صفحه 1:
صفحه 2:
کشت ادراربه منظور تشخیص عفونت مجاري ادراري
دربیماران مبتلا به تکرار یا اضطرار در دفع ادرار, همچنین
در موارد تب با منشا ناشناخته و یا احتمال عفونت در
تجزیه ادرار ضرورت مي یابد
عوامل تداخل کننده در کشت ادرار؛
آلودگي ادرار با مدفوع, ترشحات واژن, استفاده از آنتي
پيوتيك
صفحه 3:
جمع آوری نمونه ادرار برای انجام
روش نمونه گيري:
متداولترین نمونه ,ادرار وسط تمیز گرفته شده می باشد.جهت
احتراز از آلودگی نحوه جمع آوری حائژ اهمییت می باشد.
. ( ابتدا منقذ ادرار باید به طور دقیق با محلول یددار جهت کاهش
آلودگي تضونه شستشو داده شود. طزف ادراز استزیل را به تجو
شیم جر فجن سناسب #بزاز داز مقداري ادزاز زا دوز ريخيه: و
0- 5 سي سي ادرار از ادرار وسط را تهیه نمایند, درپوش
ظرف را ببندند.)
صفحه 4:
- در صورتي که نمونه در منزل تهیه مي شود حداکثر طي 20 دقیقه پس از جمع آوري
ادرار باید آنرا در یخچال قرار داده. نمونه ادرار را مي توان ت24 -12 ساعت پس از جمع
آوري در یخچال نگه داري کرد
- در مورد بيماراني که قادر به دفع ادرار نمي باشند مي توان از سند ادراري استفاده کرد
نمونه هاي اطفال و کودکان کم سن را در کیسه هاي یکبار مصرف به نام Daun چمع
آوري مي كنند.اين كيسه ها داراي چسبي در اطراف پشت منفذ مي باشد که به پوست
پوبيك کودك مي چسبد. منفذ پیشابراه را پیش از چسباندن کیسه ها باید تمیز نمایند. حتي
المقدور صبح اول وقت کیسه را به شیرخوار وصل کرده و تا ظهر ادرار جمع شده ارسال
گردد.
صفحه 5:
DBP)! كشت plail نحوه
نمونه ادرار نباید سانتریقوژ شود و قبل از برداشت با لوپ باید کاملا
یکنواخت گردد از لوپ کالیبره شده استفاده شود , لوپ را بصورت
عمودی در ظرف ادرار فرو برده وبصورت یک خط در وسط محیط
کشت نهاده و سپس همانند شکل آن را پخش می نماییم . معمولاً از
لوپ 0.001 استفاده می شود به جز در سندرم حاد یوترال خانم ها و
تمونه سویر ایوبیک که لوب 0.01
بكار مى رود.
صفحه 6:
صفحه 7:
hee cles elses Jere
الف-باکتری های گرم منفی :
اشریشیاکولی, کلبسیل آتتروباکتره,پروتئوس, سو
دوجونا نها سا لمونا با اتانفی ج نانتتریا گونووه.
ب- باکتریهای گرم مثبت:
انتروکوکوس,استاف اپید رمیدیس,استاف
ساپروفیتیکوس, استاف ارئوس و
استرپتوکوکهای همولیتیک
صفحه 8:
تعداد کلونی ایجاد شده در محیط بلاد آگار
را بعد از 24 ساعت شمارش نموده در
ضریب حجم لوپ ضرب می نماییم
صفحه 9:
اولین اقدام جهت شناسایی باکتری تهیه ی گسترش و
زنگه آمیزی می: بأشند. بدین منظور ابتدا یک قطره pow
فيزيولوزى استريل بر روى لام (مركز لام ) قرار داده
مورد نظر را يرداشعة در قطره سرم فیزیولوژی حل
پس از خشک شدن با کمک حرارت ملایم شعله فیکس
صفحه 10:
صفحه 11:
)» (
محیط های کشت مورد نیاز برای کشت ادرار
®:Blood agar بلاد آگار
علاوه بر لینکه بکمحیط غنیشده استی کمحیط
شاخصب راعت شاند ادن خواصهمولیتیکب_اکتریهایی
.مثلاسترپتوکوکپ نومونیه و پیوژنز میباشد
9
إين محيط , با افزودن خون استريل (ترجيحا خون
كوسفندى) به نوترينت آكار استريل مذاب كه تا 50
درجه خنک شده باشد تهیه می گردد.
غلظت خون ممکن است برای اهداف خاصی از 50-
5 تغییر کند ولی معمول ترین غلظت برای کارهای
.روتین 9610 می باشد
و
صفحه 12:
Chocolate agar(Heated ۶
blood agar)
gpl محيط برأى:قموفيلوس انقلوانقا و ميكر
ارگانیسم های سخت رشد مثل نیسریا و پنوموکوک
مناسب است .در هنكام تهيه اين محيط در طى
حرارت دادن كلبول هاى قرمز ياره مى شوند و مواد
مغذی رها می گردند .
نوترینت آگار را ذوب نموده در حرارت 5 درجه به
آن خون استریل 0 اضافه نموده , خون و آگار را
با تکان دادن ملایم مخلوط کنید تا وقتی که رنگ
خون قهوه ای شکلاتی شود سپس در پلیت تقسیم
صفحه 13:
:Mueller Hinton agar مولر
هینتونآگار
این فحبظ در اضل براق جدا اسارى كونة
نیسریای بیماریزا تهیه شده . امروزه برای
دیسک های آنتی بیوتیکی به منظور آنتی
el Sou. به کار می رود
صفحه 14:
۲5-8 ائوزین متیلن بلوآگار
ری باکتری sl
روده ای گرم منفی است
#رنگ های ائوزین و متیلن بلو در حالی که به باکتری هلق
م منفی اجازه رشد می دهند. از رشد باکتری های
گرم مثبت جلوگیری می کند ۱
* عمدتاً پاتوژن های لاکتوز مثبت کلونی های آبی -
سیاه با درخشندگی فلزی متمایل به سبز ایجاد می
كنند (اشریشیا کلی).
٩ دیگر کلی فرم های لاکتوز مثبت مثل انتروباکتر
کلونی صورتی رنگ ایجاد می کنند.
کلونی های لاکتوز منفی (غیر تخمیری) شفاف بوده و یا
بی رنگ می باشند.
و
صفحه 15:
barre: مک کانکی
این محیط برای جداسازی باکتری های لاکتوز مثبت از لاکتوز
منفی می باشد, دارای نمک های صفراوی و مقدار کمی
کریستال ویوله جهت جلوگیری از رشد گرم مثبت ها است
no. باشد
صفحه 16:
*محیط sl» افتراقی جهت
شناسایی باسیل های گرم منفی
صفحه 17:
Triple Sugar Iron Agar(TSI®
Agar)
این محیط حاوی سه قند گلوکز.لاکتوز و ساکاروز می باشد معرف
محیط فنل رد بوده وعلاوه بر آن حاوی سولفات فروس بوده که برای
بررسی تولید سولفید هیدروژن استفاده می گردد.
* برای تفکیک باسیل های روده ای گرم منفی بر اساس تخمیر
کربوهیدرا رنگ در حضور معرف از قرمز به زرد) وتولید
سولفید هیدروژن(سیاه شدن درعمق لوله) به کار میرود.
صفحه 18:
#اكر محيط در عمق لوله زرد شود(اسیدی»» اما در سطح شیب دار
قرمز شود(قلیایی) . ارگانیسم گلوکز مثبت می باشد. رنگ زرد در
سطح شیب دار و عمق نشان می دهد که ارگانیسم مورد نظر گلوکز,
لاکتوز و ساکاروز مثبت می باشد. رنگ قرمز در سطح شیب دار و
عمق نشان می دهد که ارگانیسم تحت بررسی یک غیر تخمیر کننده
صفحه 19:
Control Red Slant Red Slant Yellow Slant Yellow Slant Red Slant
Red Butt Yellow Butt Yellow Butt Yellow Butt Yellow Butt
لها No Gas + 035 +Gas ی
No H2S. Ce SP) No H2S معنن +5
صفحه 20:
nosa
Sal.typhimur
ium
A
Pse.aerugi K
K
K
Shi.flexneri
صفحه 21:
MR-VP Broth محیط
اين محیط برای تفکیک باکتری ها براساس واکنش های
متیل رد و وژسپروسکوثر به کار می رود .
در اين محیط با افزودن معرف آلفا نفتول به کشت
های میکروبی که قادر به تولید محصول
استوئين(استيل متيل كريينول) از تخمير
دكستروز(كلوكز) مى باشند در حضور اكسيرن و قليا
اكسيد مى شود تا دى استيل را توليد كند ورنكٌ قرمز
توليد مى كند . اين واكنش را وزسيروسكوثر مثبت
گویند .
و ح
صفحه 22:
۴
positive
Voges-Proskauer
صفحه 23:
MR
#میکروب های متیل رد مثبت , مقادیر زیادی اسید
در طی تخمیر گلوکز تولید می کنند که بر سیستم
بافری فسفات غلبه کرده و به محض افزودن
صفحه 24:
ل
E.Coli a
Enterobacter
aerogenes
صفحه 25:
Sulfide Indol®
Motility(SIM)
این محیط برای جداسازی باسیل های روده ای بر
ساس :تولية نت لهت اندحول "وهر كناب كار يمت
رود.اين مشخصه ها در شناسایی انتروباکتریاسه
مخصوصاً سالمونلا وشیگلا کمک می کند .در اين
محیط تیوسولفات سدیم و سولفات آمونیم فروس
معرف های سولفید هیدروژن ,معرف کواکس با
ارلیخ برای اندول که در اثر استفاده از پیتون
کازئین که سرشار از تریپتوفان است به وجود می
آید استفاده می شود و شناسایی حرکت به علت
طبیعت نیمه جامد محیط امکان پذیر است.
صفحه 26:
GIM medium: Gulfur test
H,S-NEGATIVE: H,S-POSITIVE:
no black black precipitate
precipitate formed
formed
صفحه 27:
si™medium: Motility test
POSITIVE: NEGATIVE:
Organism moves Organism does NOT
away from stab move away from
stab
صفحه 28:
E.Coli
Sal.typhimu
rium
Shigella
flexneri
صفحه 29:
:Simmons Citrate Agar®
برای افتراق باکتری های گرم منفی بر اساس
مصرف سیترات به کار مي رود .
ارگانیسم هایی که قادرند آمونیم دی هیدروژن
فسفات و سیترات سدیم را به عنوان تنها منابع
نیتروژن وکرین مصرف کنند به طور نسبی بر روی
اين محيط رشد می منند و واکنش قلیایی تولید می
کنند که با تغییر رنگ معرف برم تیمول بلو از
سبز(خنثی) , به آبی(قلیایی) مشخص می شود.
صفحه 30:
Seren
2eVenLab it
صفحه 31:
آبی در سطح + Enterobact
شیب دار er
aerogenes
عدم تغيير - E.Coli
صفحه 32:
3
۳
0
۳
+
at
at
0
+E
3
+E
3
+E
3
3
3
صفحه 33:
کلونی
rowth
tamination
00 - 100000 Possible
tion
< 100 Probably infection
وجود 100000 يا بيشتر ک لونیبه ازاءهر میلیا یتراز ادرار
به عنوانعفونتهر نظر گرفته میشود ولیدر مواردعکه ذکر
.موگردذ با تعذاد ک لونیکمتر نیز ک شّابلی رررسماست
صفحه 34:
*
درصورتیکه نفوته ادرار با سرنگاز مثانه آسپیره شده
باشد تتعداد 5 لونیهر چقدر باشد قابلارززشبوده و می
بايسيتزمايشادامه يابد.
* لگر تعداد کلونیکمتر از 10000 باشد بریسیب یشتر لاتم
نیستجزء در مواردیکه کلونیاستافاورئوسباشد که در لین
صورنتعداد هر چقدر باشد داراعارزشبوده وپیگیرعمیگردد.
* در خانم ها با فعا إتجنسوكه سندرم حاد يوترا.لوارند وجود
تعداد 100 كلونىيه همرله بيورويه عنوانعفونتلارا ركدر
.نظر گرفته شده و روند کشتادامه میبابد
صفحه 35:
در صورت رشد چند نوع کلونی رعایت
نکات زیر ضروری است
نوع میکروبوا بر اساساهمینآنمشخصمیک نیم -1
2باتوجه به تعداد کلونوهر کدام از باکترءها که
یس کلونیب_یشتریب ود گزارشمیگردد (در
باكترعها ازنظر اهمیتدر یکرده باشند).
اقاوشه سه توغ :وناج مقر #للوتي ررروع حيط كشت
.نشانه لاودكئاست
صفحه 36:
مواردى كه باكترى در ادرار نیست wy
بول سفید وجود دارد
لنتىوبيوتيكمصرقشذه اسخة
متاكتريها ندم تند ببروسلا كله محيظا اختصاصدورما2
.لنكوباسيونبيشترىمىخواهند ودر كشتهديده نمىشوند
.مصرفزياد مايعاتهماعنتكاهشتعداد باكترىمىوشود-3
صفحه 37:
تشخيص افتراقى كوكسى های گرم
مستت
لنجام تسيكانا لل : -1
استافها کاتالز مثبتو استربک اتا لژ منفومی
باشد
استريها نار نظ وهوولين به سددسته: انا وبظا و
گاما همولیز تقسیم میشوند .
مهمتریناستربها در دسته لا همو لیز استرپ
پنومونیه میباشد ay oS لپتوچینحساسلسنو
. استرپویریدنسکه به لپتوچینمقاوم میباشد
صفحه 38:
0 Group Somos
كم D 6 06.
تسا ین ۳ تکیت
Coa ety
Test
Hemoly & ادکچیهااتب & vidal sl , آلفا آلفا
se ° هيجكدام هیچکدام هیچکدام
Bacitera. 5 R R.S R R R.S 5
cin
SxXT R 8 5 R 5 5 5
Optochi ۶ R R R R R 5
n
222 2222م
صفحه 39:
استاف ومیکروکوک هردو كاتالاز
مثبت می باشند ولد
میکروکوک ها به شدت کاتالاز
متبت هستند
* میکروکوک اکسیداز مثبت 3
صفحه 40:
خاکستری , سفید. زرد سفید زرد طلانی پیگمان
پرر:
صفحه 41:
استاف اپیدرمیدیس به پلی میکسین YY
.مقاوم ولی ساپروفتیکوس حساس است
استاف ساپروفیتیکوس به نووبیوسین
alle اما شار استاف ها حساس می
صفحه 42: