ag diffuses radially and Ab from a trough diffuses, the reactants meet in optimal proportions for precipitation 

صفحه 197:
Nephelometry Nephelometry Procedure Serum substance reacts with specific antisera and forms insoluble complexes Light is passed through suspension Scattered (reflected) light is proportional to number of insoluble complexes; compare to standards Examples Complement component concentration Antibody concentration (IgG, IgM, IgA, etc.) Immunofluorescence 

صفحه 198:
Immunofluorescence + Immunofluorescence Direct - add fluorescein- labeled antibody to patient tissue, wash, and examine under fluorescent microscope * Indirect - add patient serum to tissue containing known antigen, wash, add labeled antiglobulin, wash, and examine under fluorescent microscope Examples Testing for Antinuclear Antibodies (ANA) Fluorescent Treponemal Antibody Test (FTA-Abs) 

صفحه 199:
Agglutination * Agglutination Principle Particulate antigen + antibody -> clumping Lattice formation (antigen binds with Fab sites of 2 antibodies forming bridges between antigens) * Examples Direct agglutination (Blood Bank) * Passive Hemagglutination (treat RBC's with tannic acid to allow adsorption of protein antigens) * Passive latex agglutination (antigen attached to latex particle) 

صفحه 200:
Flow cytometry Flow cytometry Method of choice for T- and B-cell analysis (lymphocyte phenotyping) Principle Incubate specimen with 1 or 2 monoclonal antibodies tagged with fluorochrome Single cells pass through incident light of instrument (laser) which excites fluorochrome and results in emitted light of different wavelength Intensity of fluorescence measured to detect cells possessing surface markers for the specific monoclonal antibodies that were employed Forward light scatter indicates cell size or volume 90° side-scattered light indicates granulation 

صفحه 201:
Common uses Flow cytometry DNA analysis Reticulocyte counts Leukaemia/lymphoma classification CD 4 cell estimations in AIDS/HIV patients. 

صفحه 202:
Widal test is century old ,Is it loosing importance ? Widal test is century old ,|Is it loosing importance 2 In this reaction antibodies react with antigens on the surface of particulate objects and cause the objects to clump together, or agglutinate. These reactions were the earliest to be adapted to diagnostic laboratory. Widal test is used for diagnosis of typhoid fever. This test, developed by Georges Fernand |. Widal (French physician) in 1896, is now supplemented by more sophisticated procedures. 

صفحه 203:
Causes Of False-positive Widal Agglutination Tests Causes Of False-positive Widal Agglutination Tests Previous immunization with Salmonella antigen. Cross-reaction with non - typhoidal Salmonella. Variability and poorly standardized commercial antigen preparation. Infection with malaria other Enterobacteriaceae charring the same s-LPS . 

صفحه 204:
Causes of Negative Widal Agglutination Test: Causes of Negative Widal Agglutination Test The carrier state An inadequate inoculum of bacterial antigen in the host to induce antibody production Technical difficulty or errors in the performance of the test Previous antibiotic treatment Variability in the preparation of commercial antigens. Declining importance of Widal test : Declining importance of Widal test The value of the salmonella agglutination tests has declined as the incidence of typhoid fever has decreased, at least in the developed world, the general use of vaccines has increased, and ever increasing -numbers of antigenically related serotypes of Salmonella have been recognised 

صفحه 205:
Serology - Importance of repeated tests Serology - Importance of repeated tests Criteria for diagnosing Primary Infection 4 fold or more increase in titre of IgG or total antibody between acute and convalescent sera Presence of IgM Seroconversion A single high titre of IgG (or total antibody) - very unreliable Criteria for diagnosing Reinfection Four fold or more increase in titre of IgG or total antibody between acute and convalescent sera Absence or slight increase in IgM 

صفحه 206: